一种薄层色谱的构建方法和鉴定方法及其应用技术

本发明专利技术属于中药检测技术领域，具体提供了一种薄层色谱的构建方法和鉴定方法及其应用，该薄层色谱的构建方法包括如下步骤：猫爪草供试品溶液的制备：取猫爪草供试品、水与无机酸混合，加热水解，用有机溶剂提取，得到提取液，干燥，溶解，得到供试品溶液；对供试品溶液进行薄层色谱检测，即得供试品的薄层色谱，使用上述构建方法不仅操作步骤简便，耗时短，溶剂种类且用量少，节约成本、易于推广应用；而且供试品溶液中的多种成分很好的分离，使得薄层检测中斑点分离效果好，清晰，能够显出多个斑点，使得鉴别过程更加快速方便、鉴别结果更加准确可靠。靠。靠。

【技术实现步骤摘要】
一种薄层色谱的构建方法和鉴定方法及其应用


[0001]本专利技术属于中药检测
，具体涉及一种薄层色谱的构建方法和鉴定方法及其应用。

技术介绍

[0002]猫爪草来源为毛莨科植物小毛莨Ranunculus ternatus Thunb.的干燥块根，具有清热解毒、软坚化痰、散结消肿、截疟等功效。猫爪草主要含有糖类、脂类、氨基酸、黄酮和苷类等成分，具有抗结核菌、抗肿瘤、镇咳、祛痰、消炎等临床应用。
[0003]目前，猫爪草的药典质量标准中薄层鉴别主要针对其中的氨基酸成分，但在猫爪草标煎冻干粉中难以检测，无法定性考察猫爪草成分在药材、饮片、水提物中的传递性；现有技术中，猫爪草也未检索出对配方颗粒的薄层鉴别方法，因而，无法评价猫爪草从药材、饮片到猫爪草标准汤剂冻干粉及猫爪草配方颗粒工艺过程是否稳定存在。
[0004]例如，杨志芬公开了一种猫爪草的鉴别方法，陈赤等公开了一种野生与野生抚育猫爪草药材的分析比较方法，上述两种方法仅能够对猫爪草药材进行鉴别，难以实现对猫爪草标准汤剂冻干粉、配方颗粒物质成分的定性鉴别。
[0005]因此，亟需建立一种能够同时应用于猫爪草药材、饮片、猫爪草标准汤剂冻干粉及猫爪草配方颗粒中猫爪草成分的定性鉴别方法，以作为猫爪草从药材、饮片到猫爪草标准汤剂冻干粉及猫爪草配方颗粒工艺过程稳定性的定性评价方法之一。

技术实现思路

[0006]因此，本专利技术的目的在于解决现有技术中的方法无法同时应用于鉴定猫爪草药材、饮片和猫爪草药物制剂中猫爪草成分的问题。
[0007]为此，本专利技术提供了一种薄层色谱的构建方法，包括如下步骤：
[0008]猫爪草供试品溶液的制备：取猫爪草供试品、水与无机酸混合，加热水解，用有机溶剂提取，得到提取液，干燥，溶解，得到供试品溶液；
[0009]对供试品溶液进行薄层色谱检测，即得供试品的薄层色谱。
[0010]所述薄层色谱检测包括如下步骤：
[0011](1)取猫爪草供试品溶液在薄层板上点样；
[0012](2)采用环己烷
‑
乙酸乙酯
‑
甲酸的混合液为展开剂展开，取出，溶剂挥发，显色，即得。
[0013]进一步的，采用的薄层板为硅胶G薄层板；
[0014]优选的，薄层板的长度≥10cm，更优选为10
‑
20cm；
[0015]优选的，点样体积为1
‑
30μl；更优选为1
‑
4μl。
[0016]进一步的，薄层色谱检测中，采用紫外下显色或者硫酸乙醇溶液为显色剂显色。具体的，可以采用含体积百分数为10％的硫酸的乙醇溶液。
[0017]在某些优选的实施方式中，采用365nm的紫外下显色。
[0018]进一步的，所述猫爪草供试品溶液的制备中，满足如下a
‑
g中的任意一项或者多项：
[0019]a，所述猫爪草供试品的质量与水、无机酸的体积之比为0.3
‑
0.7：20
‑
50：1
‑
3，其中，若质量的单位为g，对应的体积的单位为ml。
[0020]b，所述猫爪草供试品的质量与有机溶剂的体积比为0.3
‑
0.7：30
‑
60，其中，若质量的单位为g，对应的体积的单位为ml。
[0021]c，加热水解的温度为90
‑
100℃，时间为0.5
‑
2h。
[0022]d，有机溶剂提取次数为1
‑
5次，每次提取加入20
‑
60倍量的有机溶剂，合并每次的提取液。
[0023]e，所述无机酸为盐酸和/或硫酸；
[0024]f，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、正丁醇和乙醚中的至少一种；
[0025]g，提取步骤之后还包括取提取液进行浓缩处理的步骤；或者，还包括取提取物干燥、溶解的步骤，优选地，溶解步骤采用的溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯中的至少一种。更优选地，所述猫爪草供试品的质量与溶剂的体积比为0.3
‑
0.7：1
‑
3，其中，若质量的单位为g，对应的体积的单位为ml。
[0026]进一步地，在猫爪草供试品溶液的制备过程中，水和无机酸可以先后与猫爪草供试品混合，也可以先混合成含无机酸的水溶液再混入猫爪草供试品。
[0027]所述猫爪草供试品选自猫爪草药材、饮片或者猫爪草药物制剂，其中猫爪草药物制剂是以猫爪草为原料药按照本领域常规技术手段，加入或者不加入药学上常规辅料制成的制剂。
[0028]优选的，所述猫爪草药物制剂选自猫爪草的固体制剂、半固体制剂或者液体制剂。
[0029]其中，固体制剂可以但不局限于片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂等；
[0030]半固体制剂可以但不局限于软膏剂、糊剂、乳膏剂等；
[0031]液体制剂可以但不局限于汤剂、合剂、口服液、注射剂、乳剂、混悬剂、纳米液体制剂等。
[0032]猫爪草的汤剂可以选择猫爪草药材或者饮片的水提液。
[0033]猫爪草药的粉剂可以选择猫爪草标准汤剂冻干粉。
[0034]本专利技术还提供了本专利技术中任一所述的构建方法得到的薄层色谱。
[0035]本专利技术还提供了一种鉴定猫爪草、饮片或者猫爪草药物制剂的方法，包括将待测猫爪草供试品的薄层色谱与对照药材的薄层色谱比较的步骤；
[0036]其中，所述待测猫爪草供试品的薄层色谱为使用待测猫爪草供试品并且按照本专利技术任一所述的构建方法得到。
[0037]优选地，所述对照药材的薄层色谱为使用猫爪草对照药材按照供试品溶液的制备方法同法制备得到，为了使对照药材溶液显色更加明显，优选地方案中，所述对照药材的薄层色谱为采用猫爪草药材与水混合经煎煮，固液分离，干燥，得到猫爪草药材提取物，然后取猫爪草药材提取物代替猫爪草供试品并且按照本专利技术任一所述的构建方法得到。不进行煎煮和固液分离的步骤得到的实验结果图谱不清晰，采用增大对照药材溶液浓度或者点样量的方式可以提高清晰度。
[0038]所述对照药材的薄层色谱构建中，煎煮的温度为煎煮的温度为90
‑
150℃，时间为
0.5
‑
2h；和/或，猫爪草药材的质量与水的体积之比为0.5
‑
3：20
‑
100；和/或，固液分离为过滤或者离心。
[0039]本专利技术还提供了本专利技术的鉴定猫爪草药材、饮片或者猫爪草药物制剂的方法在猫爪草药材、饮片或者猫爪草药物制剂的质量检测中的应用。
[0040]本专利技术还提供了一种中药产品的质量检测方法，
[0041]包括将猫爪草药材、饮片或者猫爪草药物制剂按照所述的方法鉴定猫爪草药材、饮片或者猫爪草药物制剂的步骤。
[0042]本专利技术技术方案，具有如下优点：
[0043]1.本专利技术提供的薄层色谱的构建方法，包括猫爪草供试品溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种薄层色谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：猫爪草供试品溶液的制备：取猫爪草供试品、水与无机酸混合，加热水解，用有机溶剂提取，得到供试品溶液；对供试品溶液进行薄层色谱检测，即得供试品的薄层色谱。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述薄层色谱检测包括如下步骤：(1)取猫爪草供试品溶液在薄层板上点样；(2)采用环己烷
‑
乙酸乙酯
‑
甲酸的混合液为展开剂展开，取出，溶剂挥发，显色，即得。3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述薄层色谱检测还满足如下A
‑
C中任意一项或者多项：A，采用的薄层板为硅胶G薄层板；优选的，点样体积为1
‑
4μl；B，环己烷
‑
乙酸乙酯
‑
甲酸的体积比为0.5
‑
1.5：1：0.1；C，采用紫外下显色或者采用硫酸乙醇溶液为显色剂显色；优选的，采用365nm的紫外下显色。4.根据权利要求1
‑
3中任一所述的构建方法，其特征在于，所述猫爪草供试品溶液的制备中，满足如下a
‑
g中的任意一项或者多项：a，所述猫爪草供试品的质量与水、无机酸的体积之比为0.3
‑
0.7：20
‑
50：1
‑
3；b，所述猫爪草供试品的质量与有机溶剂的体积比为0.3
‑
0.7：30
‑
60；c，加热水解的温度为90
‑
100℃，时间为0.5
‑
2h；d，有机溶剂提取次数为1
‑
5次，每次提取加入20
‑
60倍量的有机溶剂，合并每次的提取液；e，所述无机酸为盐酸和/或硫酸；f，所述有...

【专利技术属性】
技术研发人员：张志强，董文凤，李国鹏，王冬月，高扬，付静，
申请(专利权)人：北京康仁堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：