一种改善茶多酚茶多糖溶解性的方法及所制备复合物与应用技术

本发明专利技术涉及一种改善茶多酚茶多糖溶解性的方法及所制备复合物与应用，属于植物化学技术领域，本发明专利技术首次从普洱熟茶中分离纯化得到一种茶多糖，该化合物结构新颖，具有生物活性，尤其是较好的降糖活性，为进一步研究药用茶多糖提供重要的启示，可用于降糖药物的研发制备。本发明专利技术还提供了茶多酚改善高聚茶多糖溶解性的方法，通过多糖

【技术实现步骤摘要】
一种改善茶多酚茶多糖溶解性的方法及所制备复合物与应用


[0001]本专利技术涉及植物化学功能性成分的溶解
，更具体地，涉及一种茶多糖的提取纯化与改善茶多酚茶多糖溶解性的方法。

技术介绍

[0002]普洱茶以云南特色大叶茶种制作的特殊茶类。普洱茶中含有大量的茶多糖，是茶汤的主要滋味物质之一。在茶叶中茶多糖含量在6%左右，其组成复杂，属于杂多糖复合物，由糖类、蛋白质和果胶等物质所组成，是具有生物活性的复合多糖。
[0003]现代研究表明，茶多糖具有降脂减肥、降血压、调节免疫、抗癌等作用。茶叶中的多糖有中性多糖、酸性多糖两种，而且往往是与蛋白质紧密结合的糖蛋白复合物。目前已经通过动物体内模型试验证明茶多糖确有降血糖作用，主要是通过茶多糖实现清除自由基调节糖类代谢过程中关键酶活性来调节血糖水平减缓胃的倒空速度，减少葡萄糖的吸收。因此茶多糖的研究也越来越引起人们的关注。但是提取出的普洱茶多糖尤其是高聚茶多糖的水溶性差，进而影响茶多糖降糖效果。随着人们对自身健康的日益关注，研究和开发天然降血糖剂以取代化学合成的降血糖剂已是大势所趋。综上所述，如何克服高聚茶多糖难溶的技术难题是本领域技术人员亟需解决的关键技术问题。

技术实现思路

[0004]为了克服
技术介绍
中存在的问题，本专利技术提供了一种高聚茶多糖提取纯化及增溶方法，从普洱茶中提取到一种茶多糖，将其与EGCG混合，建立一种自组装复合物。通过对α
‑
葡萄糖苷酶的抑制活性实验，发现PTPs
‑
EGCG复合物比EGCG提高了1.1倍，PTPs
‑
EGCG复合物比PTPs提高了7.8倍，具有较好的降糖作用。
[0005]下述的技术方案是用来实现上述的专利技术目的：本专利技术提供的茶多糖是从云南大叶种普洱茶中分离得到的新的多糖，属于一种均一多糖，该多糖分子量≈4.59 KDa，单糖构成为鼠李糖:阿拉伯糖 = 1:7，PTPs的骨架由6个
→
2)
‑
α
‑
L
‑
Arap
‑
(3
→
为主链和1个β
‑
L
‑
Rhap
‑
(3
→
1)
‑
α
‑
L
‑
Arap的重复单元组成，其具有如下结构：该化合物命名为PTPs，其分子式为C
41
H
82
O
40
。
[0006]所述茶多糖的制备方法，具体包括以下步骤：1)普洱茶叶阴干后粉碎，过筛（40目）作为原料；2)将步骤1)放入热水萃取器中，加入超纯水，在85℃下萃取2小时，不溶物过滤后
得到水萃取物，蒸发浓缩；3)将步骤2)所得到的浓缩液用95%的乙醇沉淀，在剧烈搅拌下最终浓度为70%；室温静置过夜，离心（4000 r/min, 15 min, 0℃），得到沉淀；用热水（80℃）重新溶解沉淀物并冷却至室温；4)将步骤3)所得到溶液用Sevag试剂（正丁醇/氯仿1:4，V/V）洗涤去蛋白；最后，通过浓缩和冷冻干燥得到粗茶多糖；5)将步骤4)所得到粗茶多糖使用DEAE
‑
52柱纯化茶多糖中，用纯水清洗柱，收集洗脱液浓缩；用透析袋去除杂质如单糖和寡糖，冷冻干燥得到白色絮状物；6)将步骤5)所得到白色絮状物，使用Sephadex G
‑
100柱进一步纯化，用恒流泵和纯化水洗脱，将洗脱液收集，冷冻干燥得到纯化的茶多糖。
[0007]作为优选，步骤2)中，原料与水的质量比为1:15。
[0008]作为优选，步骤5)中，DEAE
‑
52柱选择2.9厘米
×
50厘米，透析袋为 7000 Da。
[0009]作为优选，步骤6)中，DEAE
‑
52柱选择2.9厘米
×
100厘米。
[0010]本专利技术还提供了一种茶多酚改善茶多糖溶解性方法,：将茶多糖与多酚建立自组装复合物，进而改善茶多糖的溶解性。具体包括以下步骤：向茶多糖水溶液中加入茶多酚类物质，混合搅拌均匀，即可。
[0011]进一步地，茶多糖为高聚茶多糖或上述结构的茶多糖；茶多酚类物质包含没食子儿茶素（EC）、没食子儿茶素没食子酸酯（ECG）、表没食子儿茶素(EGC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)中的一种或多种。
[0012]进一步地，茶多糖与茶多酚类物质的摩尔质量比为1:1。
[0013]20℃水溶液中茶多糖的溶解时间可从214 s提高到150 s。
[0014]本专利技术还提供了一种茶多糖
‑
多酚复合物，茶多糖与茶多酚类物质的摩尔质量比为1:1。
[0015]进一步地，茶多糖为高聚茶多糖或上述结构的茶多糖；茶多酚类物质包含没食子儿茶素（EC）、没食子儿茶素没食子酸酯（ECG）、表没食子儿茶素(EGC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)中的一种或多种。
[0016]本专利技术还提供了上述茶多糖
‑
多酚复合物在制备降糖降脂类食品或药物中的应用。
[0017]本专利技术的有益效果：(1)本专利技术首次从普洱熟茶中分离纯化得到一种茶多糖，该化合物结构新颖，具有较好的降糖作用，为进一步研究药用茶多糖提供重要的启示，可用于降糖药物的研发制备。
[0018](2)本专利技术所提供的茶多糖的增溶方法通过加入多酚类物质，通过多糖
‑
多酚的相互作用，在茶多糖与茶多酚类物质的摩尔质量比为1:1的条件下，使高聚茶多糖与多酚类物质在水溶液中形成稳定的复合物，使其溶解时间提高了。20℃水溶液中茶多糖的溶解时间可从214 s提高到150 s。
[0019](3)本专利技术所提供的茶多糖
‑
多酚复合物可应用于制备降糖类食品或药物。
附图说明
[0020]图1是茶多糖PTPs的结构式。
[0021]图2是PTPs纯品HPLC图谱。
[0022]图3是PTPs纯品PMP
‑
HPLC图谱。
[0023]图4是PTPs纯品IR图谱。
[0024]图5是PTPs纯品UV图谱。
[0025]图6是PTPs纯品NMR图谱。
[0026]图7是25℃下将800 μM PTPs滴定到800 μM EGCG的ITC图。
[0027]图8是PTPs纯品（a）与PTPs
‑
EGCG（b）溶于水中的自组装透射电镜图谱。
[0028]图9是PTPs纯品与EGCG互溶增加溶解度；（a）EGCG, PTPs和PTPs
‑
EGCG的ζ电位，（b）PTPs和PTPs
‑
EGCG的溶解度。
[0029]图10是PTPs纯品与EGCG互溶增加复合物的分散性。
[0030]图11是PTPs
‑
EGCG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种茶多糖，其特征在于：具有如下结构：该化合物命名为PTPs，其分子式为C
41
H
82
O
40
；该多糖分子量≈4.59 KDa，单糖构成为鼠李糖:阿拉伯糖 = 1:7，PTPs的骨架由6个
→
2)
‑
α
‑
L
‑
Arap
‑
(3
→
为主链和1个β
‑
L
‑
Rhap
‑
(3
→
1)
‑
α
‑
L
‑
Arap的重复单元组成。2.如权利要求1所述的一种茶多糖，其特征在于：该茶多糖是从云南大叶种普洱茶叶中分离得到的新的多糖。3.一种改善茶多糖
‑
茶多酚溶解性的方法，其特征在于：将茶多糖与多酚建立自组装复合物，进而改善茶多糖的溶解性。4.如权利要求3所述的一种改善茶多糖
‑
茶多酚溶解性的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：字成庭，盛军，王宣军，杨柳，张宁，吴以龙，孙秀丽，谢引荣，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：