抗痤疮丙酸杆菌药物的筛选试剂制造技术

本发明专利技术涉及抗痤疮技术领域，尤其涉及抗痤疮丙酸杆菌药物的筛选试剂。本发明专利技术提供了能模拟人皮肤毛囊内的油性微环境与皮脂成分特点的模拟皮脂，该模拟皮脂能够作为培养基质，为体外抗菌实验提供能模拟毛囊微环境的痤疮丙酸杆菌培养环境或作为筛选抗痤疮丙酸杆菌药物的基质，从而更准确的筛选获得有望能进入毛囊微环境并发挥抗痤疮丙酸杆菌活性的药物。囊微环境并发挥抗痤疮丙酸杆菌活性的药物。

【技术实现步骤摘要】
抗痤疮丙酸杆菌药物的筛选试剂


[0001]本专利技术涉及抗痤疮
，尤其涉及抗痤疮丙酸杆菌药物的筛选试剂。

技术介绍

[0002]痤疮是一种发生于毛囊皮脂腺单元的常见疾病，多发于面部、背部等皮脂腺分布密集的部位。痤疮多发于青春期，在20岁左右的人群中患病最高。在对于不同地区的人群统计中发现，痤疮在10岁至60岁人群中均会发生。在青少年时期，男性痤疮发病率高于女性；对于成人而言，女性的痤疮发病率则高于男性，同时成人中，持续性痤疮相比迟发性痤疮更加普遍。痤疮发生于面部，一方面影响个人形象，另一方面对于患者的心理也存在重大影响，例如导致患者的焦虑、抑郁、情绪脆弱等，更甚者会使患者产生自杀的念头和倾向。
[0003]痤疮的发病机制集中在以下几个因素共同作用上：1)皮脂腺产生过量皮脂；2)毛囊处角质细胞过度增殖导致毛囊过度角化；3)痤疮丙酸杆菌定植于毛囊并以皮脂为营养来源增殖；4)相关炎症介质释放到皮肤中，加重痤疮病情程度。痤疮丙酸杆菌为皮肤共生菌，痤疮并不一定由于痤疮丙酸杆菌感染引起，但是降低痤疮部位痤疮丙酸杆菌的含量可以有效降低痤疮的严重程度、有助于痤疮的康复。
[0004]现有痤疮治疗方法中主要分为两类：1、对于轻度或中度痤疮，表现为粉刺或炎性丘疹，通常采用局部用药缓解2、对于中重度至重度痤疮，表现为丘疹、脓包及结节、囊肿，通常需要口服全身性用药并配合局部用药进行治疗。
[0005]口服全身性用药会带来一些不可估计的副作用，包括胃肠道反应、肝损害、菌群失调等，尤其是口服四环素类抗生素，可能导致头晕目眩、罕见狼疮样综合症及良性颅内压增高症。因此，在痤疮治疗中，应尽量避免口服等全身性用药方式。
[0006]痤疮部位的局部用药包括两类：1、外用维A酸类的药物，能够改善毛囊皮脂腺导管角化、溶解微粉刺和粉刺、抗炎、预防和改善痤疮后色素沉着及痤疮瘢痕等作用。但是，维A酸类药物会导致使用部位的皮肤出现刺激反应，包括局部红斑、脱屑、出现紧绷和灼热感等，对于皮肤敏感人群，可能导致皮损加重现象。2、外用抗痤疮丙酸杆菌类药物，主要包括部分抗生素和过氧化苯甲酰等。局部使用抗生素类药物易诱导痤疮丙酸杆菌产生耐药性，导致其治疗痤疮的效果大打折扣。一些非抗生素类的抗菌药物目前虽未证明会使痤疮丙酸杆菌产生耐药性，但是这类抗菌药物在使用中存在刺激反应，且一些抗菌药物对于衣物或毛发具有氧化漂白作用，例如过氧化苯甲酰。
[0007]为克服现有的抗痤疮丙酸杆菌药物的缺陷，一些研究者将月桂酸负载于脂质体囊泡的脂质双分子层用于杀伤痤疮丙酸杆菌，部分研究人员通过研发痤疮丙酸杆菌热灭活疫苗进行痤疮治疗，还有一些研究者从唾液中提取唾液肽对痤疮丙酸杆菌进行杀伤。为了评估这些抗菌体系对于痤疮丙酸杆菌的杀伤效果，这些文献研究所采用的实验方法都是将抗菌药物分散在磷酸盐缓冲液或液体培养基等水相环境中、并与痤疮丙酸杆菌培养一定时间，然后统计痤疮丙酸杆菌的存活率，进而判断抗菌物质杀伤痤疮丙酸杆菌的具体效果。但是，这种在水相环境中筛选抗痤疮丙酸杆菌物质的方法忽略了痤疮发病部位由于皮脂过量
分泌而呈油性环境的现实，因此无法用于预判所筛选出的抗痤疮丙酸杆菌物质在应用到真实的痤疮病变部位时的抗痤疮丙酸杆菌效果及治疗痤疮的疗效。可见，在抗痤疮丙酸杆菌研究领域急需建立一个更加契合痤疮丙酸杆菌生长环境的抗菌物质筛选方法。

技术实现思路

[0008]有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供抗痤疮丙酸杆菌药物的筛选试剂及筛选方法。
[0009]本专利技术提供了一种模拟皮脂，其由甘油三酯类化合物和油类化合物组成，所述甘油三酯类化合物和油类化合物的质量比为(85～98)：(2～15)。
[0010]所述甘油三酯类化合物选自三油酸甘油酯或甘油三亚油酸酯；
[0011]所述油类化合物选自角鲨烯、甘油或甘油单油酸酯。
[0012]人皮肤毛囊内的皮脂主要由皮脂腺合成并分泌，主要成分包括甘油三脂类、游离脂肪酸类、角鲨烯、胆固醇、胆固醇酯、蜡酯等。本专利技术通过简化配方，获得一种能够模拟人皮肤毛囊内的油性微环境与皮脂成分特点的模拟皮脂，利用该模拟皮脂对痤疮丙酸杆菌进行培养，一方面其对痤疮丙酸杆菌没有杀伤作用，另一方面能尽可能的模拟人皮肤毛囊内的油性微环境、更贴近痤疮丙酸杆菌生长的真实环境，不论应用于痤疮丙酸杆菌的体外培养还是抗痤疮丙酸杆菌的药物筛选，都更科学合理。
[0013]本专利技术所述的模拟皮脂的制备方法包括将甘油三酯类化合物和油类化合物混合。
[0014]本专利技术试验表明，在质量比为(90～95)：(5～10)的范围内，模拟皮脂更有利于痤疮丙酸杆菌的生长，获得的筛选结果也更可靠准确。一些实施例中，所述甘油三酯类化合物和油类化合物的质量比为(90～95)：(5～10)。
[0015]一些实施例中，所述模拟皮脂由85～98wt％三油酸甘油酯和2～15wt％甘油组成；优选的，由90～95wt％三油酸甘油酯和5～10wt％甘油组成。
[0016]另一些实施例中，所述模拟皮脂由85～98wt％三油酸甘油酯和2～15wt％角鲨烯组成；优选的，由90～95wt％三油酸甘油酯和5～10wt％角鲨烯组成。
[0017]一些具体实施例中，所述模拟皮脂由95wt％三油酸甘油酯和5wt％甘油组成。
[0018]另一些具体实施例中，所述模拟皮脂由90wt％三油酸甘油酯和10wt％甘油组成。
[0019]另一些具体实施例中，所述模拟皮脂由95wt％三油酸甘油酯和5wt％角鲨烯组成。
[0020]另一些具体实施例中，所述模拟皮脂由90wt％三油酸甘油酯和10wt％角鲨烯组成。
[0021]本专利技术还提供了痤疮丙酸杆菌的培养方法，其以本专利技术所述的模拟皮脂在厌氧气氛中培养痤疮丙酸杆菌。
[0022]本专利技术还提供了抗痤疮丙酸杆菌药物的筛选方法，其在厌氧气氛中培养痤疮丙酸杆菌；所述培养的培养液由本专利技术所述的模拟皮脂和待测药物组成。
[0023]本专利技术中，所述厌氧气氛组分为N2、H2、CO2，其中N2的体积为70％～90％，H2的体积为0～10％，其余为CO2。本专利技术一些实施例中，所述厌氧气氛组成为：N2的体积为80％～90％，H2的体积为5％～10％，其余为CO2。一些具体实施例中，所述厌氧气氛组成包括如下体积百分比的5％H2、10％CO2和85％N2。
[0024]本专利技术所述培养液中，待测药物的浓度为0mg/ml～10mg/ml。作为优选，所述待测
药物的浓度为1mg/ml～8mg/ml。
[0025]本专利技术中，所述培养的温度为25℃～45℃，作为优选，所述的培养温度为30℃～37℃；所述培养的时间为30分钟～12小时，作为优选，所述的培养时间为1小时～8小时。
[0026]本专利技术所述的培养的方法中将103CFU/ml～10
12
CFU/ml(CFU:colony forming units微生物菌落形成单位；CFU/ml：每毫升溶液中的菌落总数)痤疮丙酸杆菌均本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.模拟皮脂，其由甘油三酯类化合物和油类化合物组成，所述甘油三酯类化合物和油类化合物的质量比为(85～98)：(2～15)；所述甘油三酯类化合物选自三油酸甘油酯或甘油三亚油酸酯；所述油类化合物选自角鲨烯、甘油或甘油单油酸酯。2.根据权利要求1所述的模拟皮脂，其特征在于，由85～98wt％三油酸甘油酯和2～15wt％甘油组成；优选的，由90～95wt％三油酸甘油酯和5～10wt％甘油组成；或由85～98wt％三油酸甘油酯和2～15wt％角鲨烯组成；优选的，由90～95wt％三油酸甘油酯和5～10wt％角鲨烯组成。3.痤疮丙酸杆菌的培养方法，其特征在于，以权利要求1或2所述的模拟皮脂在厌氧气氛中培养痤疮丙酸杆菌；所述厌氧气氛包括H2、N2和CO2，体积百分比分别为H2：0～10％、N2：70％～90％，余量为CO2。4.抗痤疮丙酸杆菌药物的筛选方法，其特征在于，在厌氧气氛中培养痤疮丙酸杆菌；所述厌氧气氛包括如下体积百分比的0～10％H2、70％～90％N2，余量为CO2；所述培养的培养液由权利要求1或2所述的模...

【专利技术属性】
技术研发人员：阳丽华，金丽珺，李明，
申请(专利权)人：中国科学技术大学，
类型：发明
国别省市：