外周血中CX3CL1及IL-8因子的检测方法及检测试剂盒和用途技术

本发明专利技术属于医学和分子生物学技术领域。具体涉及CX3CL1及IL

【技术实现步骤摘要】
外周血中CX3CL1及IL
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8因子的检测方法及检测试剂盒和用途


[0001]本专利技术属于分子生物学和医学领域。涉及外周血中CX3CL1及IL
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8因子的检测方法及检测试剂盒，具体涉及同时检测CX3CL1及IL
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8因子的方法和试剂盒及其用于与原发性快眼动期睡眠行为障碍相关性的检测制品。

技术介绍

[0002]原发性快眼动期睡眠行为障碍(idiopathic rapid eye movement sleep behavior disorder, iRBD)是异态睡眠的形式之一，在老年人群中发病率约为1％，其主要特征是快动眼睡眠期肌肉失张力的功能丧失及梦境演绎行为，属于一种慢性睡眠障碍，易影响到患者及其家属睡眠质量及情绪状态。随着病程的进展，大部分iRBD会逐渐的转变为其他突触核蛋白谱系病(synucleinopathies)，如帕金森病(Parkinson disease,PD)、多系统萎缩(Multiplesystem atrophy,MSA)、路易体痴呆(Dementia with lewybody，DLB)等，这类疾病存在相似但不完全相同的病理学基础，均在尸检中发现不同脑区存在突触核蛋白沉积，但疾病之间的内在联系仍在研究当中。由于iRBD作为突触核蛋白谱系病的一种重要的危险因素和前期表现，现今受到越来越多研究者的关注。目前iRBD已被国际PD和运动障碍学会定义为PD前驱期的一种表现，但该病致病的神经环路和其转变成其他突触核蛋白谱系病的潜在机制尚不明确，临床工作者对iRBD向突触核蛋白谱系病表型转变的机制及其预测因素知之甚少，这阻碍了临床上人们对这一疾病的早期诊断和干预。
[0003]近年来，有关突触核蛋白谱系病与炎症因子的相关性研究越来越多，证实了外周血炎症因子对于早期PD等疾病具有一定诊断价值。但尚未有关iRBD患者外周血炎症因子在其诊断价值中的报道，仅有的研究提示，iRBD患者黑质区小胶质细胞的活性明显增高，且与壳核区多巴胺神经元的丢失呈正相关[Stokholm Morten Gersel,IranzoAlex,stergaardKaren et al.Assessment ofneuroinflammation in patients with idiopathic rapid
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eye
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movementsleep behaviour disorder:a case
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control study.[J].Lancet Neurol,2017,16:789
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796]。因此，研究iRBD患者外周血炎性因子，并研究其在iRBD诊断及转化为突触核蛋白谱系病中的预测意义，具有重要的研究价值和应用前景，如果通过发现炎性因子水平可预测其向PD等的转化，并做到提前干预，将会促进我国生物医疗技术的发展，并为我国每年节省巨大的医疗费用。
[0004]目前所发现的炎性因子，主要包括趋化因子及细胞因子。趋化因子CX3CL1在外周血及脑脊液水平均有研究证实其与PD、MSA等的相关性。在阿尔茨海默病及其早期认知障碍期，CX3CL1的水平均有明显变化[Kim Tae
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Suk,Lim Hyun
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Kook,Lee Ji Youl et al.Changes inthe levels of plasma soluble fractalkine in patients with mild cognitive impairment andAlzheimer's disease.[J].Neurosci.Lett.,2008,436:196
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200.],而iRBD作为PD的早期， CX3CL1是否也有早期变化，IL
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8与PD的相关性既往研究也有证实，其在PD患者体液中明显升高，但iRBD患者中其水平如何，尚未有研究报道。
[0005]综上所述，为了最终实现PD的早期诊断及干预，本领域迫切需要寻求iRBD患者外
周血诊断及病情监测标记物，并开发检测iRBD患者外周血CX3CL1及IL
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8的方法和试剂盒。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种检测iRBD患者外周血CX3CL1及IL
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8因子方法及检测试剂盒。所述方法及检测试剂盒有助于提供对该疾患早期诊断辅助依据。
[0007]本专利技术提供了一种外周血浆CX3CL1及IL
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8的检测方法，iRBD患者外周血CX3CL1 及IL
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8水平显著高于普通人群。
[0008]较好的，该方法包括将CX3CL1及IL
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8的检测物质与外周血血浆孵育；和/或
[0009]检测CX3CL1及IL
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8的浓度。
[0010]较好的，该方法还包括分离获得外周血样品的血浆的步骤。
[0011]较好的，所述的检测物质含有CX3CL1及IL
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8的引物、探针或者抗体。
[0012]较好的，所述的CX3CL1及IL
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8的检测物质是包被CX3CL1及IL
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8抗体的免疫反应微孔板。
[0013]本专利技术提供了一种检测试剂盒，包括CX3CL1及IL
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8的检测物质。
[0014]例如，同时包被CX3CL1及IL
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8两个抗体的MSD检测试剂盒。
[0015]较好的，所述的试剂盒含有：
[0016]提取外周血的血浆的试剂；
[0017]包被CX3CL1及IL
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8抗体的免疫反应微孔板；
[0018]和/或
[0019]显示CX3CL1及IL
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8蛋白含量的试剂。
[0020]在本专利技术的一个优选实施中，所述的免疫反应微孔板通过300ulLinker+200ul对应的生物素标记的抗体混合均匀，获得包被U
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plex MSD板。
[0021]MSD即Meso Scale Discovery电化学发光技术。MSD平台上测定样本总类主要包括: 血清，血浆，培养上清，细胞/组织裂解液，脑脊液，尿液，关节滑液，唾液，痰液，粪便提取液，眼睛房水，各类灌洗液等基本所有的生物学样本。对于最简单的血浆样本来说， MSD也可兼容不同抗凝剂的血浆样本。
[0022]本专利技术还提供了上述检测试剂盒的应用，即用于检测原发性快眼动期睡眠行为障碍患者外周血中CX3CL1及IL
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8的浓度水平。
[0023]在本专利技术的一个优选实施中，仅需要原发性快眼动期睡眠行为障碍患者外周血浆25ul 即可检测双因子的浓度。
[0024]具体而言，本专利技术提供给了上述试剂盒在检测原发性快眼动期睡眠行为障碍患者外周血炎性因子浓度中的用途，所述的用途在于检本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测外周血浆中CX3CL1及IL
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8浓度水平的方法，其特征在于，该方法包括将CX3CL1及IL
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8的检测物质与外周血血浆孵育；和/或检测CX3CL1及IL
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8的浓度。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该方法还包括分离获得外周血样品的血浆的步骤。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的检测物质含有CX3CL1及IL
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8的引物、探针或者抗体。4.根据权利要求1
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3中任意一种所述的方法，其特征在于，所述的CX3CL1及IL
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8的检测物质是包被CX3CL1及IL
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8抗体的免疫反应微孔板。5.一种检测试剂盒，其特征在于，包括CX3CL1及IL

【专利技术属性】
技术研发人员：刘军，李媛媛，康文岩，罗宁迪，牛梦月，赵傲楠，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属瑞金医院，
类型：发明
国别省市：