一步法合成pH响应型的靶向透明质酸-鬼臼毒素前药胶束及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种一步法合成pH响应的靶向透明质酸

【技术实现步骤摘要】
一步法合成pH响应型的靶向透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束及其应用


[0001]本专利技术公开了一种一步法合成pH响应型的靶向透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束及其应用，属于新型纳米药物载体


技术介绍

[0002]癌症仍然是世界范围内严重危害人类健康的重大疾病之一。尽管临床上有多种癌症治疗方法，但化疗一直是治疗恶性肿瘤最常用的方法之一。然而，目前化疗药物由于水溶性差、非靶向性、不可控释放、血液清除速率快、给药剂量大及严重的毒副作用等问题，限制了其在肿瘤化疗中的应用。在过去的几十年里，为了改善化疗的疗效，科学家们在开发聚合物前药方面做了大量的工作。聚合物前药是通过将疏水性药物与聚合物共价连接而成，并在水溶液中自组装形成具有疏水内核和亲水外壳的胶束。聚合物前药胶束不仅可以提高疏水性药物的水溶性、生物相容性和生物利用度，还可以延长其血液循环时间。此外，纳米级结构的胶束使它们能够通过高通透性和滞留效应(EPR)在肿瘤中积累。然而，聚合物前药胶束的被动靶向递送和不可控的药物释放往往导致疗效不佳，从而限制了他们的临床应用。因此，开发能够特异性靶向肿瘤并能可控释放药物的“智能”聚合物前药胶束对于提高癌症治疗效果至关重要。
[0003]为了实现可控的药物释放，利用肿瘤微环境的特异性(如pH、氧化还原、温度、特殊气体和酶)，人们研究并开发了多种多样的刺激敏感型聚合物前药胶束。尤其是利用正常组织和肿瘤组织中pH值的差异(前者pH值约为7.4，而后者则为4.5～6.5)，开发的pH响应型前药胶束在药物控释方面备受关注。此外，具有肿瘤主动靶向的聚合物前药用于特异性药物递送也成为人们研究的热点。透明质酸(HA)是一种天然的糖胺聚糖，在关节软骨、皮肤真皮等多种组织中含量丰富，具有优良的生物相容性、生物降解性和低免疫原性。HA可以特异性靶向CD44过表达的肿瘤细胞。近年来越来越多地研究关注在具有pH敏感的HA靶向前药胶束。尽管基于pH敏感的HA前药胶束在癌症治疗方面取得了极大进展，但前药胶束的合成过程繁琐，由此限制了他们的大规模生产和应用。因此，通过简单的合成步骤来构建肿瘤靶向和pH敏感的前药胶束用于癌症治疗显得尤为重要。
[0004]鬼臼毒素主要来源于小檗科的鬼臼属、八角莲属和山荷叶属等植物的根或茎，是一种具有天然活性的木质素类化合物。鬼臼毒素具有显著的抗肿瘤活性，可逆结合微管蛋白，抑制微管蛋白的合成以抑制细胞的有丝分裂活动，实现细胞增殖的抑制进而实现抗肿瘤活性。但因其水溶性差、毒副作用严重、体内代谢时间短等缺点，成为其临床应用的关键瓶颈。
[0005]本专利技术通过一步法合成了具有靶向的pH响应型的透明质酸
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鬼臼毒素前药(HA
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CO
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O
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PPT)，可在水中自组装形成胶束，用于肿瘤治疗，为聚合物前药向临床应用转化提供了极大可能。

技术实现思路

[0006]为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本专利技术的目的在于提供一种一步法合成pH响应型的靶向透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束及应用。
[0007]本专利技术的技术方案如下：
[0008]一步法合成pH响应型的靶向透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束的方法，步骤如下：
[0009]将透明质酸溶于甲酰胺和N,N
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二甲基甲酰胺混合溶液中，然后加入缩合剂二环己基碳二亚胺(DCC)和催化剂4
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二甲氨基吡啶(DMAP)，该反应在冰浴中反应1
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2小时以活化透明质酸的羧基，得到透明质酸溶液；随后将鬼臼毒素(PPT)溶于N,N
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二甲基甲酰胺中，形成的溶液再缓慢滴加至上述透明质酸溶液中，混合物在25℃下反应24
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72小时，反应结束后，将所得混合物放入透析袋中用去离子水透析；最后，将溶液过滤，冻干，以获得透明质酸
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鬼臼毒素前药；将透明质酸
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鬼臼毒素前药溶解在超纯水中，超声处理10
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20分钟，使其均匀分散，静置3
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6小时，即得透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束。
[0010]优选地，所述透明质酸分子量为3000
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10000Da。
[0011]优选地，所述透析袋截留分子量为1000
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2000Da。
[0012]优选地，所述甲酰胺和N,N
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二甲基甲酰胺的体积比为0.5:1
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1:1。
[0013]优选地，所述透明质酸和二环己基碳二亚胺、4
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二甲氨基吡啶摩尔比为1:0.5:0.2
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1:1.2:1。
[0014]优选地，所述透明质酸和鬼臼毒素的摩尔比为1:1
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1:30。
[0015]优选地，所述缓慢滴加的速率为60
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120滴/分钟。
[0016]优选地，将所得混合物放入透析袋中用去离子水透析48
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72小时，每3
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12小时更换去离子水。
[0017]本专利技术同时请求保护上述方法制备得到的透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束。
[0018]本专利技术同时还请求保护上述透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束在制备治疗癌症药物中的应用，所述癌症为乳腺癌、肺癌或肝癌。
[0019]本专利技术从透明质酸和鬼臼毒素为原料出发，以二环己基碳二亚胺为缩合剂、4
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二甲氨基吡啶为催化剂通过缩合反应，一步法获得含酯键的两亲性透明质酸
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鬼臼毒素前药(HA
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CO
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O
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PPT)。该前药可在水溶液中自组装形成胶束，具有好的血液相容性，适用于静脉注射，并能靶向递送至肿瘤部位，在低pH环境下酯键发生断裂而释放药物，实现了高效、安全的药物递送和可控的药物释放。
[0020]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
[0021]1.本专利技术采用一步法将透明质酸和鬼臼毒素进行耦合制备透明质酸
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鬼臼毒素前药，合成方法简单，易于工业化。
[0022]2.本专利技术合成的透明质酸
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鬼臼毒素前药提高了鬼臼毒素的水溶性、生物相容性和血液循环时间。
[0023]3.本专利技术通过酯键将透明质酸和鬼臼毒素进行连接，具有肿瘤微环境的pH敏感性，透明质酸介导的肿瘤靶向性，实现了高效的药物递送和可控释放药物，高效的抗肿瘤效果，为其向临床应用的转化提供了极大可能，具有广阔的应用前景。
附图说明
[0024]图1为透明质酸
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鬼臼毒素前药的合成步骤；
[0025]图2为实施例5所制备的透明质酸
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鬼臼毒素前药的FT
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IR谱图；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一步法合成pH响应型的靶向透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束的方法，其特征在于，步骤如下：将透明质酸溶于甲酰胺和N,N
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二甲基甲酰胺混合溶液中，然后加入缩合剂二环己基碳二亚胺和催化剂4
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二甲氨基吡啶，在冰浴中反应1
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2小时，得到透明质酸溶液；随后将鬼臼毒素溶于N,N
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二甲基甲酰胺中，滴加至上述透明质酸溶液中，在25℃下反应24
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72小时，反应结束后，将所得混合物放入透析袋中用去离子水透析；最后，将溶液过滤，冻干，获得透明质酸
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鬼臼毒素前药；将透明质酸
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鬼臼毒素前药溶解在超纯水中，超声处理10
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20分钟，静置3
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6小时，即得透明质酸
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鬼臼毒素前药胶束。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的透明质酸分子量为3000
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10000Da；所述透析袋截留分子量为1000
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2000Da。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的甲酰胺和N,N

【专利技术属性】
技术研发人员：张树彪，李敏，赵轶男，孙姣，林可心，刘占彪，
申请(专利权)人：大连民族大学，
类型：发明
国别省市：