一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌及其在猕猴桃贮藏中的应用制造技术

一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌及其在猕猴桃贮藏中的应用，生防菌Pan.vagans BWL1，已于2021年1月4日保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号为CCTCC NO：M2021001。本发明专利技术筛选得到一株生防菌Pan.vagans BWL1，能够高效拮抗青霉菌和灰霉菌。菌。菌。

【技术实现步骤摘要】
一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌及其在猕猴桃贮藏中的应用


[0001]本专利技术涉及一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌及其在猕猴桃贮藏中的应用，属于农产品贮藏


技术介绍

[0002]猕猴桃原产我国，因具有极高含量的维生素C而被称为“VC之王”、“水果之王”，并且其果肉清香，水分丰富，食之酸甜可口，深受人们喜爱。然而，猕猴桃采后贮藏期间极易遭受病原菌侵染，据统计，全球每年猕猴桃因采后腐烂而造成的损失高达20
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30％，给猕猴桃产业带来巨大的经济损失，极大地限制了该产业的快速发展。
[0003]引起猕猴桃采后腐烂的真菌病害主要有灰霉病和青霉病等。灰霉病(Botrytis cinerea)是猕猴桃上最重要的采后病害，其入侵方式多样，菌丝体、孢子或者菌核可在不利环境中长时间存活，遇到适宜环境即快速生长。青霉病由扩展青霉(Penicillium expansum)侵染引起，不仅会导致猕猴桃果实腐烂，而且会产生对人体有毒的棒曲霉素，危及食品安全。
[0004]目前猕猴桃采后贮藏保鲜的传统方法主要是低温贮藏，通过低温降低水果的呼吸作用从而达到“休眠”状态，降低猕猴桃的腐烂，延长保藏期。但青霉和灰霉孢子可以在冰点以上的温度长期存活，因此低温贮藏无法解决猕猴桃采后青霉和灰霉污染问题。化学抑菌剂，如 1
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甲基环丙烯(1
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MCP)等，在猕猴桃贮藏保鲜上得到了广泛的应用，显著延长了猕猴桃的贮藏时间和货架期；然而，经1
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MCP处理和长期低温贮藏的猕猴桃在出库后，果实在货架期经常出现不能正常后熟软化，固有风味淡和食用品质严重下降的问题，甚至还出现果实烂而不软的“僵尸果”现象，均对猕猴桃的销售和商品性造成极大的影响。同时，化学抑菌剂不仅污染环境，而且容易残留，对人体健康具有潜在威胁，并且长期使用，可能会导致耐药菌株的出现。
[0005]生防菌(英文名称biocontrol bacteria)，指的是那些有益微生物，主要有细菌、真菌、放线菌等，杀灭或压低病原生物数量以控制植物病害发生、发展的一类措施；其实质就是利用微生物种间或种内的抗生、竞争、重寄生、溶菌作用，或者通过微生物代谢产物诱导植物抗病性等，来抑制某些病原物的存活和活动。生防菌对人畜无毒、对环境有良好的兼容性，利用生物防治作用，采用安全高效的拮抗菌杀菌剂是一种“绿色防腐”技术，其应用于猕猴桃贮藏保鲜将具有重要意义和商业价值。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌及其在猕猴桃贮藏中的应用。
[0007]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供的技术方案是：一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌Pan.vagans BWL1，已于2021年1月4日保藏于中国典型培养物保藏中
心 (CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M2021001。
[0008]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供的技术方案是：一种生防菌Pan.vagansBWL1的微生物制剂，其特征在于：所述生防菌Pan.vagans BWL1的微生物制剂的生防菌 Pan.vagans BWL1的活菌数大于或等于108CFU/mL。
[0009]优选的技术方案为：制备方法包括：
[0010]步骤1：将生防菌Pan.vagans BWL1接种于LB培养基后于23
‑
27℃摇床中培养12
‑
18h；
[0011]步骤2：按体积百分比5
‑
10％，将步骤1得到的菌液接种于新的LB培养基进行扩大培养；
[0012]步骤3：对步骤2的培养物以5000
‑
7000
×
g离心4
‑
6min，弃上清，然后加入1/5体积的磷酸盐缓冲液重悬浮；
[0013]步骤4：加入羧甲基纤维素钠、糊精和海藻酸钠，搅拌均匀后真空低温干燥，粉碎并且过300目筛后即得生防菌Pan.vagans BWL1的微生物制剂。
[0014]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供的技术方案是：一种猕猴桃贮藏的方法，由权利要求2制得的生防菌Pan.vagans BWL1的微生物制剂稀释得到的菌液作用于猕猴桃的外表面。
[0015]优选的技术方案为：生防菌Pan.vagans BWL1的微生物制剂与猕猴桃的质量比为10： 40000
‑
60000。
[0016]优选的技术方案为：向生防菌Pan.vagans BWL1的微生物制剂添加其体积的20
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30倍的水，溶解后喷洒于猕猴桃上。
[0017]优选的技术方案为：向生防菌Pan.vagans BWL1的微生物制剂添加其体积的20
‑
30倍的水，将猕猴桃浸没后，再取出。
[0018]由于上述技术方案运用，本专利技术与现有技术相比具有的优点是：
[0019]1、本专利技术筛选得到一株生防菌Pan.vagans BWL1，能够高效拮抗青霉菌和灰霉菌。
[0020]2、由生防菌Pan.vagans BWL1制得的生物菌剂可以延长猕猴桃的贮藏时间。
附图说明
[0021]图1为Pan.vagansBWL1的形态照片。
[0022]图2为Pan.vagansBWL1对青霉菌和灰霉菌的抑菌效果。
[0023]图3为Pan.vagansBWL1对青霉菌的孢子萌发、芽管伸长的抑制作用。
[0024]图4为Pan.vagansBWL1对灰霉菌的孢子萌发、芽管伸长的抑制作用。
[0025]图5为Pan.vagansBWL1对猕猴桃青霉病的抑制效果。
[0026]图6为Pan.vagansBWL1对猕猴桃灰霉病的抑制效果。
[0027]图7为Pan.vagansBWL1对猕猴桃青霉病自然发病的抑制效果。
[0028]图8为Pan.vagansBWL1对猕猴桃灰霉病自然发病的抑制效果。
具体实施方式
[0029]以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本实施例所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效。
[0030]实施例1：一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌及其在猕猴桃贮藏中的应用
[0031]一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌Pan.vagans BWL1，已于2021年1月4日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内，保藏编号为CCTCC NO：M2021001。生防菌Pan.vagans BWL1分离自健康柑橘果实表面，是果实习居菌，采用平板对峙法，发现生防菌Pan.vagans BWL1对青霉菌和灰霉菌均具有抑制作用。生防菌Pan.vagans BWL1分离、筛选、鉴定方法如下。
[0032](1)拮抗菌的分离
[0033]取市售健康柑橘，放入已灭菌的500m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株高效拮抗青霉菌和灰霉菌的生防菌Pan. vagans BWL1，已于2021年1月4日保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号为CCTCC NO：M2021001。2.一种生防菌Pan. vagans BWL1的微生物制剂，其特征在于：所述生防菌Pan. vagans BWL1的微生物制剂的生防菌Pan. vagans BWL1的活菌数大于或等于108CFU/mL。3.根据权利要求2所述的生防菌Pan. vagans BWL1的微生物制剂，其特征在于：制备方法包括：步骤1：将生防菌Pan. vagans BWL1接种于LB培养基后于23
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27 ℃摇床中培养12
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18h；步骤2：按体积百分比5
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10%，将步骤1得到的菌液接种于新的LB培养基进行扩大培养；步骤3：对步骤2的培养物以5000
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7000
×
g离心4
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6mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：张丹凤，毕婉玲，马志桃，叶应旺，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：