一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，包括以下步骤：S1：提取铁皮石斛多糖；S2：采用热溶剂法合成氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN

【技术实现步骤摘要】
一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法


[0001]本专利技术属于铁皮石斛多糖纯化
，具体涉及一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法。

技术介绍

[0002]铁皮石斛作为一种传统名贵的中药材，是一种具有高药用价值的食用植物，其主要活性成分有多糖、生物碱、类黄酮、多酚、微量元素和氨基酸等，其中多糖含量最高，2020版《中国药典》记载铁皮石斛中多糖含量不低于25％。铁皮石斛多糖具有降血糖、护肝、抑菌、抗肿瘤、抗骨质疏松、保护肠胃、抗氧化和增强免疫力等功效。
[0003]铁皮石斛作为一种天然产物，其有效成分复杂而且含量低，难于富集，如何从复杂的天然产物中纯化和分离有效成分，是当前加快天然产物应用进程的一个重要问题。用传统的分离方法，例如大孔树脂，硅胶柱色谱等方法，这些方法虽然工艺简单，但是溶剂用量大、污染严重、耗时耗能、经济成本高，对于一些结构和性质相近的成分难以实现有效的分离。现有的铁皮石斛多糖分离方法，存在步骤繁琐，多糖得率低、损失严重的问题，因此，寻找高效、环保且低成本的铁皮石斛多糖纯化方法便成为关键。目前，本领域中仍然缺乏对铁皮石斛多糖进行富集分离、对其有效成分进行分离纯化的方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的一个目的是针对以上要解决的技术问题，提供一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，其可以高效、环保、经济地实现铁皮石斛多糖的富集分离，同时可以为中药有效成分的富集分离方法的研究提供技术启示。
[0005]为了实现以上专利技术目的，本专利技术提供了一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，包括以下步骤：
[0006]S1：提取铁皮石斛多糖；
[0007]S2：采用热溶剂法合成氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN
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NH2：先制备树枝状介孔纳米颗粒unDMSN，然后通过后接枝方法对其进行氨基修饰，得到DMSN
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NH2；
[0008]S3：铁皮石斛多糖的纯化：将步骤S2制得的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN
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NH2超声溶解在孵育溶液中，然后加入步骤S1提取的铁皮石斛多糖样品，利用旋转培养混合器振荡吸附至少3小时后，离心收集吸附了铁皮石斛多糖的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN
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NH2，然后用10％SDS洗涤三次，再用蒸馏水洗涤沉淀，用滤纸吸附多余的液体；接着加入70％的乙醇溶液置于25℃恒温摇床以150rpm振荡解吸24h，4000rpm离心15min，取上清，得到纯化后的铁皮石斛多糖。
[0009]相比于现有技术，本专利技术采用热溶剂法合成树枝状介孔材料DMSN
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NH2，然后利用树枝状介孔材料DMSN
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NH2对铁皮石斛多糖类化合物的良好的吸附和解吸性能，实现对铁皮石斛多糖的纯化，使铁皮石斛多糖含量由最初的6.55％,分别提高到51.14％。本专利技术的铁
皮石斛多糖纯化方法工艺简单，可实现高效、环保、经济地富集分离铁皮石斛多糖，且该纯化方法有望为食品产业中含糖物质的富集分离提供新思路。
[0010]优选地，步骤S1包括以下步骤：
[0011]S1a：将铁皮石斛原药材，除去杂质后剪成小段，50℃烘干，打粉，过筛备用；
[0012]S1b：称取铁皮石斛药材粉末和蒸馏水混合，然后采用回流提取法对铁皮石斛多糖进行提取。
[0013]优选地，步骤S1b中，所述铁皮石斛药材粉末和蒸馏水的质量比为1:100，提取次数为2次，提取时间为1.5h。
[0014]优选地，步骤S2包括以下步骤：
[0015]S2a：制备树枝状介孔纳米颗粒unDMSN：将TEA加入去离子水中并于80℃的油浴锅搅拌30分钟，然后添加CTAB和NaSal，继续搅拌1h后，滴加TEOS到上述混合的溶液中，在80℃下继续搅拌4h；反应结束后，通过9000rpm离心10min收集所得产物，并用乙醇和水洗涤各洗两次以除去残留的反应物；随后，将获得的沉淀物用HCl和乙醇的混合溶液在80℃下萃取两次以除去残留的有机模板，最后在50℃下真空干燥12h得到白色固体样品，即树枝状介孔纳米颗粒DMSN；
[0016]S2b：将步骤S2a制得的树枝状介孔纳米颗粒unDMSN分散在乙醇中在超声处理10min后，继续搅拌15min，然后在剧烈搅拌下将氨水、去离子水和APTES加入上述溶液中，继续剧烈搅拌12h，最后将最终产物用乙醇洗涤，并在50℃真空中干燥8h以上。
[0017]优选地，步骤S2a中，TEA、去离子水、CTAB、NaSal、TEOS的用量比例为0.68g:25mL:0.38g:0.168g:4mL。
[0018]优选地，步骤S2a中，所述HCl和乙醇的混合溶液中HCl和乙醇的体积比为1:9。
[0019]优选地，步骤S2a中，沉淀物用HCl和乙醇的混合溶液在80℃下萃取两次，每次萃取24h。
[0020]优选地，步骤S2b中，树枝状介孔纳米颗粒unDMSN、乙醇、氨水、去离子水、APTES的用量比例为500mg:100mL:2.5mL:2.5mL:1mL。
[0021]优选地，步骤S3中，氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN
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NH2和孵育溶液的用量比为40mg:30mL。
[0022]优选地，步骤S3中，所述孵育溶液为去离子水。
[0023]本专利技术提出一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，其中氨基树枝状介孔纳米颗粒(DMSN
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NH2)拥有高的比表面积、大的孔体积、内表面可及性等优势，是具有树枝状纤维形态的介孔材料。DMSN
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NH2是由二氧化硅纤维或纳米褶皱作为结构单元构成的，它们沿颗粒的中心径向方向排列，经过0到4代的增迭过程，形成了中心辐射状的孔道结构，其孔径从颗粒内部到颗粒表面逐渐增大，因此，DMSN
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NH2呈现树枝状形貌。此外，在迭代过程中，均匀的小介孔可被引入到纤维或皱纹中，因此DMSN
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NH2具有多级孔结构，有着中心径向孔隙和均匀的小介孔，不规则地分布在二氧化硅球表面。这种独特的分层孔结构可以增强具有不同大小的客体分子在二氧化硅中的扩散，实现小分子分散在小介孔，而较大分子如生物分子、荧光分子等分散在中心径向的大孔中，因此具有多级孔道结构的树枝状介孔二氧化硅有望成为多功能载体。与均匀有序的六方介孔或无序大中孔MSN相比，具有不规则孔结构的树枝状颗粒比具有均匀有序介孔和大中孔结构的MSN有着更高的
负载能力。因此，将DMSN
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NH2材料应用于铁皮石斛多糖的纯化中，为铁皮石斛多糖的富集分离提供一条髙效、环保、经济和工艺简单的途径，也为中药有效成分的富集分离方法的研究提供理论依据。
附图说明
[0024]图1为氨基树枝状介孔材料纳米颗粒DMSN
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NH2的制备流程图
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：提取铁皮石斛多糖；S2：采用热溶剂法合成氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN
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NH2：先制备树枝状介孔纳米颗粒unDMSN，然后通过后接枝方法对其进行氨基修饰，得到DMSN
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NH2；S3：铁皮石斛多糖的纯化：将步骤S2制得的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN
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NH2超声溶解在孵育溶液中，然后加入步骤S1提取的铁皮石斛多糖样品，利用旋转培养混合器振荡吸附至少3小时后，离心收集吸附了铁皮石斛多糖的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN
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NH2，然后用10％SDS洗涤三次，再用蒸馏水洗涤沉淀，用滤纸吸附多余的液体；接着加入70％的乙醇溶液置于25℃恒温摇床以150rpm振荡解吸24h，4000rpm离心15min，取上清，得到纯化后的铁皮石斛多糖。2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S1包括以下步骤：S1a：将铁皮石斛原药材，除去杂质后剪成小段，50℃烘干，打粉，过筛备用；S1b：称取铁皮石斛药材粉末和蒸馏水混合，然后采用回流提取法对铁皮石斛多糖进行提取。3.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于：步骤S1b中，所述铁皮石斛药材粉末和蒸馏水的质量比为1:100，提取次数为2次，提取时间为1.5h。4.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S2包括以下步骤：S2a：制备树枝状介孔纳米颗粒unDMSN：将TEA加入去离子水中并于80℃的油浴锅搅拌30分钟，然后添加CTAB和NaSal，继续搅拌1h后，滴加TE...

【专利技术属性】
技术研发人员：李远平，
申请(专利权)人：梅州绿盛林业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：