基于miRNA预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性制造技术

本发明专利技术公开了基于miRNA预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性，所述miRNA包括miR

【技术实现步骤摘要】
基于miRNA预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体地，本专利技术涉及基于miRNA预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性。

技术介绍

[0002]肺癌(Lung cancer)是全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，其中，非小细胞肺癌(Non
‑
small cell lung cancer，NSCLC)占80％，而肺腺癌(Lung adenocarcinoma)是NSCLC的主要组织学类型(Ji P,Diederichs S,Wang W,et al.MALAT
‑
1,a novel noncoding RNA,and thymosinβ4predict metastasis and survival in early
‑
stage non
‑
small cell lung cancer[J].Oncogene,2003,22(39):8031
‑
8041.)。尽管目前对肺癌的相关研究和临床试验进展迅速，但肺癌预后仍较差，80
‑
85％患者诊断时已是中晚期，5年生存率不到15％(Bailey
‑
Wilson J E,Amos C I,Pinney S M,et al.A major lung cancer susceptibility locus maps to chromosome 6q23
–
25[J].The American Journal of Human Genetics,2004,75(3):460
‑
474.)，因此，为达到肺癌患者的早期诊断和精准化、个体化治疗，亟需筛查新的生物标志物和作用靶点，探讨肺癌发生发展的作用机制，提高肺癌病人患者的生存率。
[0003]miRNA是一种长度为19
‑
22个核苷酸的非编码单链RNA。它们通过沉默mRNA来发挥作用，从而在转录后水平调节基因的表达。miRNA的合成首先是由miRNA编码基因转录出pre
‑
miRNA，随后由RNaseⅢ家族成员Drosha将pri
‑
miRNA剪切成为长度大约为80bp的发卡结构的pre
‑
miRNA，也是miRNA前体。最后，pre
‑
miRNA在细胞质中被RNaseⅢ家族成员Dicer加工成双链的RNA。其中一条则与RNA沉默复合物(RNA
‑
induced silencing complex，RISC)结合形成了RISC
‑
miRNA复合物，随后再次结合到靶基因的mRNA的3
’
UTR来调控靶标。随着近期生物信息学在miRNA领域应用逐步推广和深入，科学家应用生物信息学软件对miRNA的机制进行分析，显示许多miRNA调控靶点位于与细胞癌变密切相关的肿瘤调控因子或通路上，这对于肿瘤病因学的研究具有重要意义。但目前对肺腺癌的分析多局限在对靶基因的预测。
[0004]目前，治疗肺腺癌的常规方法有手术治疗、含铂双药化疗、放疗和靶向治疗等，其中，含铂双药化疗作为一种晚期肺腺癌的治疗方案备受关注，也是临床上在晚期肺腺癌患者人群中应用较广的一种治疗方案，含铂双药化疗是指将铂类化疗药物(卡铂、顺铂)与其他非铂单药(紫杉醇、吉西他滨、长春瑞滨)联合应用，但是目前仍然难以预测哪些肺腺癌患者会对含铂双药化疗治疗方案具有敏感性，预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性或反应性仍然是一个巨大的挑战，因此，发现能够用于肺腺癌对含铂双药化疗敏感性进行准确预测的生物标志物，并将其应用于化疗前肺腺癌患者的筛查中对于本领域而言具有重要意义。

技术实现思路

[0005]为了克服目前本领域存在的上述技术问题，本专利技术的目的在于提供基于miRNA预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性。
[0006]本专利技术为了实现上述目的，采用了如下技术方案：
[0007]本专利技术的第一方面提供了检测样本中miRNA标志物表达水平的试剂在制备用于预测肺腺癌对含铂双药化疗的敏感性或反应性的产品中的应用。
[0008]进一步，所述miRNA标志物为miR
‑
3137、miR
‑
31、和/或miR
‑
449a。
[0009]本专利技术中所述miR
‑
3137的序列如SEQ ID NO:1所示；
[0010]UCUGUAGCCUGGGAGCAAUGGGGU(SEQ ID NO:1)
[0011]所述miR
‑
31的序列如SEQ ID NO:2所示；
[0012]UGCUAUGCCAACAUAUUGCCAU(SEQ ID NO:2)
[0013]所述miR
‑
449a的序列如SEQ ID NO:3所示；
[0014]UGGCAGUGUAUUGUUAGCUGGU(SEQ ID NO:3)
[0015]进一步，所述miRNA标志物为miR
‑
3137、miR
‑
31、和/或miR
‑
449a均为人源(hsa)的miRNA。
[0016]进一步，所述试剂选自：
[0017]特异性识别所述miRNA标志物的探针；或
[0018]特异性扩增所述miRNA标志物的引物。
[0019]进一步，所述含铂双药化疗这一治疗方案包括卡铂+紫杉醇、顺铂+吉西他滨、顺铂+长春瑞滨、卡铂+吉西他滨。
[0020]进一步，所述产品包括通过高通量测序方法、实时定量PCR、RT
‑
PCR、原位杂交、芯片检测样本中所述miRNA标志物表达水平的试剂。
[0021]进一步，本专利技术所述的高通量测序方法包括一代测序、二代测序、三代测序，其中，一代测序也称Sanger测序，是利用DNA聚合酶合成反应的测序技术，一代测序是基于Sanger方法的测序技术；二代测序基于大规模平行测序技术(Massive parallel analysis，MPS)，它能同时完成测序模板互补链的合成和序列数据的获取；三代测序则基于单分子测序和大规模平行测序技术。
[0022]进一步，本专利技术中所述的实时定量PCR是指实时定量聚合酶链式反应，PCR通常使用变性、引物对与相反链的退火以及引物延伸的多个循环，以指数方式增加靶核酸序列的拷贝数；RT
‑
PCR则将逆转录酶用于从mRNA制备互补的DNA(cDNA)，然后将cDNA通过PCR扩增以产生DNA的多个拷贝，本专利技术中所述的RT
‑
PCR是指逆转录聚合酶链式反应。
[0023]进一步，本专利技术中所述的原位杂交，是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程，原位杂交可以在细胞标本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测样本中miRNA标志物表达水平的试剂在制备用于预测肺腺癌对含铂双药化疗的敏感性或反应性的产品中的应用，其特征在于，所述miRNA标志物为miR
‑
3137、miR
‑
31、和/或miR
‑
449a。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：特异性识别所述miRNA标志物的探针；或特异性扩增所述miRNA标志物的引物。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括通过高通量测序方法、实时定量PCR、RT
‑
PCR、原位杂交、芯片检测样本中所述miRNA标志物表达水平的试剂。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述样本来源于受试者的血液或组织。5.一种用于预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性或反应性的产品，其特征在于，所述产品包含检测样本中miRNA标志物表达水平的试剂，所述miRNA标志物为miR
‑
3137、miR
‑
31、和/或miR
‑
449a。6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述试剂选自：特异性识别所述miRNA标志物的探针；或特异性扩增所述miRNA标志物的引物。7.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述产品包括试剂盒、芯片、或试纸。8.一种用于提高肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性或反应性的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括升高miR
‑
3137表达水平的试剂、升高miR
‑
31表达水平的试剂、和/或降低miR
‑
449a表达水平的试剂。9.miRNA标志物miR...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，王丹，范冰燕，郭静，
申请(专利权)人：青岛泱深生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：