喹硫平、利培酮及9-羟基利培酮的检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术提供一种喹硫平、利培酮及9

【技术实现步骤摘要】
喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测方法及试剂盒


[0001]本专利技术属于临床检测
，具体涉及一种基于LC
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MS/MS技术对喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的浓度同时定量分析的检测方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]精神分裂症是最常见的精神类疾病之一，世界范围的发病率约为0.3％～0.7％，主要的临床症状包括幻觉、妄想、思维混乱、呓语、狂躁等。近年，我国精神分裂症的发病率呈明显上升趋势。在治疗方面，抗精神分裂药物使用过程中经验用药仍处于主导地位，目前应用于临床的药物有三十余种，其中喹硫平和利培酮为临床常用的第二代抗精神分裂症药物，而且利培酮和喹硫平在药理机制方面也有许多相似的地方，比如在对5
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HT2受体上的亲和力都十分的强，是抗精神病治疗中的常见组合药物。
[0003]由于不同患者间的个体差异，在相同的服药剂量下，亦可造成截然不同的疗效。为了合理性用药，治疗药物监测(Therapeutic drug monitoring，TDM)显得尤为关键。基于德国神经精神药理学与
[0004]药物精神病学协会最新指南，对喹硫平和利培酮进行TDM处于推荐等级(Recommended Level1)。为了更好的了解利培酮和喹硫平联合用药后的药物动力学，需要一种灵敏、特异、准确的测定血清中利培酮和喹硫平及其代谢物的方法，以观察药物的量效关系。
[0005]目前NMPA批准的用于喹硫平(湘械注准20192400353)和利培酮及9
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羟基利培酮(湘械注准20192400351)药物浓度测定的试剂盒均为胶乳免疫比浊法，仅能检测单一药物浓度，无法同时测定联合用药药物、更无法检测药物原型及其代谢物，且免疫分析法准确度不足，特异性差，易与血液中其它相似结构代谢产物发生交叉反应。

技术实现思路

[0006]基于现有技术中存在上述问题，本专利技术提供一种喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测方法及试剂盒，具体检测方法为液相色谱串联质谱法，检测试剂中的校准品和质控品的基质均使用一定浓度的牛血清白蛋白溶液代替人血清，具有使用简便、成本较低、制备简单、所需样本体积较少、前处理快速、准确度高、灵敏度高、特异性好、干扰小、精密度高、分析时间短等特点。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0008]一种喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测试剂盒，包括盒体、内衬、校准品、质控品、空白质控品及样本萃取液，
[0009]所述校准品、质控品、空白质控品及样本萃取液均放置于所述盒体内；
[0010]所述校准品为固定有一组含有不同浓度喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮标准品的牛血清白蛋白溶液，数量为至少6个；
[0011]所述质控品为固定有一组含有不同浓度喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮标准品的
牛血清白蛋白溶液，数量为至少3个；
[0012]所述样本萃取液为含有内标的乙腈溶液，所述内标采用同位素取代的喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮。
[0013]根据以上方案，所述盒体内设置有海绵内衬，内衬上设有凹槽，所述凹槽呈圆形，所述校准品、质控品、空白质控品及样本萃取液放入所述凹槽中；所述海绵内衬为可拆卸地固定在所述盒体的内部；所述盒盖与盒体是相连接的或相互独立的；所述盒盖与盒体配合关闭时，使所述试剂盒保持密封状态。
[0014]根据以上方案，所述的校准品和质控品使用0.1％
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5％牛血清蛋溶液作为基质。
[0015]一种喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测方法，采用如权利要求1或2所述的试剂盒对待测人血清样本进行样本前处理，经前处理后的各样本分别进行液相色谱串联质谱检测，同时准确定量分析喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮；所述的液相色谱串联质谱检测中，质谱采用多反应监测，化合物MRM参数如下：
[0016][0017]Dwell Time是扫描时间，CE是碰撞电压，DP是去簇电压，EP是入口电压，CXP是碰撞室出口电压；子离子中带*的是定量离子对。
[0018]根据以上方案，所述的喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测方法包括以下详细步骤：
[0019]步骤S1，配制系列浓度的校准品溶液、质控品溶液和样本萃取液；
[0020]步骤S2，向待测人血清样本加入样本萃取液，充分振荡混合均匀；
[0021]步骤S3，取步骤S2中混合均匀后的各样本进行离心，离心后取上清液加入0.1％甲酸水溶液进行稀释，充分振荡混合均匀；
[0022]步骤S4，取步骤S3中混合均匀后的各样本进行离心，离心后取上清液进行LC
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MS/MS分析。
[0023]根据以上方案，所述的液相色谱条件如下：
[0024]分析柱：Kinetex C18,2.6μm,3.0*50mm；
[0025]流动相A：为含2mM甲酸铵的0.1％甲酸水溶液；流动相B：含0.1％甲酸的甲醇溶液；
[0026]洗脱梯度：流动相A+流动相B＝100％；0～0.5min，流动相A体积保持80％；0.5～1.2min，流动相A体积由80％递减至5％；1.20～2.50min，流动相A体积保持5％；2.50～2.51min，流动相A体积由5％升高至80％；2.51～3.0min，流动相A体积保持80％；
[0027]流速：0.5mL/min；柱温：40℃。
[0028]根据以上方案，所述的质谱条件如下：
[0029]离子源：ESI+；喷雾毛细管电压：5500V；离子源温度：450℃；离子源雾化气：35psi；离子源加热辅助气：35psi；碰撞气：9psi；气帘气：10psi。
[0030]本专利技术的有益效果是：
[0031]1、本专利技术提供了一种全新的同时测定喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮药物浓度的检测方法及试剂盒，操作方便，检测耗时短，有助于提高分析检测的效率，且具有精密度高、准确度好、抗感染能力强的优点。同时，前处理方法相对比较简单，仅需要一步蛋白沉淀，耗时大大缩短，使前处理过程更加方便，且样品所需量较少并便于储存运输，前处理快速，分析周期短，成本较低等优点，适合在临床常规检测中推广。
[0032]2、采用牛血清白蛋白溶液作为替代基质用于配制校准品和质控品，解决了现有临床实验室自建项目(LDT)中血药浓度监测多以全血、血浆、血清为校准品和质控品基质来源，具有成本高、不稳定性、致病性及职业暴露的可能性较高等诸多缺陷。
附图说明
[0033]图1是本专利技术的试剂盒中总色谱图。
[0034]图2是本专利技术的试剂盒中喹硫平及内标(喹硫平
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d8)的色谱图。
[0035]图3是本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测试剂盒，其特征在于，包括盒体、内衬、校准品、质控品、空白质控品及样本萃取液，所述校准品、质控品、空白质控品及样本萃取液均放置于所述盒体内；所述校准品为固定有一组含有不同浓度喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮标准品的牛血清白蛋白溶液，数量为至少6个；所述质控品为固定有一组含有不同浓度喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮标准品的牛血清白蛋白溶液，数量为至少3个；所述样本萃取液为含有内标的乙腈溶液，所述内标采用同位素取代的喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮。2.根据权利要求1所述的喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测试剂盒，其特征在于，所述盒体内设置有海绵内衬，内衬上设有凹槽，所述凹槽呈圆形，所述校准品、质控品、空白质控品及样本萃取液放入所述凹槽中；所述海绵内衬为可拆卸地固定在所述盒体的内部；所述盒盖与盒体是相连接的或相互独立的；所述盒盖与盒体配合关闭时，使所述试剂盒保持密封状态。3.根据权利要求1或2所述的喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测试剂盒，其特征在于，所述的校准品和质控品使用0.1％
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5％牛血清白蛋白溶液作为基质。4.一种喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮的检测方法，其特征在于，采用如权利要求1或2所述的试剂盒对待测人血清样本进行样本前处理，经前处理后的各样本分别进行液相色谱串联质谱检测，同时准确定量分析喹硫平、利培酮及9
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羟基利培酮；所述的液相色谱串联质谱检测中，质谱采用多反应监测，化合物MRM参数如下：采用多反应监测，化合物MRM参...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢永明，王芳，杨明，
申请(专利权)人：上海中科新生命生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：