一株枯草芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，具体涉及一株枯草芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用。本发明专利技术提供的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ

【技术实现步骤摘要】
一株枯草芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株枯草芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用。

技术介绍

[0002]霉菌毒素污染是当前饲料领域一个普遍存在的较为严重的问题，其中，黄曲霉毒素、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮等毒素严重威胁动物的健康。目前，霉菌毒素的降解方法主要有物理脱毒法、化学脱毒法和微生物脱毒法，其中，主要是物理和化学脱毒法的应用较为普遍，但这两种方法可能会影响饲料的感官特征和品质等，从而限制其广泛使用。微生物脱毒法是近些年才开始研究的一种新兴方法，该方法的优点在于，在不会对饲料品质和感官特征产生明显影响的情况下，去除霉菌毒素，同时不会造成二次污染问题。
[0003]玉米赤霉烯酮是一种雌激素类似物，其会竞争性地与哺乳动物的雌激素受体结合，从而导致动物的不育和生殖疾病。除了生殖毒性，玉米赤霉烯酮还可能会导致肝毒性、免疫毒性、遗传毒性等不同的问题。
[0004]枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilus)是一种革兰氏阳性菌，目前，枯草芽孢杆菌已正式列入饲料添加剂目录。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ
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1及其在降解玉米赤霉烯酮方面的用途。
[0006]具体地，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ
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1，该菌株已于2021年10月21日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，保藏编号为CGMCC No.23636。
[0008]本专利技术提供含有所述枯草芽孢杆菌ZJ
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1的菌剂。
[0009]以上所述的菌剂可为固体菌剂或液体菌剂。
[0010]除含有枯草芽孢杆菌ZJ
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1外，所述菌剂还可含有微生物制剂领域允许的辅料，例如：冻干保护剂、吸附剂等。
[0011]以上所述的菌剂可采用以下方法制备得到：
[0012](1)将枯草芽孢杆菌ZJ
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1经活化后接种于种子培养基中培养，获得种子液；
[0013](2)将步骤(1)的种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵液；
[0014](3)将发酵液直接制备为菌剂或与辅料混合制备为菌剂。
[0015]以上所述方法中，发酵培养基优选包括以下组分：葡萄糖0.5～1％，酵母提取物0.5～2％，蛋白胨1～2％，硫酸锰0.001～0.01％，磷酸氢二钾0.1～0.5％，硫酸镁0.05～0.5％，pH 5.5～7.0。
[0016]发酵培养条件优选为：发酵温度30
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45℃，转速160
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200r/min，pH 7.0
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7.4，发酵时间16
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24h。更优选为：发酵温度37℃，转速180r/min，发酵时间24h。
[0017]本专利技术提供一种发酵物，其由所述枯草芽孢杆菌ZJ
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1经发酵培养制备得到。
[0018]以上所述的发酵物中含有选自枯草芽孢杆菌ZJ
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1的活菌体、灭活菌体、枯草芽孢杆菌ZJ
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1的代谢产物以及发酵培养基成分中的一种或多种。
[0019]其中，枯草芽孢杆菌ZJ
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1的代谢产物包括胞内或胞外蛋白酶。
[0020]优选地，本专利技术提供上述发酵物的制备方法，其包括以下步骤：
[0021](1)将枯草芽孢杆菌ZJ
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1经活化后接种于种子培养基中培养，获得种子液；
[0022](2)将步骤(1)的种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵液；
[0023](3)将步骤(2)得到的发酵液离心，收取上清液，将上清液通过滤膜过滤，得到滤液，将滤液于
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75～
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85℃冷冻1～3h后，冷冻干燥24～72h，得到的冻干粉末复溶于缓冲液，冻干浓缩得到活性蛋白粗提物，即为所述发酵物。
[0024]以上步骤(1)中，种子液中枯草芽孢杆菌ZJ
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1的活菌浓度为109cfu/mL。
[0025]以上步骤(2)中，种子液的接种比例为1～5％，优选为2％。
[0026]以上步骤(2)中，发酵培养基优选包括以下组分：葡萄糖0.5～1％，酵母提取物0.5～2％，蛋白胨1～2％，硫酸锰0.001～0.01％，磷酸氢二钾0.1～0.5％，硫酸镁0.05～0.5％，pH 5.5～7.0。
[0027]发酵培养条件优选为：发酵温度30
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45℃，发酵时间16
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24h，转速160
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200r/min，pH 7.0
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7.4。更优选为：发酵温度37℃，转速180r/min，发酵时间24h。
[0028]以上步骤(3)中用于复溶的缓冲液优选为PBS缓冲液。
[0029]本专利技术发现，枯草芽孢杆菌ZJ
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1、其菌悬液、其发酵液以及其发酵物具有高效降解玉米赤霉烯酮的活性。本专利技术发现采用蛋白酶对枯草芽孢杆菌ZJ
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1的菌悬液、其发酵液以及其发酵物进行降解处理后，其降解玉米赤霉烯酮的活性会消失，因此，枯草芽孢杆菌ZJ
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1可通过分泌可降解玉米赤霉烯酮的活性蛋白对玉米赤霉烯酮进行降解。
[0030]基于上述功能，本专利技术提供一种玉米赤霉烯酮降解剂，其含有所述枯草芽孢杆菌ZJ
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1或所述菌剂或所述发酵物。
[0031]本专利技术还提供一种饲料或饲料添加剂，其含有所述枯草芽孢杆菌ZJ
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1或所述菌剂或所述发酵物。
[0032]本专利技术提供所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ
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1或所述菌剂或所述发酵物在降解玉米赤霉烯酮中的应用。
[0033]优选地，所述应用具体为降解饲料、粮油、农产品中的玉米赤霉烯酮。
[0034]本专利技术提供所述枯草芽孢杆菌ZJ
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ
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1，其特征在于，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23636。2.一种菌剂，其特征在于，其含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ
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1。3.一种发酵物，其特征在于，其由权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ
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1经发酵培养制备得到。4.一种玉米赤霉烯酮降解剂，其特征在于，其含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ
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2019
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1或权利要求2所述的菌剂或权利要求3所述的发酵物。5.一种饲料或饲料添加剂，其特征在于，其含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZJ
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2019
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1或权利要求2所述的菌剂或权利要求3所述的发酵物。6.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bac...

【专利技术属性】
技术研发人员：王金全，韩冰，张俊楠，王振龙，陶慧，郑云朵，赵鹏，刘杰，
申请(专利权)人：中国农业科学院饲料研究所，
类型：发明
国别省市：