包含CD4结合部分的免疫细胞受体制造技术

本申请提供了包含细胞外结构域、跨膜结构域和细胞内信号传导结构域的抗CD4免疫细胞受体，该细胞外结构域包含与CD4的某一结构域内的表位特异性结合的CD4结合部分。还提供了包含此类抗CD4免疫细胞受体的工程化免疫细胞及其用途。其用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含CD4结合部分的免疫细胞受体
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求于2019年5月16日提交的国际专利申请号PCT/CN 2019/087260的优先权，其内容通过引用以其全文并入本文。序列表以ASCII文本文件提交
[0002]以下以ASCII文本文件提交的内容通过援引以其全文并入本文：计算机可读形式(CRF)的序列表(文件名：761422800800.txt，记录日期：2020年5月11日，大小：57KB)。


[0003]本专利技术涉及包含免疫细胞受体的工程化免疫细胞(如工程化T细胞)，其可用于治疗传染病，如HIV和癌症。

技术介绍

[0004]T细胞介导的免疫是发展抗原(Ag)特异性T淋巴细胞以消除病毒、细菌、寄生虫感染、或恶性细胞的自适应过程。
[0005]CD4+T细胞在免疫系统中发挥最重要的协调作用，在T细胞介导的免疫和B细胞介导的(或体液)免疫中都发挥核心作用。在T细胞介导的免疫中，CD4+T细胞在CD8+T细胞的激活和成熟中发挥作用。在B细胞介导的免疫中，CD4+T细胞负责刺激B细胞使其增殖并诱导B细胞抗体类别转换。
[0006]人免疫缺陷病毒(HIV)感染的后果或许可以最好地说明CD4+T细胞所发挥的核心作用。该病毒是逆转录病毒，这意味着它以RNA携带其遗传信息并且携带逆转录酶，这使得一旦它进入宿主细胞，就可以由其RNA基因组产生DNA。然后可以将DNA整合到受影响的宿主细胞中，此时病毒基因被转录，并且受感染的细胞产生并释放更多的病毒颗粒。
[0007]HIV优先靶向CD4+T细胞；结果，受感染患者的免疫系统日益受损，因为免疫系统的主要协调细胞群急剧减少。事实上，HIV进展为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是以患者的CD4+T细胞计数为标志的。病毒对CD4+T细胞的这种靶向也导致受感染患者不能成功产生针对各种病原体(包括机会性病原体)的生产性免疫响应。
[0008]用各种药理学类别的药物靶向病毒防止了病毒抗性，并在受感染患者中显示出显著功效，但需要患者高度依从以确保其完全功效。事实上，不依从可能导致耐药菌株的出现，进一步导致难以有效管理和治疗患者的疾病和随后的并发症。
[0009]本文提到的所有出版物、专利、专利申请和公开的专利申请的披露内容通过援引以其全文特此并入本文。

技术实现思路

[0010]在一方面，本申请提供了抗CD4免疫细胞受体(“抗CD4 D1免疫细胞受体”)，其包含细胞外结构域、跨膜结构域和细胞内信号传导结构域，该细胞外结构域包含与CD4的结构域1(“D1”)内的表位特异性结合的CD4结合部分(“抗CD4 D1部分”)。在一些实施例中，该CD4结
合部分是单域抗体(sdAb)、scFv、Fab
’
、(Fab
’
)2、Fv或肽配体。
[0011]在根据一个或多个上述抗CD4 D1免疫细胞受体实施例的一些实施例中，该CD4结合部分与参考抗体竞争结合，该参考抗体与CD4的D1内的表位特异性结合(“抗CD4 D1抗体”)。在一些实施例中，该CD4结合部分与CD4的D1中的表位结合，该表位与参考抗CD4 D1抗体的结合表位重叠。在一些实施例中，该CD4结合部分包含与参考抗CD4 D1抗体相同的重链和轻链CDR序列。在一些实施例中，该CD4结合部分包含与参考抗CD4 D1抗体相同的重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)序列。
[0012]在根据一个或多个上述抗CD4 D1免疫细胞受体实施例的一些实施例中，该参考抗CD4 D1抗体包含含有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的重链CDR1(HC
‑
CDR1)、含有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的重链CDR2(HC
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CDR2)、含有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的重链CDR3(HC
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CDR3)、含有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的轻链CDR1(LC
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CDR1)、含有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的轻链CDR2(LC
‑
CDR2)和含有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的轻链CDR3(LC
‑
CDR3)。在一些实施例中，该参考抗CD4 D1抗体包含含有SEQ ID NO：7的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：8的氨基酸序列的VL。
[0013]在根据一个或多个上述抗CD4 D1免疫细胞受体实施例的一些实施例中，该参考抗CD4 D1抗体包含含有SEQ ID NO：9的氨基酸序列的HC
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CDR1、含有SEQ ID NO：10的氨基酸序列的HC
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CDR2、含有SEQ ID NO：11的氨基酸序列的HC
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CDR3、含有SEQ ID NO：12的氨基酸序列的LC
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CDR1、含有SEQ ID NO：13的氨基酸序列的LC
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CDR2和含有SEQ ID NO：14的氨基酸序列的LC
‑
CDR3。在一些实施例中，该参考抗CD4 D1抗体包含含有SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：16的氨基酸序列的VL。
[0014]在根据一个或多个上述抗CD4 D1免疫细胞受体实施例的一些实施例中，该参考抗CD4 D1抗体包含含有SEQ ID NO：17的氨基酸序列的重链CDR1(HC
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CDR1)、含有SEQ ID NO：18的氨基酸序列的重链CDR2(HC
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CDR2)、含有SEQ ID NO：19的氨基酸序列的重链CDR3(HC
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CDR3)、含有SEQ ID NO：20的氨基酸序列的轻链CDR1(LC
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CDR1)、含有SEQ ID NO：21的氨基酸序列的轻链CDR2(LC
‑
CDR2)和含有SEQ ID NO：22的氨基酸序列的轻链CDR3(LC
‑
CDR3)。在一些实施例中，该参考抗CD4 D1抗体包含含有SEQ ID NO：23的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：24的氨基酸序列的VL。
[0015]在根据任一个上述抗CD4 D1免疫细胞受体实施例的一些实施例中，该细胞外结构域中的CD4结合部分与该跨膜结构域直接或间接融合。在一些实施例中，该细胞外结构域中的CD4结合部分与包含该跨膜结构域的多肽非共价地结合。在一些实施例中，该细胞外结构域包含i)含有该CD4结合部分和结合对的第一成员的第一多肽；和ii)含有该结合对的第二成员的第二多肽，其中该第一成员和该第二成员彼此结合，并且其中该第二成员与该跨膜结构域直接或间接融合。
[0016]在根据任一个上述抗CD4 D1免疫细胞受体实施例的一些实施例中，该免疫细胞受体是单特异性的。
[0017]在根据任一个上述抗CD4 D1免疫细胞受体实施例的一些实施例中，该免疫细胞受体是多本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗CD4免疫细胞受体，其包含细胞外结构域、跨膜结构域和细胞内信号传导结构域，该细胞外结构域包含与CD4的结构域1(“D1”)内的表位特异性结合的CD4结合部分(“抗CD4 D1部分”)。2.如权利要求1所述的抗CD4免疫细胞受体，其中：(i)该CD4结合部分与参考抗体竞争结合，该参考抗体与CD4的D1内的表位特异性结合(“抗CD4 D1抗体”)；(ii)该CD4结合部分与CD4的D1中的表位结合，该表位与参考抗CD4 D1抗体的结合表位重叠；(iii)该CD4结合部分包含与参考抗CD4 D1抗体相同的重链和轻链CDR序列；和/或(iv)该CD4结合部分包含与参考抗CD4 D1抗体相同的重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)序列。3.如权利要求2所述的抗CD4免疫细胞受体，其中该参考抗CD4 D1抗体包含：(i)含有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的重链CDR1(HC
‑
CDR1)、含有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的重链CDR2(HC
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CDR2)、含有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的重链CDR3(HC
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CDR3)、含有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的轻链CDR1(LC
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CDR1)、含有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的轻链CDR2(LC
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CDR2)和含有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的轻链CDR3(LC
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CDR3)；(ii)含有SEQ ID NO：9的氨基酸序列的HC
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CDR1、含有SEQ ID NO：10的氨基酸序列的HC
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CDR2、含有SEQ ID NO：11的氨基酸序列的HC
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CDR3、含有SEQ ID NO：12的氨基酸序列的LC
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CDR1、含有SEQ ID NO：13的氨基酸序列的LC
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CDR2和含有SEQ ID NO：14的氨基酸序列的LC
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CDR3；或(iii)含有SEQ ID NO：17的氨基酸序列的HC
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CDR1、含有SEQ ID NO：18的氨基酸序列的HC
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CDR2、含有SEQ ID NO：19的氨基酸序列的HC
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CDR3、含有SEQ ID NO：20的氨基酸序列的LC
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CDR1、含有SEQ ID NO：21的氨基酸序列的LC
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CDR2和含有SEQ ID NO：22的氨基酸序列的LC
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CDR3。4.如权利要求3所述的抗CD4免疫细胞受体，其中该参考抗CD4 D1抗体包含：(i)含有SEQ ID NO：7的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：8的氨基酸序列的VL；(ii)含有SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：16的氨基酸序列的VL；或(iii)含有SEQ ID NO：23的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：24的氨基酸序列的VL。5.一种抗CD4免疫细胞受体，其包含细胞外结构域、跨膜结构域和细胞内信号传导结构域，该细胞外结构域包含与CD4的结构域2(“D2”)和/或结构域3(“D3”)内的表位特异性结合的CD4结合部分(“抗CD4 D2/D3部分”)。6.如权利要求5所述的抗CD4免疫细胞受体，其中：(i)该CD4结合部分与参考抗体竞争结合，该参考抗体与CD4的D2和/或D3内的表位特异性结合(“抗CD4 D2/D3抗体”)；(ii)该CD4结合部分与CD4的D2和/或D3内的表位结合，该表位与参考抗CD4 D2/D3抗体的结合表位重叠；(iii)该CD4结合部分包含与参考抗CD4 D2/D3抗体相同的重链和轻链CDR序列；和/或(iv)该CD4结合部分包含与参考抗CD4 D2/D3抗体相同的VH和VL序列。7.如权利要求6所述的抗CD4免疫细胞受体，其中该参考抗CD4 D2/D3抗体包含：
(i)含有SEQ ID NO：25的氨基酸序列的HC
‑
CDR1、含有SEQ ID NO：26的氨基酸序列的HC
‑
CDR2、含有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的HC
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CDR3、含有SEQ ID NO：28的氨基酸序列的LC
‑
CDR1、含有SEQ ID NO：29的氨基酸序列的LC
‑
CDR2和含有SEQ ID NO：30的氨基酸序列的LC
‑
CDR3；(ii)含有SEQ ID NO：46的氨基酸序列的HC
‑
CDR1、含有SEQ ID NO：47的氨基酸序列的HC
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CDR2、含有SEQ ID NO：48的氨基酸序列的HC
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CDR3、含有SEQ ID NO：49的氨基酸序列的LC
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CDR1、含有SEQ ID NO：50的氨基酸序列的LC
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CDR2和含有SEQ ID NO：51的氨基酸序列的LC
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CDR3；或(iii)含有SEQ ID NO：55的氨基酸序列的HC
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CDR1、含有SEQ ID NO：56的氨基酸序列的HC
‑
CDR2、含有SEQ ID NO：57的氨基酸序列的HC
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CDR3、含有SEQ ID NO：58的氨基酸序列的LC
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CDR1、含有SEQ ID NO：59的氨基酸序列的LC
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CDR2和含有SEQ ID NO：60的氨基酸序列的LC
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CDR3。8.如权利要求7所述的抗CD4免疫细胞受体，其中该参考抗CD4 D2/D3抗体包含：(i)含有SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：32的氨基酸序列的VL；(ii)含有SEQ ID NO：52的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：53的氨基酸序列的VL；或(iii)含有SEQ ID NO：61的氨基酸序列的VH和含有SEQ ID NO：62的氨基酸序列的VL。9.如权利要求1
‑
8中任一项所述的抗CD4免疫细胞受体，其中该CD4结合部分是单域抗体(sdAb)、scFv、Fab
’
、(Fab
’
)2、Fv或肽配体。10.如权利要求1
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9中任一项所述的抗CD4免疫细胞受体，其中：(i)该细胞外结构域中的CD4结合部分与该跨膜结构域直接或间接融合；(ii)该细胞外结构域中的CD4结合部分与包含该跨膜结构域的多肽非共价地结合；或(iii)该细胞外结构域包含i)含有该CD4结合部分和结合对的第一成员的第一多肽；和ii)含有该结合对的第二成员的第二多肽，其中该第一成员和该第二成员彼此结合，并且其中该第二成员与该跨膜结构域直接或间接融合。11.如权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：曾明，陈丽丽，刘勋，
申请(专利权)人：南京传奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：