抗血小板聚集干扰的检测方法、试剂及其应用技术

本发明专利技术公开了抗血小板聚集干扰的检测方法、试剂及其应用。所述检测方法所述方法包括：用解聚剂对血液样品进行防止和/或消除所述血液样品中的血小板聚集的处理，其中所述解聚剂包括至少一种选自由具有氨基的化合物和含铵根离子的化合物所组成的组；和对经所述解聚剂处理的血液样品用血液分析仪进行检测，以至少获得血小板和/或红细胞的检测信息。所述解聚剂对多种血小板情聚集的情况均有解聚作用，在短时间内即可使血小板解聚，无需水浴控温和延长反应时间等额外条件，可方便地消除样品中血小板聚集，获得准确的血细胞的检测参数。获得准确的血细胞的检测参数。获得准确的血细胞的检测参数。

【技术实现步骤摘要】
抗血小板聚集干扰的检测方法、试剂及其应用


[0001]本专利技术涉及血液检测，特别涉及存在血小板假性聚集情况下解除其干扰的血小板和/或红细胞的检测方法及相关试剂。

技术介绍

[0002]在血液细胞的分析中，血小板假性聚集会引起错误的血液细胞计数及分类，进而导致病人的错误诊断和治疗。我们很容易混淆血小板假性聚集与某些危及生命的疾病，比如肝素诱导的体内血小板聚集(HIP)，弥漫性血管内凝血(DIC)，或者产生错误的治疗决策，比如错误的用药，给患者进行不恰当的血小板输注，甚至脾切除手术。血小板假性聚集的原因繁多且复杂，常见原因包括：乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少(EDTA-PTCP)、多重抗凝剂依赖的血小板聚集、血小板卫星现象、高胆固醇和高三酰甘油血症、低温环境引起的血小板冷聚集、采血不顺和抗凝管的材质引起的聚集等。关于血小板假性聚集机理的研究不多，多数集中在EDTA-PTCP。EDTA是国际血液学标准化委员会(ICSH)认定的临床上广泛使用的抗凝剂，EDTA引起的血小板假性聚集最早于1969年首次报道，其主要原因可能是EDTA-PTCP患者的血液中存在依赖EDTA的抗血小板抗体，当血液在体外与EDTA抗凝剂混合时，这些抗体可以识别血小板膜上的黏连受体糖蛋白Ⅱb
-Ⅲ
a(GpⅡb
-Ⅲ
a)，引起血小板聚集激活抗原的表达，比如颗粒膜蛋白140(GMP140，别名CD62P或P-选择素),Ⅲ型溶酶体糖蛋白(Gp55，别名CD63)以及凝血酶敏感蛋白等，进而激活酪氨酸激酶，导致血小板聚集。<br/>[0003]血小板假性聚集不仅导致血小板相关临床参数错误，还会影响到其他血细胞临床参数的准确性，给临床诊断和治疗带来不利后果。因此，发现并消除血液样品中的血小板聚集，是体外血液检测中一直期望解决的问题。
[0004]目前，临床上已采取一些解决方案来消除或减少血小板假性聚集。例如，将血小板假性聚集的血液样品加热到37摄氏度，同时震荡一段时间，或者在血液样品中加入添加剂来阻止血小板聚集。这些添加剂比如，抗凝剂(如：柠檬酸钠、肝素钠、ACD、CTAD、CPT、CaCl2和肝素钠的混合物等)；血小板计数稀释液(含有叠氮化钠、叠氮化钙、氟化钠等混合物)；抗血小板药物(在取血后10分钟内加入)；氨基糖苷类抗生素(如阿米卡星和卡那霉素，采血后1小时内加入，但仅对部分样品有效)。
[0005]这些防止离体血液样品中血小板聚集的方法和试剂，要么造成检测步骤复杂，要么解聚血小板的效果不够理想或者仅对部分原因造成的聚集有效果，往往需要重新采血并配制特定的解聚剂。在实践中，加入添加剂后还需要镜检观察血小板是否解聚，以确定解聚效果是否足以进行血液分析。必要时需要在冰浴或水浴中延长作用时间，以保证血小板的解聚效果。
[0006]因此，在体外血液检测中仍需要操作简单、普适性好的血小板解聚方法和试剂以获得准确的血小板检测参数。

技术实现思路

[0007]有鉴于此，本专利技术旨在提供一种能够排除血小板假性聚集干扰的血小板和/或红细胞检测方法，该方法简单易行，无需额外的步骤，也不用改变现有检测的步骤和检测条件，也不会对检测造成任何影响。本专利技术的另一目的是提供适用于本专利技术方法的用于血小板和/或红细胞检测的试剂，该试剂含有能够预防和/或消除血小板聚集的物质，该物质对血液检测中使用的其他试剂无干扰，反应迅速，且无需额外的反应条件。
[0008]根据本专利技术的第一方面，提供一种抗血小板聚集干扰的血小板和/或红细胞检测方法，所述方法包括：
[0009]用解聚剂对血液样品进行防止和/或消除所述血液样品中的血小板聚集的处理，其中所述解聚剂包括至少一种选自由具有氨基的化合物和含铵根离子的化合物所组成的组；和
[0010]对经所述解聚剂处理的血液样品用血液分析仪进行检测，以至少获得血小板和/或红细胞的检测信息。
[0011]根据一种具体的实施方式，所述具有氨基的化合物选自由以下式(I)所示化合物及其盐所组成的组：
[0012]R1-NH-R2
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(I)
[0013]其中，R1和R2相同或不同，各自独立地为选自以下组中的基团，前提是R1和R2不同时为H，所述组由H、-SO3H、-NH2、-C(NH)-NH2、取代或未取代的C1-16烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-14烷芳基、取代或未取代的C7-14芳烷基、-C(O)-Q1和-C(O)-O-Q2组成，
[0014]其中，Q1为H、-NH2、取代或未取代的C1-16烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-14烷芳基或取代或未取代的C7-14芳烷基；
[0015]Q2为H、取代或未取代的C1-16烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-14烷芳基或取代或未取代的C7-14芳烷基；
[0016]其中，所述取代的是指被至少一个选自由-NP1P2、-SO3H、-OH、卤素、-CN、-C(O)-O-P3、-O-C1-16烷基、-O-C6-10芳基、-O-C7-14烷芳基、-O-C7-14芳烷基、-C(O)-C1-16烷基、-C(O)-C6-10芳基、-C(O)-C7-14烷芳基、-C(O)-C7-14芳烷基和-C(O)-NP1P2组成的组中的基团所取代，其中所述-O-C1-16烷基、-O-C6-10芳基、-O-C7-14烷芳基、-O-C7-14芳烷基、-C(O)-C1-16烷基、-C(O)-C6-10芳基、-C(O)-C7-14烷芳基和-C(O)-C7-14芳烷基分别是未取代的或进一步被至少一个选自由-NH2、-OH、-SO3H、卤素、-CN、-COOH和-C(O)NH2组成的组中的基团所取代，
[0017]P1、P2和P3各自独立地为选自以下组中的基团：H、C1-16烷基、C6-10芳基、C7-14烷芳基和C7-14芳烷基，其中所述C1-16烷基、C6-10芳基、C7-14烷芳基和C7-14芳烷基分别是未取代的或进一步被至少一个选自由-NH2、-OH、-SO3H、卤素、-CN、-COOH和-C(O)NH2组成的组中的基团所取代。
[0018]更具体地，所述式(I)中，R1和R2相同或不同，各自独立地为选自以下组中的基团，前提是R1和R2不同时为H，所述组由H、-SO3H、-NH2、-C(NH)-NH2、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-10烷芳基、取代或未取代的C7-10芳烷基、-C(O)-Q1和-C(O)-O-Q2组成，
[0019]其中，Q1为H、-NH2、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-10烷芳基或取代或未取代的C7-10芳烷基；
[0020]Q2为H、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-10烷芳基或取代或未取代的C7-10芳烷基；
[0021]其中，所述取代的是指被至少一个选自由-NP1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗血小板聚集干扰的血小板和/或红细胞检测方法，所述方法包括：用解聚剂对血液样品进行防止和/或消除所述血液样品中的血小板聚集的处理，其中所述解聚剂包括至少一种选自由具有氨基的化合物和含铵根离子的化合物所组成的组；和对经所述解聚剂处理的血液样品用血液分析仪进行检测，以至少获得血小板和/或红细胞的检测信息。2.根据权利要求1所述的检测方法，其中所述具有氨基的化合物选自由以下式(I)所示化合物及其盐所组成的组：R1-NH-R2
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(I)其中，R1和R2相同或不同，各自独立地为选自以下组中的基团，前提是R1和R2不同时为H，所述组由H、-SO3H、-NH2、-C(NH)-NH2、取代或未取代的C1-16烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-14烷芳基、取代或未取代的C7-14芳烷基、-C(O)-Q1和-C(O)-O-Q2组成，其中，Q1为H、-NH2、取代或未取代的C1-16烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-14烷芳基或取代或未取代的C7-14芳烷基；Q2为H、取代或未取代的C1-16烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-14烷芳基或取代或未取代的C7-14芳烷基；其中，所述取代的是指被至少一个选自由-NP1P2、-SO3H、-OH、卤素、-CN、-C(O)-O-P3、-O-C1-16烷基、-O-C6-10芳基、-O-C7-14烷芳基、-O-C7-14芳烷基、-C(O)-C1-16烷基、-C(O)-C6-10芳基、-C(O)-C7-14烷芳基、-C(O)-C7-14芳烷基和-C(O)-NP1P2组成的组中的基团所取代，其中所述-O-C1-16烷基、-O-C6-10芳基、-O-C7-14烷芳基、-O-C7-14芳烷基、-C(O)-C1-16烷基、-C(O)-C6-10芳基、-C(O)-C7-14烷芳基和-C(O)-C7-14芳烷基分别是未取代的或进一步被至少一个选自由-NH2、-OH、-SO3H、卤素、-CN、-COOH和-C(O)NH2组成的组中的基团所取代，P1、P2和P3各自独立地为选自以下组中的基团：H、C1-16烷基、C6-10芳基、C7-14烷芳基和C7-14芳烷基，其中所述C1-16烷基、C6-10芳基、C7-14烷芳基和C7-14芳烷基分别是未取代的或进一步被至少一个选自由-NH2、-OH、-SO3H、卤素、-CN、-COOH和-C(O)NH2组成的组中的基团所取代；优选地，所述式(I)中，R1和R2相同或不同，各自独立地为选自以下组中的基团，前提是R1和R2不同时为H，所述组由H、-SO3H、-NH2、-C(NH)-NH2、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-10烷芳基、取代或未取代的C7-10芳烷基、-C(O)-Q1和-C(O)-O-Q2组成，其中，Q1为H、-NH2、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-10烷芳基或取代或未取代的C7-10芳烷基；Q2为H、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-10烷芳基或取代或未取代的C7-10芳烷基；其中，所述取代的是指被至少一个选自由-NP1P2、-SO3H、-OH、-CN、-C(O)-O-P3、-O-C1-10烷基、-O-C6-10芳基、-O-C7-10烷芳基、-O-C7-10芳烷基和-C(O)-NP1P2组成的组中的基团所取代，其中所述-O-C1-10烷基、-O-C6-10芳基、-O-C7-10烷芳基和-O-C7-10芳烷基分别是未取代的或进一步被至少一个选自由-NH2、-OH、-SO3H、-CN、-COOH和-C(O)NH2组成的组中
的基团所取代；P1、P2和P3各自独立地为选自以下组中的基团：H、C1-10烷基、C6-10芳基、C7-10烷芳基和C7-10芳烷基，其中所述C1-10烷基、C6-10芳基、C7-10烷芳基和C7-10芳烷基分别是未取代的或进一步被至少一个选自由-NH2、-OH、-SO3H、-CN、-COOH和-C(O)NH2组成的组中的基团所取代；更优选地，所述式(I)中，R1和R2相同或不同，各自独立地为选自以下组中的基团，前提是R1和R2不同时为H，所述组由H、-SO3H、-NH2、-C(NH)-NH2、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-10烷芳基、取代或未取代的C7-10芳烷基、-C(O)-Q1和-C(O)-O-H的组，其中，Q1为H、-NH2、取代或未取代的C1-10烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的C7-10烷芳基或取代或未取代的C7-10芳烷基；其中，所述取代的是指被至少一个选自由-NP1P2、-SO3H、-OH、-CN、-C(O)-O-H和-C(O)-NP1P2组成的组中的基团所取代；P1和P2各自独立地为选自以下组中的基团：H、C1-10烷基、C6-10芳基、C7-10烷芳基和C7-10芳烷基，其中所述C1-10烷基、C6-10芳基、C7-10烷芳基和C7-10芳烷基分别是未取代的或进一步被至少一个选自由-NH2、-OH、-SO3H、-CN、-COOH和-C(O)NH2组成的组中的基团所取代。3.根据权利要求2所述的检测方法，其中，所述式(I)化合物具有的伯氨基、仲氨基和/或...

【专利技术属性】
技术研发人员：张子千，高飞，
申请(专利权)人：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，
类型：发明
国别省市：