一种高酰基三赞胶及其生产菌株的分子标记和应用制造技术

本发明专利技术提供了一种高酰基三赞胶及其生产菌株的分子标记和鉴定方法，属于微生物制品技术领域。本发明专利技术提供的高酰基三赞胶，主链具有由葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸和甘露糖依次连接所形成的重复单元，其中葡萄糖基的C4位被乙酰基取代，葡萄糖基的C2位或者C6位被甘油酰基取代；所述甘油酰基的质量百分含量为4.5％～7.8％，所述乙酰基的质量百分含量为6.0～8.5％。根据所含杂质聚β羟基丁酸的质量，又分为普通型高酰基三赞胶和透明型高酰基三赞胶。本发明专利技术根据生产菌株的不同，提供了检测普通型高酰基三赞胶或透明型高酰基三赞胶的分子标记，为鉴定高酰基三赞胶的合成菌株及所有高酰基三赞胶的中轻度加工产品提供了有效工具。基三赞胶的中轻度加工产品提供了有效工具。基三赞胶的中轻度加工产品提供了有效工具。

【技术实现步骤摘要】
一种高酰基三赞胶及其生产菌株的分子标记和应用


[0001]本专利技术属于微生物制品
，具体涉及一种高酰基三赞胶及其生产菌株的分子标记和应用。

技术介绍

[0002]微生物胞外多糖是一类由微生物合成、性能多样、生物相容、可降解并及可持续生产的生物胶，已经广泛应用于食品、日化、医药、环境保护、造纸、石油、建材等二十多个行业几百种用途，是一类与人们生活息息相关的生物技术产品。目前，广泛应用的微生物多糖有黄原胶、鞘氨醇胶、可得然胶、透明质酸、纤维素和葡聚糖等。鞘氨醇胶是由鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)菌株产生的一类主链结构相似、侧链差异明显的微生物胞外多糖。比如，无糖基侧链的结冷胶可形成热可逆凝胶，其中葡萄糖残基C2位和C6位被甘油酰基和乙酰基取代的高酰基结冷胶可形成弹性凝胶，应用于食品等领域；而经脱酰基处理的低酰基结冷胶可形成脆性凝胶，在食品、日化、医药行业应用广泛。韦兰胶主链葡萄糖C3位链接甘露糖或者鼠李糖侧链，C6位被乙酰基取代，使其具有更高的耐温性能，在石油钻采领域应用良好。因此，不同的侧链糖基和酰基的赋予了鞘氨醇胶不同的理化特性及应用潜力。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种高酰基三赞胶及其生产菌株的分子标记和应用。
[0004]本专利技术提供了一种高酰基三赞胶，所述高酰基三赞胶具有如式I所示的重复单元，其中葡萄糖基的C4位被乙酰基取代，葡萄糖基的C2位或者C6位被甘油酰基取代；所述甘油酰基的质量百分含量为4.5％～7.8％，所述乙酰基的质量百分含量为6.0～8.5％；n为自然数；
[0005][0006]优选的，所述高酰基三赞胶根据所含杂质聚β羟基丁酸的质量，分为普通型高酰基三赞胶和透明型高酰基三赞胶。
[0007]优选的，所述透明型高酰基三赞胶纯度≥95％，杂质聚β羟基丁酸的质量含量不高于5％。
[0008]优选的，质量浓度0.1％的透明型高酰基三赞胶水溶液在600nm波长下测定透光度为60％～90％。
[0009]优选的，所述普通型高酰基三赞胶中杂质聚β羟基丁酸的质量含量为5％～30％。
[0010]优选的，质量浓度0.1％的普通型高酰基三赞胶水溶液在600nm波长下测定透光度为0～20％。
[0011]本专利技术提供了一种用于鉴定所述透明型高酰基三赞胶或其生产菌株的分子标记，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
[0012]优选的，以鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)NXdP菌株的DNA为模板，采用核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的反向引物扩增得到。
[0013]本专利技术提供了一种用于鉴定所述普通型高酰基三赞胶或其生产菌株的分子标记，核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。
[0014]本专利技术提供了所述分子标记在鉴定高酰基三赞胶的生产菌株或所述高酰基三赞胶的加工产品中的应用。
[0015]本专利技术提供的高酰基三赞胶，主链具有由葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸和甘露糖依次连接所形成的重复单元，其中葡萄糖基的C4位被乙酰基取代，葡萄糖基的C2位或者C6位被甘油酰基取代；所述甘油酰基的质量百分含量为4.5％～7.8％，所述乙酰基的质量百分含量为6.0～8.5％。所述高酰基三赞胶能够应用于食品加工中。
附图说明
[0016]图1为HPLC法测定高酰基三赞胶的单糖组成结果；
[0017]图2为
13
C NMR法测定高酰基三赞胶的单糖组成；
[0018]图3为HPLC法测定高酰基三赞胶产品的酰基组成和含量结果；
[0019]图4为高酰基三赞胶产品的糖链一级结构；
[0020]图5为普通型和透明型高酰基三赞胶的透光率对比图。
[0021]图6为普通型和透明型高酰基三赞胶的悬浮性能。
具体实施方式
[0022]本专利技术提供了一种高酰基三赞胶，所述高酰基三赞胶具有如式I所示的重复单元，其中葡萄糖基的C4位被乙酰基取代，葡萄糖基的C2位或者C6位被甘油酰基取代；所述甘油酰基的质量百分含量为4.5％～7.8％，所述乙酰基的质量百分含量为6.0～8.5％；n为自然数；
[0023][0024]在本专利技术中，所述高酰基三赞胶的主链是n个重复单元顺次连接，所述重复单位是由葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸和甘露糖依次连接得到，这与其他种类三赞胶的单糖组成相同。
[0025]在本专利技术中，所述高酰基三赞胶根据所含杂质聚β羟基丁酸的质量，优选分为普通型高酰基三赞胶和透明型高酰基三赞胶。
[0026]在本专利技术中，质量浓度0.1％的透明型高酰基三赞胶水溶液在600nm波长下测定透光度为60％～90％。
[0027]在本专利技术中，普通型或透明型高酰基三赞胶的检测方法包括两种，一种是根据杂质聚β羟基丁酸(PHB)的含量检测，第二种是根据三赞胶的透光度检测；其中根据杂质聚β羟基丁酸的含量检测透明型高酰基三赞胶的方法，优选包括以下步骤：取待检测高酰基三赞胶粉末按照100mg：1mL的比例添加氯仿，充分混合，离心，取上清液除去氯仿，测定PHB沉淀的含量。杂质聚β羟基丁酸的质量含量优选不高于5％的高酰基三赞胶为透明型高酰基三赞
胶，杂质聚β羟基丁酸的质量含量为30％～70％时为普通型高酰基三赞胶。根据三赞胶的吸光度的检测透明型高酰基三赞胶方法，优选包括以下步骤：配制0.1％的高酰基三赞胶水溶液，在600nm下测定其透光率。透光率在0～20％之间为普通型，透光率在60～90％之间为透明型。
[0028]在本专利技术中，所述高酰基三赞胶的生产方法，优选将高酰基三赞胶的生产菌株进行发酵，收集发酵液，调节pH至3.0得到絮状沉淀，调节pH至中性收集沉淀，干燥得到高酰基三赞胶。
[0029]在本专利技术中，所述透明型高酰基三赞胶的生产菌株优选为鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)NXdP菌株。所述鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)NXdP菌株在公开号CN 108795969A专利中记载公开。所述发酵方法优选参考CN 108795969A专利中记载的方法进行。
[0030]在本专利技术中，所述普通型高酰基三赞胶的生产菌株优选为鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)T3菌株，菌株保藏编号为CGMCC No.10150，在专利公开号为CN104651284A的专利中记载公开。所述发酵方法参见CN104651284A的专利记载的方法即可。
[0031]在本专利技术中，所述高酰基三赞胶作为悬浮稳定剂在食品加工中应用。
[0032]本专利技术提供了一种用于鉴定所述普通型高酰基三赞胶或其生产菌株的分子标记，核苷酸序列如SEQ ID NO：4(CCTGGTGGGCCTTCTCGATGCTCGGCGTCGCCAGCTTCATCCGCGGCTTCATGCATCTCGGCGTGAAGGAAGCGATGCGCGACTTCCGCTTCTGGCCCGA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高酰基三赞胶，其特征在于，所述高酰基三赞胶具有如式I所示的重复单元，其中葡萄糖基的C4位被乙酰基取代，葡萄糖基的C2位或者C6位被甘油酰基取代；所述甘油酰基的质量百分含量为4.5％～7.8％，所述乙酰基的质量百分含量为6.0～8.5％；n为自然数；2.根据权利要求1所述高酰基三赞胶，其特征在于，所述高酰基三赞胶根据所含杂质聚β羟基丁酸的质量，分为普通型高酰基三赞胶和透明型高酰基三赞胶。3.根据权利要求2所述高酰基三赞胶，其特征在于，所述透明型高酰基三赞胶纯度≥95％，杂质聚β羟基丁酸的质量含量不高于5％。4.根据权利要求2或3所述高酰基三赞胶，其特征在于，质量浓度0.1％的透明型高酰基三赞胶水溶液在600nm波长下测定透光度为60％～90％。5.根据权利要求2所述高酰基三赞胶，其特征在于，所述普通型高酰基三赞胶中杂质聚β羟基丁酸的质量含量为5％～30...

【专利技术属性】
技术研发人员：马挺，吴萌萌，李国强，石壮壮，明月，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：