尿蛋白标志物在制备检测糖尿病肾病的试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种尿蛋白标志物在制备检测糖尿病肾病的试剂盒中的应用。通过采用大数据分析的手段对质谱检测的差异蛋白质组学数据进行分析，发现了尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白与糖尿病肾病有显著的相关性，因而将尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白作为检测糖尿病肾病的标志物具有重要临床应用价值。的标志物具有重要临床应用价值。的标志物具有重要临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】
尿蛋白标志物在制备检测糖尿病肾病的试剂盒中的应用


[0001]本专利技术涉及糖尿病肾病领域，具体而言，涉及一种尿蛋白标志物在制备检测糖尿病肾病的试剂盒中的应用。

技术介绍

[0002]2019年全世界超过4.63亿人患糖尿病，占全球成年人(20
‑
79岁)的9.3％。在这些人群中，20％
‑
40％将发展为糖尿病肾病(DKD)，DKD是2型糖尿病(T2D)患者发病和死亡的主要原因。DKD患者发展为终末期肾病(ESRD)和心血管疾病的风险很高。因此，及早发现、预防和治疗非常重要。临床上DKD诊断的金标准是肾活检技术，然而其具有强烈的侵入性和危险性，同时评估过程非常依赖主观判断，因此结果的不稳定性强。此外，早期的DKD可能仅仅发生在肾脏的局部位置，若穿刺没有命中病变部位，则无法提早检测出疾病。
[0003]尿液也是临床检验中除血液外最常用的体液样本，尿液是一种真正的非侵入性样本，质谱技术可以检测到尿液中成百上千的微量蛋白质，人类尿蛋白质组包含大量个体内及个体间差异、人体生理和病理状态的信息，世界各国科学家一直在利用蛋白质组学技术试图从尿液中找到新的用于疾病诊断、预后分析、疗效检测的蛋白标志物。尿蛋白质组不仅可以反映性别、年龄、民族等生理信息，可以反映人体的病理状态，目前已经有研究人员通过尿液蛋白质组寻找到一些疾病标志物，包括慢性肾病、肺癌、神经系统疾病等。
[0004]肾脏是人体的重要器官，它的基本功能是生成尿液。肾脏和尿液有密不可分的关系，目前的研究表明，尿液中有大量的蛋白质与肾脏的生理、病理状态有着直接关联。因此，如何从尿液中的大量蛋白质中找到能够用来特异性评估肾脏的状态的蛋白标志物，以替代目前肾穿的检测方法，是一项临床上非常有价值的研究。

技术实现思路

[0005]本专利技术的主要目的在于提供一种尿蛋白标志物在制备检测糖尿病肾病的试剂盒中的应用，以提供一种新的无创的检测方案。
[0006]为了实现上述目的，根据本专利技术的第一个方面，提供了一种尿蛋白标志物在制备检测糖尿病肾病的试剂盒中的应用，尿蛋白标志物为尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白。
[0007]为了实现上述目的，根据本专利技术的第二个方面，提供了一种检测糖尿病肾病的试剂盒，试剂盒包括尿蛋白标志物抗体，尿蛋白标志物抗体为ALB蛋白的抗体和/或AFM蛋白的抗体。
[0008]进一步地，尿蛋白标志物抗体设置在固相载体上；优选地，固相载体选自酶标板、膜载体或微球，进一步优选地，膜载体选自硝酸纤维素膜、玻璃纤维素膜或尼龙膜；优选地，尿蛋白标志物抗体为单克隆抗体或多克隆抗体；优选地，试剂盒为ELISA试剂盒、免疫荧光试剂盒或免疫胶体金试剂盒。
[0009]为了实现上述目的，根据本专利技术的第三个方面，提供了一种糖尿病肾病的检测模型，检测模型包括糖尿病肾病标志物蛋白，糖尿病肾病标志物蛋白为尿蛋白标志物，尿蛋白
标志物为尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白。
[0010]进一步地，检测模型为逻辑回归模型。
[0011]为了实现上述目的，根据本专利技术的第四个方面，提供了一种糖尿病肾病的检测装置，该装置内置有上述糖尿病肾病的检测模型。
[0012]为了实现上述目的，根据本专利技术的第五个方面，提供了一种糖尿病肾病的检测模型的构建方法，该构建方法包括：质谱检测来源于糖尿病尿蛋白健康人群和糖尿病肾病人群的尿液蛋白质中的差异蛋白；将部分健康人群和部分糖尿病肾病人群作为发现集，并利用发现集中的潜在标志物蛋白进行逻辑回归模型训练，确定模型训练所用蛋白的最佳数量；根据最佳数量的潜在标志物蛋白的不同组合再次进行逻辑回归模型训练，确定最佳标志物蛋白组合；将最佳标志物蛋白组合训练得到的逻辑回归模型作为糖尿病肾病的检测模型，将剩余部分健康人群和剩余部分的糖尿病肾病人群作为验证集，利用验证集验证糖尿病肾病的检测模型；其中，最佳标志物蛋白组合为ALB蛋白和AFM蛋白。
[0013]进一步地，质谱检测来源于糖尿病尿蛋白健康人群和糖尿病肾病人群的尿液蛋白质中的差异蛋白包括：质谱分离来源于糖尿病尿蛋白健康人群和糖尿病肾病人群的尿液蛋白质，获得尿蛋白质组数据；对尿蛋白质组数据中各个蛋白质的丰度进行测量，得到测量结果；从测量结果中查找蛋白质丰度在糖尿病尿蛋白健康人群和糖尿病肾病人群中存在显著差异的蛋白质作为差异蛋白；其中，采用基于强度的相对定量方法对同一批次内的蛋白质的丰度进行测量，并采用基于强度的总分数的方法对不同批次间的蛋白质丰度进行归一化处理。
[0014]为了实现上述目的，根据本专利技术的第六个方面，提供了一种存储介质，存储介质包括存储的程序，其中，在程序运行时控制存储介质所在设备执行上述糖尿病肾病的检测模型的构建方法。
[0015]为了实现上述目的，根据本专利技术的第七个方面，提供了一种处理器，处理器用于运行程序，其中，程序运行时执行上述糖尿病肾病的检测模型的构建方法。
[0016]应用本专利技术的技术方案，通过采用大数据分析的手段对质谱检测的差异蛋白质组学数据进行分析，发现了尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白与糖尿病肾病有显著的相关性，因而将尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白作为检测糖尿病肾病的标志物具有重要临床应用价值。
附图说明
[0017]构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：
[0018]图1示出了根据本专利技术的优选的实施例中模型检测的ROC曲线图。
具体实施方式
[0019]需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将结合实施例来详细说明本专利技术。
[0020]术语解释：
[0021]尿蛋白标志物：本申请是指从尿液中分离到的标志物蛋白，其能够特异性标志某
种疾病、某种疾病的发展进程或阶段。
[0022]蛋白质：在本申请中蛋白与蛋白质的涵义相同，可以互换使用。
[0023]基于
技术介绍
部分所提到的目前存在无创检测糖尿病肾病的需求，本申请通过利用质谱技术检测了人尿液中的大量蛋白质，并发现了ALB、AFM两个蛋白质与糖尿病肾病相关。通过对尿液中ALB、AFM蛋白的定量检测，并根据两者的丰度建立了糖尿病肾病人群检测模型，经过临床数据验证，该检测模型的准确性比较高，因而适合用于快速、高效、客观地检测糖尿病肾病人群。
[0024]在该研究结果的基础上，申请人提出了本申请的技术方案。在一种典型的实施例中，提供了一种尿蛋白标志物在制备检测糖尿病肾病的试剂盒中的应用，尿蛋白标志物为尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白。本申请新发现的尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白与糖尿病肾病有显著的相关性，因而可以作为检测糖尿病肾病的标志物。
[0025]通过将ALB蛋白质和/或AFM蛋白质作为检测糖尿病肾病的标志物，根据现有试剂盒的制备原则，可以制备出针对ALB蛋白质和/或AFM蛋白质的检测试剂盒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种尿蛋白标志物在制备检测糖尿病肾病的试剂盒中的应用，其特征在于，所述尿蛋白标志物为尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白。2.一种检测糖尿病肾病的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括尿蛋白标志物抗体，所述尿蛋白标志物抗体为ALB蛋白的抗体和/或AFM蛋白的抗体。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述尿蛋白标志物抗体设置在固相载体上；优选地，所述固相载体选自酶标板、膜载体或微球，进一步优选地，所述膜载体选自硝酸纤维素膜、玻璃纤维素膜或尼龙膜；优选地，所述尿蛋白标志物抗体为单克隆抗体或多克隆抗体；优选地，所述试剂盒为ELISA试剂盒、免疫荧光试剂盒或免疫胶体金试剂盒。4.一种糖尿病肾病的检测模型，其特征在于，所述检测模型包括糖尿病肾病标志物蛋白，所述糖尿病肾病标志物蛋白为尿蛋白标志物，所述尿蛋白标志物为尿液中的ALB蛋白和/或AFM蛋白。5.根据权利要求4所述的检测模型，其特征在于，所述检测模型为逻辑回归模型。6.一种糖尿病肾病的检测装置，其特征在于，所述装置内置有权利要求4或5所述的糖尿病肾病的检测模型。7.一种糖尿病肾病的检测模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：质谱检测来源于糖尿病尿蛋白健康人群和糖尿病肾病人群的尿液蛋白质中的差异蛋白；将部分所述健康人群和部分所述糖尿病肾病人群作为发现集，并利用所述发现集中的所述差异蛋白进行逻辑回归模型训练，确定模型训练...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪宜，范冠杰，秦钧，宫童庆，林玉平，
申请(专利权)人：广东省中医院广州中医药大学第二附属医院，广州中医药大学第二临床医学院，广东省中医药科学院，
类型：发明
国别省市：