用于治疗核纤层蛋白病的组合物及方法技术

本申请提供用于治疗、预防或抑制核纤层蛋白病的组合物及方法。在一个方面中，本申请提供包含编码核纤层蛋白A及/或核纤层蛋白C的核苷酸序列的核酸构建体及/或载体。苷酸序列的核酸构建体及/或载体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗核纤层蛋白病的组合物及方法
相关申请案的交叉引用本申请案主张2019年2月28日申请的美国临时申请案第62/812,021号的优先权。前述申请案以全文引用的方式并入本文中。

技术介绍

[0001]通过由于常用替代性剪接，LMNA基因编码至少三种同种型(核纤层蛋白(lamin)A、核纤层蛋白C及核纤层蛋白AΔ10)。两个主要同种型核纤层蛋白A及核纤层蛋白C为纤维核薄层(位于核包膜的内膜与DNA之间的复合分子接口)的组成性组分。核纤层蛋白A及核纤层蛋白C具有在机械核膜维持至基因调节范围内的不同生理作用。LMNA基因中的许多突变引起称为核纤层蛋白病的一系列疾病。这些疾病包括至少八个经充分表征的表型，其中一些受限于骨胳肌或表皮，而其他为多系统的。
[0002]扩张型心肌症为LMNA相关疾病的大家族中的疾病中的一种。扩张型心肌症的发生率在1:2500名个体至1:250名个体范围内。扩张型心肌症的特征在于左心室或两个心室的扩张及减弱的收缩以及减弱的收缩性功能。尽管为罕见疾病，扩张型心肌症表现出严重的健康负荷，通常引起心律不齐、血栓栓塞及在疾病的任何阶段的猝死。没有用于扩张型心肌症或其他LMNA相关核纤层蛋白病的特定治疗。
[0003]需要用于核纤层蛋白病(例如扩张型心肌症)的新颖治疗。

技术实现思路

[0004]在一些实施方案中，本文提供可用于治疗例如扩张型心肌症的核纤层蛋白病的组合物及方法。
[0005]在一些实施方案中，本专利技术提供一种核酸构建体，该核酸构建体包含可操作地连接至具有少于500bp的调节组件的核苷酸序列，该核苷酸序列编码(a)核纤层蛋白A多肽、(b)核纤层蛋白C多肽、或(c)核纤层蛋白A多肽及核纤层蛋白C多肽或(a)
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(c)中的任一者的生物活性变体及/或片段。在一些实施方案中，本专利技术提供一种包含核苷酸序列的核酸构建体，该核苷酸序列编码(a)核纤层蛋白A多肽、(b)核纤层蛋白C多肽、或(c)核纤层蛋白A多肽及核纤层蛋白C多肽或(a)
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(c)中的任一者的生物活性变体及/或片段，其中该核苷酸序列包含至少一个(但非所有)LMNA基因的非编码序列。在某些实施方案中，非编码序列为内含子。在某些实施方案中，核苷酸序列包含至少一个(但非所有)与野生型人类LMNA基因的内含子1至11对应的内含子。在某些实施方案中，核苷酸序列包含与野生型人类LMNA基因的内含子10对应的内含子。在某些实施方案中，与内含子10对应的内含子包含与SEQ ID NO:79的核苷酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的核苷酸序列或其片段。在某些实施方案中，核苷酸序列包含与野生型人类LMNA基因的内含子8对应的内含子。在某些实施方案中，与内含子8对应的内含子包含与SEQ ID NO:77的核苷酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的核苷酸序列或其片段。在某些实施方案中，核苷酸序列包含与野生型人类LMNA基因的内含子9对应的内含子。在某些实施方案中，与内含子
9对应的内含子包含与SEQ ID NO:78的核苷酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的核苷酸序列或其片段。在某些实施方案中，核苷酸序列包含与野生型人类LMNA基因的内含子11对应的内含子。在某些实施方案中，与内含子11对应的内含子包含与SEQ ID NO:80的核苷酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的核苷酸序列或其片段。在某些实施方案中，核苷酸序列包含与野生型人类LMNA基因的内含子9及10对应的内含子。在某些实施方案中，核苷酸序列包含与野生型人类LMNA基因的内含子8、9、10及11对应的内含子。在某些实施方案中，核酸构建体包含至少一个与野生型人类LMNA基因的内含子8至11对应的内含子，且缺少至少一个与野生型人类LMNA基因的内含子1至7对应的内含子。在某些实施方案中，核酸构建体包含与野生型人类LMNA基因的内含子10对应的内含子，且缺少与野生型人类LMNA基因的内含子1至7对应的内含子。在某些实施方案中，核酸构建体包含与野生型人类LMNA基因的内含子8至11对应的内含子，且缺少与野生型人类LMNA基因的内含子1至7对应的内含子。在某些实施方案中，核酸构建体包含与野生型人类LMNA基因的内含子9及10对应的内含子，且缺少与野生型人类LMNA基因的内含子1至8及11对应的内含子。在某些实施方案中，核酸构建体包含与野生型人类LMNA基因的内含子10对应的内含子，且缺少与野生型人类LMNA基因的内含子1至9及11对应的内含子。在某些实施方案中，核苷酸序列可操作地连接至调节组件。在某些实施方案中，核苷酸序列可操作地连接至具有少于或等于400个碱基对(bp)、300bp、250bp、200bp、150bp、140bp、130bp、120bp、110bp、100bp、70bp或50bp的调节组件。在某些实施方案中，调节组件为以下者中的任一者或其组合：SEQ ID NO:30至58中的任一者、CBA、CMV、SCP、SERpE_TTR、Proto1、minCMV、UCL
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HLP、CMVe、CAG或EFS。在某些实施方案中，调节组件为SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:33、CBA或minCMV中的任一者或其组合。在某些实施方案中，调节组件为SEQ ID NO:33。在某些实施方案中，调节组件为CBA。在某些实施方案中，调节组件为minCMV。在某些实施方案中，调节组件为细胞类型选择性的。在某些实施方案中，调节组件在心肌细胞中选择性表达。在某些实施方案中，核酸构建体包含与SEQ ID NO:1至10中的任一者的核苷酸序列或其密码子优化变体及/或片段至少80％一致的核苷酸序列。在某些实施方案中，核酸构建体包含与SEQ ID NO:1至10中的任一者的核苷酸序列或其密码子优化变体及/或片段至少90％一致的核苷酸序列。在某些实施方案中，核酸构建体包含与SEQ ID NO:1至10中的任一者的核苷酸序列或其密码子优化变体及/或片段至少95％一致的核苷酸序列。在某些实施方案中，核酸构建体包含为SEQ ID NO:1至10中的任一者的序列或其密码子优化变体及/或片段的核苷酸序列。在某些实施方案中，核苷酸序列编码包含与SEQ ID NO:12的氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的氨基酸序列的核纤层蛋白A多肽或其生物活性片段。在某些实施方案中，核苷酸序列编码包含与SEQ ID NO:21的氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的氨基酸序列的核纤层蛋白A多肽或其生物活性片段。在某些实施方案中，核苷酸序列编码包含与SEQ ID NO:13的氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的氨基酸序列的核纤层蛋白C多肽或其生物活性片段。在某些实施方案中，核苷酸序列编码包含与SEQ ID NO:12的氨基酸序列至少80％、85％、9本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种核酸构建体，该核酸构建体包含编码核纤层蛋白(lamin)A多肽及核纤层蛋白C多肽或其生物活性变体及/或片段的核苷酸序列，其中该构建体至少包含野生型人类LMNA基因的内含子8或内含子11。2.如权利要求1的核酸构建体，其中内含子8包含与SEQ ID NO:77的核苷酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的核苷酸序列或其片段。3.如权利要求1的核酸构建体，其中内含子11包含与SEQ ID NO:80的核苷酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的核苷酸序列或其片段。4.如权利要求1至3中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列进一步包含野生型人类LMNA基因的内含子10。5.如权利要求4的核酸构建体，其中内含子10包含与SEQ ID NO:79的核苷酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的核苷酸序列或其片段。6.如权利要求1至5中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列进一步包含野生型人类LMNA基因的内含子9。7.如权利要求6的核酸构建体，其中内含子9包含与SEQ ID NO:78的核苷酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的核苷酸序列或其片段。8.如权利要求1至7中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列包含野生型人类LMNA基因的内含子8及11。9.如权利要求1至8中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列包含野生型人类LMNA基因的内含子8。10.如权利要求1至8中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列包含野生型人类LMNA基因的内含子11。11.如权利要求1至10中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列进一步包含野生型人类LMNA基因的内含子9及10。12.如权利要求1至11中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列包含野生型人类LMNA基因的内含子8、9、10及11。13.如权利要求1至12中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体缺少至少一个与野生型人类LMNA基因的内含子1至7对应的内含子。14.如权利要求1至12中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体缺少野生型人类LMNA基因的内含子1至7。15.如权利要求1至14中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体进一步包含野生型人类LMNA基因的内含子9，且缺少至少一个与野生型人类LMNA基因的内含子1至7对应的内含子。16.如权利要求1至15中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体进一步包含野生型人类LMNA基因的内含子10，且缺少至少一个与野生型人类LMNA基因的内含子1至7对应的内含子。17.如权利要求1至16中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体包含野生型人类LMNA基因的内含子8至11，且缺少野生型人类LMNA基因的内含子1至7。18.如权利要求1至17中任一项的核酸构建体，其中调节组件具有少于或等于500个碱基对。
19.如权利要求1至17中任一项的核酸构建体，其中该调节组件具有少于或等于900个碱基对。20.如权利要求1至17中任一项的核酸构建体，其中该调节组件具有少于或等于800个碱基对(bp)、700bp、600bp、500bp、400bp、300bp、250bp、200bp、150bp、140bp、130bp、120bp、110bp、100bp、70bp或50bp。21.如权利要求1至20中任一项的核酸构建体，其中调节组件为以下者中的任一者或组合：SEQ ID NO:30至58中的任一者、SEQ ID NO:102、CBA、CMV、SCP、SERpE_TTR、Proto1、minCMV、UCL
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HLP、CMVe、Myh6、肌间线蛋白(Desmin)、cTnT、α
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MHC、MLC
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2、CAG或EFS。22.如权利要求1至21中任一项的核酸构建体，其中调节组件为SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:33、CBA或minCMV中的任一者或组合。23.如权利要求21的核酸构建体，其中该调节组件为SEQ ID NO:33。24.如权利要求21的核酸构建体，其中该调节组件为CBA。25.如权利要求21的核酸构建体，其中该调节组件为minCMV。26.如权利要求1至25中任一项的核酸构建体，其中调节组件为细胞类型选择性的。27.如权利要求1至26中任一项的核酸构建体，其中调节组件在心肌细胞中选择性表达。28.如权利要求27的核酸构建体，其中该调节组件为Myh6、肌间线蛋白、cTnT、α
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MHC、或MLC
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2中的任一者或组合。29.如权利要求26的核酸构建体，其中该调节组件为cTNT。30.如权利要求29的核酸构建体，其中该cTNT调节组件包含SEQ ID NO:101。31.如权利要求1至30中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体包含与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8的核苷酸序列至少80％一致的核苷酸序列或其密码子优化变体及/或片段。32.如权利要求1至30中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体包含与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8的核苷酸序列至少90％一致的核苷酸序列或其密码子优化变体及/或片段。33.如权利要求1至30中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体包含与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8的核苷酸序列至少95％一致的核苷酸序列或其密码子优化变体及/或片段。34.如权利要求1至30中任一项的核酸构建体，其中该核酸构建体包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8的序列的核苷酸序列或其密码子优化变体及/或片段。35.如权利要求1至34中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列编码包含与SEQ ID NO:12的氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的氨基酸序列的核纤层蛋白A多肽或其生物活性片段及包含与SEQ ID NO:13的氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的氨基酸序列的核纤层蛋白C多肽或其生物活性片段。36.如权利要求1至34中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列编码包含与SEQ ID NO:21的氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的氨基酸序列的核纤层蛋白A多肽或其生物活性片段及包含与SEQ ID NO:13的氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％一致的氨基酸序列的核纤层蛋白C多肽或其生物活性片段。37.如权利要求1至36中任一项的核酸构建体，其中该核苷酸序列进一步包含多腺苷酸化信号。38.一种病毒载体，其包含如权利要求1至37中任一项的核酸构建体。
39.一种病毒载体，其包含编码核纤层蛋白A多肽及核纤层蛋白C多肽或其生物活性变体及/或片段的核苷酸序列，其中该核苷酸序列至少包含野生型人类LMNA基因的内含子8或内含子11。40.一种病毒载体，其包含编码以下者的核苷酸序列：(a)野生型LMNA基因的外显子1至12；及(b)野生型LMNA基因的内含子8。41.一种病毒载体，其包含编码以下者的核苷酸序列：(a)野生型LMNA基因的外显子1至12；及(b)野生型LMNA基因的内含子11。42.一种病毒载体，其包含编码以下者的核苷酸序列：(a)野生型LMNA基因的外显子1至12；及(b)野生型LMNA基因的内含子8及内含子11。43.如权利要求39至42中任一项的病毒载体，其中该核苷酸序列进一步编码野生型LMNA基因的内含子9及10中的一或多者。44.一种病毒载体，其包含编码以下者的核苷酸序列：(a)野生型LMNA基因的外显子1至12；及(b)野生型LMNA基因的内含子8至11。45.如权利要求38至44中任一项的病毒载体，其中该核苷酸序列与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8的核苷酸序列至少80％一致或为其密码子优化变体及/或片段。46.如权利要求38至44中任一项的病毒载体，其中该核苷酸序列与SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：编码治疗公司，
类型：发明
国别省市：