分泌ST2抗体的杂交瘤细胞株及其应用制造技术

本发明专利技术提供了能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株分泌的ST2的抗体可以高效的用于双抗体夹心法对ST2进行检测，本发明专利技术的杂交瘤细胞株分泌的单抗，可用于制备双抗夹心ELISA检测ST2所需的配对单克隆抗体，在优选的实施方式中，用于血液中ST2蛋白的双抗夹心ELISA检测。的双抗夹心ELISA检测。的双抗夹心ELISA检测。

【技术实现步骤摘要】
分泌ST2抗体的杂交瘤细胞株及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种产生/分泌ST2抗体的杂交瘤细 胞株以及其应用。

技术介绍

[0002]ST2是白介素1受体家族的成员，也称为生长刺激表达基因2蛋白。ST2 有两个主要亚型：跨膜型或细胞型(ST2L)和可溶性型或循环型(sST2)。ST2 是白介素33(IL
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33)的受体，IL
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33被认为是一种核因子，通过结合心肌细胞 膜表面受体ST2L，启动下游信号传导通路，保护心肌，改善心肌功能，而ST2 与ST2L竞争结合IL
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33，降低IL
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33/ST2L系统保护心脏的功效。研究显示， 急性失代偿心衰患者ST2＞35ng/ml时，一年内患者死亡与心衰再住院风险显 著增高，一年内死亡率与ST2浓度呈正相关。ST2检测在临床应用中的价值受 到了越来越多的关注。
[0003]双抗体(原)夹心法，通常是结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其 免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。受 检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成 的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。加入酶标记的抗原或抗体，通过 反应也结合在固相载体上。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物， 产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据呈色的深浅进行定性或定量分 析。酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高 的敏感度。
>[0004]对于ST2的免疫学检测，获得高质量的ST2抗体至关重要，尤其是能用 于ST2的双抗体夹心法检测的抗体至关重要。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供了能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞 株分泌的ST2的抗体可以高效的用于双抗体夹心法对ST2进行检测。
[0006]本专利技术的杂交瘤细胞株分泌的单抗，可用于制备双抗夹心ELISA检测ST2 所需的配对单克隆抗体，在优选的实施方式中，用于血液中ST2蛋白的双抗夹 心ELISA检测。
[0007]本专利技术中，分泌2#、4#和6#单克隆抗体的杂交瘤细胞株分别为7G3、4C8 和11G5，相关杂交瘤细胞株已于2021年6月10日保藏于中国微生物菌种保 藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰 西路1号院3号，邮编：100101，电话：010
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64807355；其中，杂交瘤细胞7G3 的保藏编号为CGMCC No.22353，杂交瘤细胞4C8的保藏编号为CGMCCNo.22355，杂交瘤细胞11G5的保藏编号为CGMCC No.22354。
[0008]一方面，本专利技术提供了分泌ST2(生长刺激表达基因2蛋白)抗体的杂交 瘤细胞，所述杂交瘤细胞选自上述杂交瘤细胞株分别为7G3、4C8和11G5中 的一种或任意几种组合。
[0009]另一方面，本专利技术还提供了ST2的单克隆抗体，所述单克隆抗体由上述杂 交瘤细胞分泌产生。
[0010]另一方面，本专利技术还提供了上述杂交瘤细胞在制备ST2的单克隆抗体中的应用。
[0011]另一方面，本专利技术还提供了一种检测ST2的试剂盒，所述试剂盒包括上述杂交瘤细胞或上述单克隆抗体。
[0012]另一方面，本专利技术还提供了上述杂交瘤细胞或上述单克隆抗体在检测ST2中的应用，或者在制备检测ST2的试剂盒中的应用。
[0013]在优选的实施方式中，所述试剂盒为ELISA检测试剂盒，更优选，采用ELISA双抗体夹心法检测ST2蛋白。
[0014]在用于双抗体夹心法检测ST2蛋白时，所述杂交瘤细胞7G3分泌的抗体可以作为“包被抗体”(或者，称之为“捕获抗体”)，所述杂交瘤细胞4C8或杂交瘤细胞11G5分泌的抗体可以作为“结合抗体”(或者，称之为“检测抗体”)。
[0015]术语“包被抗体”(或者，称之为“捕获抗体”)是指包被于固相的酶标板上的抗体。术语“结合抗体”(或者，称之为“检测抗体”)是指试剂盒中可与待测抗原(ST2)及酶标记的抗抗体结合的特异性抗体。本领域技术人员能够理解，“包被抗体”是能够首先特异性识别待测抗原的抗体，“结合抗体”是另一种能够特异性识别待测抗原的抗体。
[0016]另一方面，本专利技术还提供了一种利用双抗体夹心法检测ST2的方法，所述方法包括利用杂交瘤细胞7G3分泌的抗体作为捕获抗体，以及利用杂交瘤细胞4C8或杂交瘤细胞11G5分泌的抗体作为检测抗体，对ST2进行检测的步骤；优选的，用于检测受试者血清中的ST2。
[0017]另一方面，本专利技术还提供了上述杂交瘤细胞株、上述抗体、上述试剂盒在检测ST2中的应用；在优选的实施方式中，检测受试者血清或血浆中的ST2。
[0018]本专利技术中提供了以下技术方案：
[0019]一种能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞7G3，所述杂交瘤细胞7G3保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2021年6月10日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，电话：010
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64807355，保藏编号为CGMCCNo.22353。
[0020]一种组合使用的能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株组合，所述杂交瘤细胞株组合包括杂交瘤细胞7G3，所述杂交瘤细胞株组合还包括选自杂交瘤细胞4C8和杂交瘤细胞11G5中的一种或两种；
[0021]所述杂交瘤细胞4C8保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2021年6月10日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，电话：010
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64807355，保藏编号为CGMCCNo.22355；
[0022]所述杂交瘤细胞11G5保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2021年6月10日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，电话：010
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64807355，保藏编号为CGMCCNo.22354。
[0023]一种结合ST2的单克隆抗体，所述单克隆抗体由上述杂交瘤细胞株或上述杂交瘤细胞株组合分泌产生。
[0024]本专利技术还提供了用于双抗夹心法检测ST2的单克隆抗体组合，所述单克隆抗体组合由以下抗体组成：(1)由杂交瘤细胞7G3分泌的单克隆抗体；(2)由杂交瘤细胞4C8或杂交瘤细胞11G5分泌的单克隆抗体。
[0025]本专利技术还提供了上述杂交瘤细胞株或杂交瘤细胞株组合在制备ST2的单 克隆抗体中的应用。
[0026]本专利技术还提供了一种检测ST2的试剂盒，所述试剂盒包括权上述杂交瘤细 胞株，或者杂交瘤细胞株组合，或者单克隆抗体，或者，单克隆抗体组合。
[0027]本专利技术还提供了上述杂交瘤细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞7G3，所述杂交瘤细胞7G3保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2021年6月10日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，电话：010
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64807355，保藏编号为CGMCC No.22353。2.一种组合使用的能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株组合，所述杂交瘤细胞株组合包括权利要求1所述的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株组合还包括选自杂交瘤细胞4C8和杂交瘤细胞11G5中的一种或两种；所述杂交瘤细胞4C8保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2021年6月10日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，电话：010
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64807355，保藏编号为CGMCC No.22355；所述杂交瘤细胞11G5保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2021年6月10日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，电话：010
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64807355，保藏编号为CGMCC No.22354。3.一种结合ST2的单克隆...

【专利技术属性】
技术研发人员：杭海英，安莉莉，冉凡磊，赵云，罗蕊琪，
申请(专利权)人：中国科学院生物物理研究所，
类型：发明
国别省市：