试验装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供用于检测样本中分析物的存在的试验装置和方法。本发明专利技术的装置包括试剂区、一个或更多个捕获区和检测区。在样本中存在阴性标志物和/或样本中不存在阳性标志物的情况下，捕获区可以减少到达检测区的经标记偶合物的量，促进高灵敏度和改进的特异性测试。促进高灵敏度和改进的特异性测试。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】试验装置


[0001]本专利技术提供了一种用于检测样本中分析物的存在的试验装置。

技术介绍

[0002]例如参见EP291194，已经开发和商业化用于检测液体样本中分析物的简单的侧流免疫分析装置。此类装置通常包含多孔载体，所述多孔载体包含能够与所讨论的分析物结合的干燥的、可移动(mobilisable)的经标记结合试剂，和同样能够与在经标记结合试剂下游的检测区提供的分析物结合的固定的结合试剂。在处于潮湿状态的情况下，可移动的经标记结合试剂在多孔载体内是可移动的。固定的结合试剂永久固定在检测区中，因此在潮湿状态下不可移动。在检测区发现被捕获的经标记结合试剂表示样本中存在分析物。
[0003]或者，在感兴趣的分析物是半抗原的情况下，免疫分析装置可采用竞争反应，其中，经标记的分析物或分析物类似物与样本中存在的分析物竞争结合检测区处的固定的结合试剂。或者，试验装置可采用抑制反应，在检测区提供固定的分析物或分析物类似物，试验装置还包括用于分析物的可移动的经标记结合试剂。
[0004]试验装置能够检测多于一种分析物的存在和/或量。例如，在检测滥用药物存在的试验情况下，所述装置能够确定整个药物组。这种侧流免疫分析装置通常设有更多个检测区，这些区域提供在试验装置内的单个或更多个侧流载体上。
[0005]已经开发了数字装置，其包含用来识别试验结果的光学检测构件和用来显示试验结果的显示构件。与试纸组合使用以确定液体样本中分析物的浓度和/或量的数字试验读取器被称为含集成数字试验读取器的试验装置。EP1484601中公开了这种装置的实施例。
[0006]来自如发光二极管(LED)的光源的光照射到多孔载体的一部分上，反射光或透射光被光探测器检测。通常，读取器有一个以上的LED来照亮载体的各个区域，并且为更多个LED中的每一个提供相应的光探测器。EP1484601公开了一种用于侧流试纸数字读取装置的光路布置，其包括减少装置中光探测器量的可能性的挡板布置。
[0007]上述类型的试验技术已被应用到“自检”妊娠测试装置中。通常，这些装置由怀疑自己可能妊娠的女性使用。因此，它们的设计方式必须易于使用(不需要任何医疗或技术培训)，并且通常在单次使用后即可丢弃。所述装置通常是侧流免疫分析装置，并且通常通过将侧流试验棒的采样部分与尿样接触来启动测试。试验棒的采样部分可以浸入容器中的尿液样本中，或者更通常地，用户可以直接在采样部分上排尿。然后在用户不需要执行任何进一步的步骤的情况下进行试验，显示结果并用肉眼读取，或者，在数字装置中，由试验结果读取构件识别结果，并通过诸如液晶显示器(LCD)等的显示器展示给用户。
[0008]此类常规妊娠测试测量样本中的人绒毛膜促性腺激素(hCG)。hCG由发育中的胚胎产生，样本中的hCG浓度高于某个阈值将导致阳性(即“妊娠”)结果。
[0009]有必要对妊娠测试，特别是自检的妊娠测试进行改进：许多女性希望尽可能快地知道自己是否妊娠。尽早确认妊娠是有益的，因为阳性妊娠测试可以引起重要的积极行为改变，促进母体和胎儿的健康。例如，促使孕妇调整饮食，开始服用妊娠补充剂并避免药物、
Endocrinology&Metabolism 1987 64,730
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6)。随着女性接近绝经期，每个周期可供募集的卵泡数量下降，需要更多的促卵泡激素(FSH)来刺激剩余的卵泡。因此，FSH水平增加，对于一部分女性，这种FSH的增加也可能会持续到绝经期。围绝经期和绝经后女性FSH含量的增加会导致脑垂体中共产生少量hCG。
[0019]如Snyder等人(Clinical Chemistry 2005 51,1830
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1835)和Alfthan等人(Clinical Chemistry 1992 38,1981
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1987)的几位研究人员已经记录了绝经后女性会产生hCG。据报道，血清水平可高达13mIU/ml，其中，6.7％的女性hCG浓度高于5mIU/ml(Snyder et al,2005)。
[0020]为了能早在停经的前六天检测妊娠，需要高灵敏度的hCG检测。然而，仅检测低水平hCG的高灵敏度妊娠试验(即同时检测妊娠和脑垂体产生的hCG的试验)的风险在于，它也更有可能检测到低水平的垂体hCG，因此会给出假阳性结果。
[0021]在不同的背景下，在许多国家中，进行任何可能伤害发育中的胎儿的医疗干预之前，几乎所有育龄女性患者都进行常规血清hCG测试。已认识到围绝经期和绝经后女性因“垂体”hCG导致血清hCG水平升高的问题。Snyder等人(Clinical Chemistry 2005 51,1830
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1835)检查了非妊娠女性血清hCG浓度随年龄的变化，并研究了使用血清FSH测量值作为辅助手段，解释高于预期的hCG结果。他们建议将血清hCG测量值、受试者年龄和血清FSH测量值相结合，可以减少或避免“假阳性”妊娠结果。然而，这些研究人员并不关心自检妊娠试验，尤其是不关心在非常早期阶段的妊娠检测。
[0022]已经尝试减少因检测到尿样中存在的非妊娠相关hCG而导致的假阳性妊娠结果的发生。例如，WO2016156981公开了一种检测妊娠的测试装置，其包含：测量受试者样本中hCG的绝对或相对量的试验构件；测量受试者样本中FSH的绝对或相对量的试验构件；测量受试者样本中一种或更多种黄体酮代谢物的绝对或相对量的试验构件。这个概念是基于以下观察结果。首先，在受孕后，由于女性已经妊娠，不需要进一步的排卵周期。因此，受孕后，FSH的减少抑制了卵泡生成。所以，孕妇的预期hCG水平高，FSH水平低。其次，在妊娠的前10
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12周中，黄体产生的黄体酮支持子宫内膜，从而使妊娠得以继续。黄体酮在月经周期的部分黄体期升高，但如果没有妊娠，所述水平会回落到基线水平(即在月经的情况下)。但是，如果妊娠，黄体酮(及其泌尿代谢物)的水平将保持升高，并会在整个孕期继续升高，因此黄体酮(及其泌尿代谢物)可以作为hCG的辅助，对妊娠进行额外的确认。因此，WO2016156981试图通过提出一种测试装置来解决假阳性妊娠结果的问题，所述测试装置除了hCG的试验外，还包括测量FSH和一种或更多种黄体酮代谢物的试验。FSH和黄体酮代谢物试验的结果用于决定是否根据阳性hCG结果来指示妊娠。
[0023]读取和解释许多试验结果以确定是否可以宣布阳性结果是费力的并且为错误产生留有空间，特别是对于此类装置的典型用户(这些用户没有接受过实施或解释生化试验的培训)。WO2016156981提出使用数字试验读取器来减轻用户的负担。然而，这种方法的一个缺点是它增加了测试装置的成本和复杂性。

技术实现思路

[0024]本专利技术提供用于检测样本中分析物的存在的试验装置。所述装置包含试验流动路径，所述流动路径包含：
[0025](a)试剂区，所述试剂区包含可移动的经标记偶合物，所述经标记偶合物配置为关联所述分析物，其中，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于检测样本中分析物的存在的试验装置，所述装置包含试验流动路径，所述流动路径包含：(a)试剂区，所述试剂区包含可移动的经标记偶合物，所述经标记偶合物包含可检测的标记，所述可检测的标记直接或间接地连接至(i)用于将所述经标记偶合物与所述分析物相关联的构件以及用于将所述经标记偶合物与第一阴性标志物相关联的构件，所述第一阴性标志物可能存在于所述样本中，和/或(ii)用于将所述经标记偶合物与所述分析物相关联的构件，其中所述经标记偶合物进一步包含阳性标志物或阳性标志物偶合物，所述阳性标志物偶合物的阳性标志物部分能用于结合，和/或其中可移动的阳性标志物或阳性标志物偶合物单独提供在所述试剂区中并配置为在移动后与所述经标记偶合物相关联，以使得在所述经标记偶合物与所述阳性标志物或阳性标志物偶合物相关联时，所述偶合物的阳性标志物部分能用于结合，和/或(iii)用于将所述经标记偶合物与所述分析物相关联的构件以及用于将所述经标记偶合物与所述装置中的阳性标志物或阳性标志物偶合物或可能存在于所述样本中的阳性标志物相关联的构件，可选地，并且其中所述试剂区进一步包含用于固定在所述试剂区下游的可移动的阳性标志物或阳性标志物偶合物，(b)一个或更多个捕获区，其中，(i)在所述试剂区包含选项(i)的情况下，至少一个捕获区包含固定的捕获物质，所述捕获物质配置为捕获含所述经标记偶合物和所述第一阴性标志物的复合物，其中捕获所述复合物优选通过与所述第一阴性标志物的特异性结合反应实现，(ii)在所述试剂区包含选项(ii)的情况下，至少一个捕获区包含固定的捕获物质，所述捕获物质配置为捕获含所述阳性标志物或阳性标志物偶合物的经标记偶合物或与所述阳性标志物或阳性标志物偶合物相关联的经标记偶合物或者在所述样本中存在阳性标志物的情况下的所述阳性标志物其中，捕获所述经标记偶合物优选通过与阳性标志物或阳性标志物偶合物的特异性结合反应实现，(iii)在所述试剂区包含选项(iii)的情况下，至少一个捕获区包含固定的捕获物质，所述捕获物质配置为捕获含用于将所述经标记偶合物与阳性标志物或阳性标志物偶合物相关联的构件的经标记偶合物，其中所述固定的捕获物质包含固定的阳性标志物或阳性标志物偶合物或由固定的阳性标志物或阳性标志物偶合物组成，和/或在所述试剂区包含可移动的阳性标志物或阳性标志物偶合物的情况下，至少一个捕获区包含用于将所述可移动的阳性标志物或阳性标志物偶合物定位在所述捕获区的固定的捕获物质，从而使得所述偶合物的阳性标志物部分能用于结合，其中所述经标记偶合物的捕获优选通过与用于将所述经标记偶合物与阳性标志物或阳性标志物偶合物相关联的构件的特异性结合反应实现，(c)检测区，所述检测区包含固定的结合试剂，所述固定的结合试剂用于捕获含所述经标记偶合物和所述分析物的复合物，其中复合物的捕获优选通过与所述分析物的特异性结合反应实现，其中，所述捕获区或每一个捕获区在所述试剂区的下游，并且所述检测区在所述捕获区或每一个捕获区的下游。
2.根据权利要求1所述的试验装置，其中，所述装置被布置成用户在使用中看不到所述捕获区或每一个捕获区。3.根据权利要求1或2所述的试验装置，其中，所述捕获区或每一个捕获区不能被试验读取构件读取。4.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述用于将所述经标记偶合物与所述分析物相关联的构件包含结合试剂或由结合试剂组成，所述结合试剂例如是与所述分析物的表位结合的抗体。5.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述用于将所述经标记偶合物与第一阴性标志物相关联的构件包含结合试剂或由结合试剂组成，所述结合试剂例如是与所述第一阴性标志物的表位结合的抗体。6.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，用于将所述经标记偶合物与所述分析物相关联的构件以及用于将所述经标记偶合物与第一阴性标志物相关联的构件是(a)相同的或(b)不同的。7.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述用于将所述经标记偶合物与所述分析物相关联的构件包含结合试剂或由结合试剂组成，所述结合试剂例如是与所述分析物和所述第一阴性标志物共享的表位结合的抗体。8.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述用于将所述经标记偶合物与阳性标志物相关联的构件包含结合试剂或由结合试剂组成，所述结合试剂例如是与所述阳性标志物或阳性标志物偶合物特异性结合的抗体。9.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述一个或更多个捕获区包含与所述第一阴性标志物特异性结合的固定的捕获物质。10.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述一个或更多个捕获区包含与所述阳性标志物或阳性标志物偶合物特异性结合的固定的捕获物质。11.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，捕获区中的所述固定的捕获物质与不存在于所述分析物的所述第一阴性标志物的表位结合。12.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述试剂区包含特异性针对所述第一阴性标志物的可移动的第一阴性标志物结合试剂，所述可移动的第一阴性标志物结合试剂与第一结合配偶体连接，并且所述捕获区包含针对所述第一结合配偶体的固定的第二结合配偶体。13.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述试剂区包含特异性针对所述阳性标志物的可移动的阳性标志物结合试剂，所述可移动的阳性标志物结合试剂与第一结合配偶体连接，并且所述捕获区包含针对所述第一结合配偶体的固定的第二结合配偶体，优选地，其中所述经标记偶合物包含阳性标志物或阳性标志物偶合物和/或，其中可移动的阳性标志物或阳性标志物偶合物单独提供在所述试剂区中并配置为在移动后与所述经标记偶合物相关联，从而使得在所述经标记偶合物与所述阳性标志物或所述阳性标志物偶合物相关联的情况下，所述阳性标志物或所述偶合物的阳性标志物部分能用于结合。14.根据前述权利要求中任一项所述的试验装置，其中，所述试剂区包含与第一结合配偶体连接的可移动的阳性标志物或阳性标志物偶合物，并且所述捕获区包含针对所述第一结合配偶体的固定的第二结合配偶体，优选地，其中所述经标记偶合物包含用于将所述经
标记偶合物与阳性标志物或阳性标志物偶合物相关联的构件。15.根据前述权利要求中任一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：凯瑟琳，
申请(专利权)人：瑞士斯保德精密诊断有限公司，
类型：发明
国别省市：