Claudin-18.2抗原多肽疫苗及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种Claudin

【技术实现步骤摘要】
Claudin-18.2抗原多肽疫苗及其应用


[0001]本专利技术涉及一种疫苗，具体涉及一种Claudin-18.2抗原多肽疫苗及其应用。

技术介绍

[0002]癌症一直是人类的梦魇，攻克癌症也成为无数科学家和医学人士殚精竭虑、孜孜以求的“圣杯”。根据2014年《世界癌症报告》，2012年全世界有1400万新癌症病例，中国新诊断癌症病例为307万癌症死亡人数达820万(World Cancer Report 2014)。其中胃癌是全世界癌症死亡的第三大原因。2012年，全球共有约100万胃癌新增病例，而死亡病例则超过了70万。预计到2020年，中国癌症患病总数将达660万，其中胃癌总数将达到460万。我国由于饮食习惯，饮食结构和食品安全等原因，每年的胃癌患者呈现逐年明显上升趋势，因此功克和预防胃癌在现阶段是十分紧迫和必要的课题。
[0003]目前针对癌症的治疗方法有化学疗法，放射疗法，细胞疗法等。这些传统疗法在癌症治疗中往往仅取得某一程度的功效，在运用在这些方法进行治疗的同时，许多癌细胞周边的健康细胞也会遭到损毁，因此治疗性疫苗就应运而生了。所谓的治疗性疫苗是集疫苗的有效性、靶向药物的特异性、使用方便、治疗次数少、价廉等特点于一体的新制品。通过调节人体免疫应答，为治疗持续性感染疾病及肿瘤、自身免疫等疾病提供新途径。目前，治疗性疫苗已成为全球生物医药产业的一个新战略制高点。放眼医药市场，目前针对胃癌的有效药物主要是小分子药物以及为数不多的抗体药物，但是针对胃癌的疫苗还没有成功上市的。因此发现和发展一种新型的治疗性疫苗用来预防和治疗胃癌是必要和紧迫的。
[0004]Claudin蛋白由Shoichiro Tsukita及其同事在1998年发现，是细胞紧密连接的重要分子。其构成了细胞旁屏障，控制细胞间分子的流动(J Cell Biol.2000,149,13-16)。目前Claudin家族有20几个成员，Claudin蛋白家族与肿瘤关系密切，其异常表达可引起上皮细胞、内皮细胞等细胞结构破坏、功能受损，细胞膜紧密连接受损，从而导致癌细胞的凝聚力降低、分化变差及侵袭性增加，有利于肿瘤的发生、发展，从而增加癌症病患的机率。不同的Claudin蛋白表达在不同的组织，与各自组织肿瘤发生具有相关性，Claudin-1在结肠癌上，Claudin-10在肝细胞癌上，Claudin-18.2在胃癌上。
[0005]Claudin-18.2作为一个高度特异性的细胞表面分子，在正常的组织中仅表达在分化的胃粘膜上表皮细胞上，不表达在胃干细胞上。在原发性胃癌及其转移后癌症类型中大部分都表达Claudin-18.2分子(Mol.Cell Biol.2001,21,7380-7390.)。更为重要的是Claudin-18.2基本上只在肿瘤细胞表达，所以可以比较安全地用抗体来诱导杀伤或杀死癌细胞。目前国内外尚无针对Claudin-18.2这个靶点上市的小分子药物和抗体药物，仅有德国Ganymed公司开发的单抗药物IMAB362(Claudiximab)进入临床试验(Biotechn.J.2014,9,545-554)，而国内外并没有抗Claudin-18.2的治疗性疫苗进入临床研究，预示了巨大的临床应用场景。
[0006]多肽疫苗药物介于小分子和生物大分子之间，兼具生物大分子的高选择性和小分子的易合成、低成本、组织渗透等优势；但是一般的链状多肽不是很稳定，易被蛋白水解酶
水解(见表1)，这也是困扰多肽药物领域的主要难题(Methods Mol.Biol.2008,494,177-186.)。而蛋白水解酶水解酰胺时需要多肽有一个舒展的构象，因此利用支架来锁定多肽的α螺旋结构可以有效地抑制多肽被蛋白水解酶水解。
[0007]表1
[0008][0009]哈佛大学的生物化学家Gregory L.Verdine教授提出的订书肽(stapled peptide)有望解决这方面的问题(J.Am.Chem.Soc.2000,122,186-187.)。Verdine教授提出的将多肽锁定在α螺旋构象的化学技术，可有效抑制多肽被蛋白水解酶水解，从而大大增加其酶解稳定性，延长了生物体内的半衰期。订书肽有着更高的α螺旋程度，与靶标的结合能力增加5到5000倍。因此，订书肽的设计能为Claudin-18.2多肽疫苗药物后续开发指明了方向。

技术实现思路

[0010]本专利技术的主要目的在于提供一种Claudin-18.2抗原多肽疫苗及其应用，以克服现有技术中的不足。
[0011]为实现前述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案包括：
[0012]本专利技术实施例提供了一类抗原多肽，其包括下列多肽中的任一种或多种的组合：
[0013]具有SEQ ID NO:1所示的序列或其保守变异型序列的多肽；
[0014]具有SEQ ID NO:2所示的序列或其保守变异型序列的多肽；
[0015]具有SEQ ID NO:3所示的序列或其保守变异型序列的多肽；
[0016]具有SEQ ID NO:4所示的序列或其保守变异型序列的多肽；
[0017]具有SEQ ID NO:5所示的序列或其保守变异型序列的多肽；
[0018]具有SEQ ID NO:6所示的序列或其保守变异型序列的多肽；
[0019]具有SEQ ID NO:7所示的序列或其保守变异型序列的多肽。
[0020]进一步的，所述保守变异型序列为原始序列中的一个或多个氨基酸缺失、错位、插入、缩短或延长而得，其与原始序列有80％以上相同，优选为85％以上相同，更优选为90％以上相同，尤其优选为95％以上相同。
[0021]本专利技术实施例还提供了免疫组合物，其包括：所述的抗原多肽；以及，医药学上可接受的载剂。
[0022]本专利技术实施例还提供了所述抗原多肽或所述免疫组合物于制备能够预防和/或治疗胃癌的药物中的用途。
[0023]进一步的，所述药物的治疗靶点包括Claudin-18.2。
[0024]进一步的，所述药物能够诱导动物特异性产生Claudin-18.2抗体。
[0025]本专利技术实施例还提供了所述抗原多肽或所述免疫组合物于制备抗原多肽型疫苗中的用途。
[0026]进一步的，所述疫苗能够诱导动物特异性产生Claudin-18.2抗体。
[0027]与现有技术相比，本专利技术提供的抗原多肽型疫苗能够诱导动物特异性产生Claudin-18.2抗体，从而抑制胃癌细胞的生长。
附图说明
[0028]图1示出了本专利技术实施例中抗原疫苗的初步筛选抗体检测浓度(5week)。
[0029]图2示出了本专利技术实施例中优选的抗原疫苗的衰减期检测折线图。
具体实施方式
[0030]鉴于现有技术中的不足，本案专利技术人经长期研究和大量实践，得以提出本专利技术的技术方案。如下将对该技术方案、其实施过程及原理等作进一步的解释说明。
[0031]本专利技术提供了一种能够诱导动物特异性产生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗原多肽，其特征在于，所述抗原多肽包括下列多肽中的任一种或多种的组合：具有SEQ ID NO:1所示的序列或其保守变异型序列的多肽；具有SEQ ID NO:2所示的序列或其保守变异型序列的多肽；具有SEQ ID NO:3所示的序列或其保守变异型序列的多肽；具有SEQ ID NO:4所示的序列或其保守变异型序列的多肽；具有SEQ ID NO:5所示的序列或其保守变异型序列的多肽；具有SEQ ID NO:6所示的序列或其保守变异型序列的多肽；具有SEQ ID NO:7所示的序列或其保守变异型序列的多肽。2.免疫组合物，其特征在于包...

【专利技术属性】
技术研发人员：童友之，陈洁，
申请(专利权)人：苏州开拓药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：