抑制GALNT4基因表达在慢性炎症引起的心血管疾病预防与治疗药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于医学技术领域，公开了抑制GALNT4基因表达在慢性炎症引起的心血管疾病预防与治疗药物中的应用。根据上述应用，本发明专利技术发现下调GALNT4基因表达，能够减低单核细胞表面β2整合素表达，进而抑制单核细胞的粘附及趋化能力，并能减少IL

【技术实现步骤摘要】
抑制GALNT4基因表达在慢性炎症引起的心血管疾病预防与治疗药物中的应用


[0001]本专利技术属于慢性炎症引起的心血管疾病的治疗药物
，具体涉及抑制GALNT4表达在制备治疗或预防慢性炎症引起的心血管疾病的药物中的应用。

技术介绍

[0002]单核
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巨噬细胞系统功能失调及过度活化在很多疾病早期发生、进展及不稳定斑块形成中发挥重要作用。其中包括高脂、炎症等不良刺激促进血管壁募集单核细胞，单核细胞分化为M1型巨噬细胞进而分泌IL
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6、TNF
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α等炎症因子；炎症微环境诱导内皮细胞、平滑肌细胞凋亡或坏死；单核/巨噬细胞吞噬脂质类物质转化成泡沫细胞，形成不稳定性斑块。因此，有效遏制单核细胞活化，对早期防治动脉粥样硬化具有重要意义。
[0003]蛋白质糖基化是一种主要的蛋白翻译后修饰，参与蛋白功能调控，同时引起相关信号传导通路改变，在细胞、组织分化、发育和许多生物功能以及肿瘤、炎症免疫等疾病中发挥关键作用。其主要分为三种亚型：N
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糖基化、O
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糖基化和糖胺聚糖。在这几种亚型中，研究较少的O
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N乙酰氨基半乳糖参与O
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糖链的起始合成，由多肽乙酰半乳糖氨基转移酶(pp
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GalNAc
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Ts，GALNTs)催化N
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乙酰氨基半乳糖连接到丝/苏氨酸残基上形成Tn抗原，迄今为止发现该过程可被20种同工酶所调控。
[0004]现有技术中，显示多种GALNTs同工酶功能失调与癌症发生相关，例如：
[0005]参考文献：Polypeptide N
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acetylgalactos
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aminyltransferase(GALNT；GalNac
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T)(Gill,D.J.et al，Institute of Molecular and Cell Biology，2013)，公开了小鼠试验研究表明抑制GALNT有助于治疗癌症。
[0006]参考文献：GALNT14对人乳腺癌MCF
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7细胞迁移的影响(吴琛等，中国生物工程杂志，2012)，公开了将GALNT14导入乳腺癌细胞中，检测GALNT14对MMP
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2、MMP
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9、TGF
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β1及VEGF等肿瘤浸润转移相关因子表达的影响，结果显示GALNT14可明显促进乳腺癌细胞的迁移，在肿瘤侵袭转移中起重要作用。
[0007]参考文献：GALNT4 Predicts Clinical Outcome in Patients with Clear Cell Renal Cell Carcinoma(Liu,Yidonget al，The Journal of Urology，2014)，公开了GALNT4与肾细胞癌的关系，结果显示瘤内GALNT4的表达明显低于瘤周表达。
[0008]参考文献：MiR
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4262promotes cell apoptosis and inhibits proliferation of colon cancer cells:involvement of GALNT4(Li Weng et al，American Journal of Translational Research，2018)，公开了采用miR
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4262和GALNT4 siRNA处理细胞时，细胞活力明显下降。即异常表达的miR
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4262可能通过GALNT4影响人类结肠癌细胞的凋亡和增殖，GALNT4很可能是结肠癌的治疗靶点。
[0009]也有多种GALNTs同工酶功能失调与心血管疾病发生相关，例如GALNT2参与脂质及糖代谢过程，其功能失调与糖尿病、高脂血症的发生相关；冠心病人群外周血白细胞内GALNT3表达下降，敲低内皮细胞内GALNT3表达可通过P38/MAPK通路诱导自身凋亡；敲除
GALNT1基因后，小鼠体内白细胞免疫功能缺损，粘附、聚集能力减弱。全基因组研究发现GALNT4基因V506I位点基因多态性与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome，ACS)的患病率相关。参考文献：人GALNT4基因慢病毒载体的构建与鉴定(郭利伟等，中国循环杂志，2014)，公开了构建GALNT4基因慢病毒载体的方法，并成功构建了可以在单核细胞内过表达的GALNT4基因慢病毒载体。其中，只是泛泛的提到了该表达载体可以为GALNT4基因在冠心病发生中的作用和分子机制奠定基础，但事实上并未公开GALNT4基因与冠心病之间是否有关系，有什么关系及如何通过GALNT4来治疗冠心病。
[0010]综上，现有技术中，关于GALNT4只公开了其与癌症或ACS的发生有关，其与心血管疾病以及慢性炎症性疾病是否有关系，有什么关系并未公开。

技术实现思路

[0011]为弥补现有技术中的不足，本专利技术确定了GALNT4作为慢性炎症引起的心血管疾病的诊断标志物，同时通过实验验证单核细胞表面整合素的表达水平、单核细胞与内皮细胞间粘附能力或者单核细胞中Akt和/或mTOR磷酸化蛋白的表达水平的影响。具体的，本专利技术的技术方案如下：
[0012]本专利技术的第一方面，提供了抑制GALNT4表达在慢性炎症引起的心血管疾病预防与治疗药物中的应用。
[0013]所述的心血管疾病为慢性炎症引起的糖尿病、冠心病、心肌炎、心包炎或动脉粥样硬化。
[0014]本专利技术的第二方面，提供了降低单核细胞表面整合素表达水平的试剂在慢性炎症引起的心血管疾病预防与治疗药物中的应用。
[0015]优选的，所述的整合素为β2整合素。进一步优选为CD11a、CD11b、CD11c或αdβ2。
[0016]在本专利技术的一个具体实施方式中，所述的整合素β2整合素CD11b。
[0017]本专利技术的第三方面，提供了抑制GALNT4表达的产品在降低单核细胞与内皮细胞间粘附能力或者降低单核细胞中Akt和/或mTOR磷酸化蛋白的表达水平中的应用。
[0018]本专利技术的第四方面，提供了降低单核细胞表面整合素表达水平的试剂在降低单核细胞中Akt和/或mTOR磷酸化蛋白的表达水平中的应用。
[0019]优选的，所述的整合素为β2整合素。进一步优选为CD11a、CD11b、CD11c或αdβ2。
[0020]在本专利技术的一个具体实施方式中，所述的整合素β2整合素CD11b。
[0021]本专利技术的第五方面，提供了一种降低单核细胞表面整合素的表达水平、降低单核细胞与内皮细胞间粘附能力或者降低单核细胞中Akt和/或mTOR磷酸化蛋白的表达水平的方法，所述的方法包括抑制GALNT4的表达。
[0022]优选的，所述的整合素为β2整合素。进一步优选为CD11a、CD11b、CD11c或αdβ2。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抑制GALNT4基因表达在慢性炎症引起的心血管疾病预防与治疗药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的心血管疾病为慢性炎症引起的糖尿病、冠心病、心肌炎、心包炎或动脉粥样硬化。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抑制GALNT4基因表达采用敲除GALNT4基因所用的试剂、抑制GALNT4表达所用的试剂或者抑制GALNT4蛋白活性的试剂。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述敲除GALNT4基因所用的试剂包括CRISPR/CAS9系统、随机插入...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄榕翀，叶智帅，郭宏洲，杨春，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京友谊医院，
类型：发明
国别省市：