一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用，属于生物医学技术领域；所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种；所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.5所示。本发明专利技术的多肽能够通过同时促进猪机体中淋巴细胞和单核巨噬细胞增殖，从而促使猪机体产生广谱性免疫应答；并且，本发明专利技术的多肽能够促进猪体内ASFV抗原特异性免疫应答，因而能够作为ASFV亚单位疫苗的有效成分，增强猪的免疫应答。免疫应答。免疫应答。

【技术实现步骤摘要】
一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用
[0001]本申请是申请日为2020年08月26日、申请号为CN202010871941.8、专利技术名称为《一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用》的分案申请。


[0002]本专利技术涉及生物医学
，尤其涉及一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用。

技术介绍

[0003]免疫增强剂是一类单独或与抗原配合使用，通过增强巨噬细胞活性、增强抗原物质的免疫原性和稳定性以及促进各类免疫因子和特异性抗体的合成与分泌等方式，从而增强动物机体免疫应答的物质。
[0004]免疫增强剂能够刺激机体体内产生由体液介导和细胞介导的免疫反应，从而达到消灭入侵的病原体，保护动物不受病原体的危害。
[0005]免疫增强剂的种类繁多，按照其成分特性大体上主要分为三大类：中草药提取物、化学合成物和细胞因子类。目前用于猪病疫苗的免疫增强剂较少。有报道将CVC1320作为口蹄疫疫苗的免疫增强剂(免疫增强剂提高猪口蹄疫灭活疫苗免疫效力的研究，于晓明，2019)，但是该免疫增强剂为复方制剂，成分复杂，而且使用剂量大，生产成本相对较高。而且该制剂只是验证能够应用于FMDV疫苗，并没有数据证明其具有广谱效应。唐波等(免疫增强剂提升猪用灭活疫苗免疫效力的研究，2016)用含VA5免疫增强剂作为猪细小、乙脑二联灭活疫苗伴侣，能够提高抗体效价，但是没有数据证明其具有广谱效应。目前，缺少迫切需要一种促使猪机体产生广谱性免疫应答的免疫增强剂。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用，本专利技术的多肽能够通过促进猪机体中单核巨噬细胞、T细胞和B细胞分泌IFN
‑
γ从而促使猪机体产生广谱性免疫应答，并且该多肽能够作为ASFV亚单位疫苗的有效成分，增强猪的免疫应答。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽；所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种；
[0009]所述第一多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；
[0010]所述第二多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
[0011]所述第三多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；
[0012]所述第四多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；
[0013]所述第五多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；
[0014]所述多肽通过同时促进猪机体中淋巴细胞和单核巨噬细胞增殖来促进猪机体产
生广谱性免疫应答。
[0015]优选的，所述淋巴细胞包括脾脏淋巴细胞、外周血T细胞和外周血中的B细胞。
[0016]优选的，所述单核巨噬细胞包括脾脏单核巨噬细胞和外周血单核巨噬细胞。
[0017]本专利技术提供了一类由上述方案所述多肽聚合得到的多肽聚合物。
[0018]本专利技术提供了上述方案所述多肽或者所述多肽聚合物在制备促进猪机体产生广谱性免疫应答的制剂中的应用。
[0019]本专利技术提供了上述方案所述多肽或者所述多肽聚合物在制备促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的制剂中的应用。
[0020]本专利技术提供了一种猪的免疫增强剂，所述免疫增强剂的活性成分包括上述方案所述多肽或者所述多肽聚合物。
[0021]优选的，所述免疫增强剂中所述多肽或者所述多肽聚合物的含量为100μg/组分/头份。
[0022]本专利技术提供了一种非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗，所述非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗包括上述方案所述多肽或者所述多肽聚合物。
[0023]优选的，所述亚单位疫苗中所述多肽或者所述多肽聚合物的含量为100μg/组分/头份。
[0024]本专利技术的有益效果：本专利技术提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽；所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种；所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.5所示。本专利技术的多肽能够通过同时促进猪机体中淋巴细胞和单核巨噬细胞增殖，从而促使猪机体产生广谱性免疫应答；并且，本专利技术的多肽能够促进猪体内ASFV抗原特异性免疫应答，因而能够作为ASFV亚单位疫苗的有效成分，增强猪的免疫应答。
附图说明
[0025]图1为AP1的鉴定色谱图；
[0026]图2为AP1的质谱图；
[0027]图3为AP2的鉴定色谱图；
[0028]图4为AP2的质谱图；
[0029]图5为AP3的鉴定色谱图；
[0030]图6为AP3的质谱图；
[0031]图7为AP4的鉴定色谱图；
[0032]图8为AP4的质谱图；
[0033]图9为AP5的鉴定色谱图；
[0034]图10为AP5的质谱图；
[0035]图11为AP1～AP5促ASFV致敏淋巴细胞及单核巨噬细胞增殖的流式数据统计图；
[0036]图12为AP1～AP5促健康猪淋巴细胞及单核巨噬细胞增殖的流式数据统计图；
[0037]图13为AP1促进不同亚型免疫细胞分泌IFN
‑
γ的水平；
[0038]图14为AP2促进不同亚型免疫细胞分泌IFN
‑
γ的水平；
[0039]图15为AP3促进不同亚型免疫细胞分泌IFN
‑
γ的水平；
[0040]图16为AP4促进不同亚型免疫细胞分泌IFN
‑
γ的水平；
[0041]图17为AP5促进不同亚型免疫细胞分泌IFN
‑
γ的水平；
[0042]图18为二免14d，B淋巴细胞亚群比例水平；
[0043]图19为CD8
+
T淋巴细胞亚群比例水平；
[0044]图20为二免14d，B淋巴细胞亚群比例水平；
[0045]图21为CD8
+
T淋巴细胞亚群比例水平。
具体实施方式
[0046]本专利技术提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽；所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种；所述多肽通过通过同时促进猪机体中淋巴细胞和单核巨噬细胞增殖来促进猪机体产生广谱性免疫应答；所述淋巴细胞优选的包括脾脏淋巴细胞、外周血T细胞和外周血中的B细胞；所述单核巨噬细胞优选的包括脾脏单核巨噬细胞和外周血单核巨噬细胞。
[0047]在本专利技术中，所述第一多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，具体为：KMRIEIFWEL(Lys
‑
Met
‑
Arg
‑
Ile
‑
Glu
‑
Ile
‑
Phe
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽，所述多肽为第三多肽或第五多肽；所述第三多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述第五多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述多肽通过同时促进猪机体中淋巴细胞和单核巨噬细胞增殖来促进猪机体产生广谱性免疫应答。2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述淋巴细胞包括脾脏淋巴细胞、外周血T细胞和外周血中的B细胞。3.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述单核巨噬细胞包括脾脏单核巨噬细胞和外周血单核巨噬细胞。4.权利要求1～3任意一项所述多肽在制备促进猪机体产生广谱...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑海学，杨帆，毛箬青，周晓丽，孙德惠，朱昱茜，张克山，刘华南，刘湘涛，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：