用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜制造技术

本实用新型专利技术公开了用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜，包含一圆形的透明薄膜，薄膜的表面设有胶粘层，薄膜上形成一由多根横向线和多根纵向线垂直相交而形成的网格区，网格区包含多个用于布置菌种的格子。薄膜可以通过胶粘层粘贴在器皿上，其自带了网格区，无须实验员在器皿上手绘网格，避免了培养皿被污染。只需要将薄膜粘贴到器皿上，省时省力，网格也不会被无意擦掉，有效地防止了网格线段模糊。本实施方式的薄膜大大缩短了实验时间，能够提高实验效率，有效的减少时间成本，减少实验划线中人为造成的不良实验因素，提高了实验可重复性。实验可重复性。实验可重复性。

【技术实现步骤摘要】
用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜


[0001]本技术涉及生物医药领域，特别涉及一种用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜。

技术介绍

[0002]大肠杆菌表达系统的工程菌含有表达目的蛋白的表达质粒，随着传代代次的提高，可能有部分大肠杆菌丢失了质粒，失去了抗生素抗性基因，也同时失去表达目的蛋白的能力。为了便于筛选，质粒上一般带有抗生素抗性基因，在一定浓度的抗生素环境下(如种子培养液)，质粒丢失后菌体便不能存活，而在不含抗生素的发酵培养液中，菌体可以正常生长。在实验过程中通过比较在含有或不含抗生素培养基的菌体存活数，可以检测质粒的丢失率，从而对质粒稳定性进行一个评价。
[0003]实际操作中一般用模拟发酵或发酵过程实时收集的发酵液，包括最后阶段(传代最多代次)的收集液，经过适当稀释后涂布于不含抗生素的培养基上，置37℃培养过夜；挑取不少于100个单菌落，分别接种到含抗生素和不含抗生素的培养皿中，置37℃培养过夜。比较两者差异，一般应重复2次以上，通过计算质粒在含抗生素的培养皿数目与不含抗生素的培养皿的数目比值，计算质粒的丢失率。
[0004]目前在实验室通用的方法是通过记号笔和直尺在培养皿的底部，手动的绘制10
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10小格子，将菌种接种到培养皿，在37℃培养过夜。再对细菌菌落数的进行统计。手动绘制过程中长时间与培养皿接触，直尺及记号笔上携带其他杂菌易污染培养皿，易造成污染，影响实验结果。用直尺和记号手动的笔绘制网格，耗时过长，且效率低。手动绘制网格不够精准，过程中易碰到，出现线段模糊，影响结果判断，不利于重复实验。

技术实现思路

[0005]为解决现有技术的至少一个问题，本公开提供一种用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜。
[0006]用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜，包含一圆形的透明薄膜，薄膜的表面设有胶粘层，薄膜上形成一由多根横向线和多根纵向线垂直相交而形成的网格区，网格区包含多个用于布置菌种的格子。
[0007]薄膜可以通过胶粘层粘贴在器皿上，其自带了网格区，无须实验员在器皿上手绘网格，避免了培养皿被污染。只需要将薄膜粘贴到器皿上，省时省力，网格也不会被无意擦掉，有效地防止了网格线段模糊。本实施方式的薄膜大大缩短了实验时间，能够提高实验效率，有效的减少时间成本，减少实验划线中人为造成的不良实验因素，提高了实验可重复性。
[0008]在一些实施方式中，格子至少有100个。可以满足至少100个菌落的培养。
[0009]在一些实施方式中，网格区的格子数量为10
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10个。
[0010]在一些实施方式中，网格区呈正方形，每个格子也为正方形。
[0011]在一些实施方式中，薄膜的直径为110mm、90mm或60mm。与常见的实验培养皿的直径相一致。
[0012]在一些实施方式中，网格区内接于薄膜的圆形边缘。
[0013]在一些实施方式中，胶粘层的表面设有离型膜。离型膜用于保护胶粘层。
[0014]在一些实施方式中，横向线和纵向线以打印的方式形成于薄膜的表面。打印效率高，线条清晰和准确。
附图说明
[0015]图1示意性地显示了本公开一实施例的用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜的示意图。
[0016]图2示意性地显示了本公开一实施例的用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜厚度方向的结构示意图。
[0017]图3示意性地显示了本公开一实施例的用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜使用状态下的俯视图。
[0018]符号说明：
[0019]薄膜1、胶粘层2、横向线3、纵向线4、网格区5、格子6、培养皿7、菌种8、离型膜9
具体实施方式
[0020]请参考图1和图2，用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜，包含一圆形的透明薄膜1，薄膜1的表面设有胶粘层2，薄膜1上形成一由多根横向线3和多根纵向线4垂直相交而形成的网格区5，网格区5包含多个用于布置菌种8的格子6。
[0021]请参考图3，本公开的薄膜1通过胶粘层2被粘贴到培养皿7的外侧底部，透过培养皿7的底部可以观察到薄膜1上的横向线3和纵向线4。在培养皿7上的每个格子6所对应的位置分别接种一个菌种8，然后在37℃培养过夜后，再对培养皿7的细菌菌落数的进行统计，计算质粒的丢失率。
[0022]一般而言，培养菌落是在圆形的培养皿7中进行的。本公开的薄膜1呈圆形，与圆形的培养皿7形状相匹配。进一步地，薄膜1的直径为110mm、90mm或60mm，这些尺寸与常规的实验培养皿7的直径一致。薄膜1及格子6的尺寸可根据培养皿7尺寸选择相应的尺寸。薄膜1是透明的，可在显微镜下观察到薄膜1表面的菌落。
[0023]本公开的塑料透明薄膜1，操作方便，可直接粘贴在培养皿7的底部，不需要手工绘制网格，缩短了实验时间，提高实验效率，有效的减少时间成本，也避免了其他细菌的污染。此外，还减少了实验划线中的人为造成的不良实验因素，增加了实验可重复性。将薄膜1贴到培养皿7上后，可提前借助紫外照射消杀细菌，节省了时间，加快了实验进程。
[0024]进一步地，格子6至少有100个。每个格子6接种一个菌种8，可产生至少100个菌落样品，满足质粒丢失率实验菌落统计所需的样本数。
[0025]进一步地，网格区5的格子6数目为10
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10个。网格区5呈正方形，每个格子6也呈正方形。网格区5内接于薄膜1的圆形边缘，即网格区5的四个顶点位于薄膜1的圆形边缘上，可使薄膜1的面积利用最大化。
[0026]胶粘层2的表面设有离型膜9。离型膜9的作用是保护胶粘层2，防止胶粘层2被污
染。在实验操作时，实验员只需剥去离型膜9，再将薄膜1粘贴在培养皿7的底部。
[0027]横向线3和纵向线4以打印的方式形成于薄膜1的表面，具体的，横向线和纵向线打印在胶粘层相对的表面。打印得到的线条清晰和准确，不容易擦除，且薄膜1制备效率高。
[0028]以上所述的仅是本技术的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本技术创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本技术的保护范围。
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜，其特征在于，包含一圆形的透明薄膜，所述薄膜的表面设有胶粘层，所述薄膜上形成一由多根横向线和多根纵向线垂直相交而形成的网格区，所述网格区包含多个用于布置菌种的格子。2.根据权利要求1所述的用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜，其特征在于，所述格子至少有100个。3.根据权利要求1或2所述的用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜，其特征在于，所述网格区的格子数量为10
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10个。4.根据权利要求1或2所述的用于质粒丢失率实验菌落统计带粘性塑料薄膜，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙振华，邢瑞，王璐，王鑫，
申请(专利权)人：江苏普瑞康生物医药科技有限公司，
类型：新型
国别省市：