一种改性封闭剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种改性封闭剂及其制备方法，属于医疗产品和技术领域，包含如下重量份的原料：5

【技术实现步骤摘要】
一种改性封闭剂及其制备方法


[0001]本专利技术属于医疗产品和
，具体涉及一种改性封闭剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]免疫比浊分析是将液相内的沉淀反应与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术，当抗体浓度固定时，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加，通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照，即可计算出检样中抗原的含量。该技术已经在医学检验方面得到广泛应用。
[0003]固相吸附蛋白是非特异性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力，为了保障抗原抗体反应的特异性，因此，包被剩余的固相表面应该用抗原抗体反应无关蛋白封闭。目前常用的封闭剂有牛血清白蛋白(BSA)、酪蛋白、脱脂奶粉、明胶等蛋白溶液，此类封闭剂在进行封闭时，多以非特异性吸附的方式对固相载体空白位点进行封闭，以占据的方式阻止标记物与固相载体的空白位点进行结合。但目前很多液体试剂仍存在封闭不完全、影响灵敏度的问题，同时封闭不完全的试剂在临床中出现假阳性或者假阴性以及稳定性不好的问题。因此，先需研发一种封闭效果良好的改性封闭剂。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种改性封闭剂及其制备方法，得到的改性封闭剂表面的具有均匀电荷，是用于封闭使用时，具有良好的封闭效果，且使试剂具有更好的分散性，减少蛋白间团聚情况。
[0005]一种改性封闭剂，包含如下重量份的原料：5
‑
15份羊血清蛋白、0
‑
5份卵清蛋白、1
‑
6份明胶、20
‑
50份修饰剂、30
‑
80份改性剂、50
‑
100份硫酸软骨素。
[0006]进一步地，改性封闭剂包含如下重量份的原料：8
‑
10份羊血清蛋白、1
‑
3份卵清蛋白、2
‑
5份明胶、30
‑
45份修饰剂、50
‑
70份改性剂、60
‑
90份硫酸软骨素。
[0007]进一步地，所述改性剂为对十二烷基苯磺酰叠氮、二硫丁二钠按照任意比例的组合；所述修饰剂为半胱氨酸脱硫酶、生物素按照任意比例的组合。
[0008]进一步地，所述改性剂为对十二烷基苯磺酰叠氮、二硫丁二钠按照1
‑
3:1的质量比例的组合。
[0009]进一步地，所述修饰剂为半胱氨酸脱硫酶、生物素按照1:1
‑
5的质量比例的组合。
[0010]本专利技术提供所述改性封闭剂的制备方法，包括如下步骤：
[0011](1)向羊血清蛋白、卵清蛋白中加入水稀释，再向其中加入明胶搅拌混合均匀，得到蛋白液；
[0012](2)向蛋白液中加入修饰剂混合均匀，然后置于温度35
‑
37℃下搅拌反应10
‑
15min，得到修饰蛋白液，向修饰蛋白液中加入改性剂，继续于温度35
‑
37℃下搅拌反应10
‑
15min，得到改性蛋白液，将所述改性蛋白液离心分离出改性蛋白；
[0013](3)将所述改性蛋白与硫酸软骨素混合均匀，即得到改性封闭剂。
[0014]进一步地，步骤(1)中加入水至羊血清蛋白质量浓度为1
‑
2％。
[0015]本专利技术提供所述改性封闭剂的应用，将所述改性封闭剂用其质量5
‑
15倍的水稀释后使用即可。
[0016]本专利技术具有以下有益效果：
[0017]1.本专利技术的封闭剂经过修饰剂、改性剂处理后，得到的改性封闭剂表面的具有均匀电荷，是用于封闭使用时，具有良好的封闭效果，且使试剂具有更好的分散性，减少蛋白间团聚情况。
[0018]2.本专利技术采用羊血清蛋白、卵清蛋白、明胶共同作为封闭剂的主体材料，其中的卵清蛋白含有二硫键和巯基，能够使封闭剂表面的具有均匀电荷，具有更好的分散性，减少蛋白间团聚。
[0019]3.本专利技术的改性剂中含有一定的叠氮基和硫基，与蛋白结合，可使其表面的电荷分别更加均匀，用于封闭剂使用时，使试剂具有更高的稳定性；添加的修饰剂可使试剂进一步提高稳定性；本专利技术还添加了硫酸软骨素，进一步提高了所述试剂的稳定性和保存时间。
具体实施方式
[0020]以下结合具体实施实例进一步详细描述本专利技术，但本专利技术的应用并不限于此。本专利技术如下使用原料均购自化学、生物试剂原料公司，可直接使用。
[0021]实施例1
[0022]一种改性封闭剂，包含如下重量份的原料：15份羊血清蛋白、5份卵清蛋白、6份明胶、50份修饰剂、80份改性剂、100份硫酸软骨素；所述改性剂为对十二烷基苯磺酰叠氮、二硫丁二钠按照4:1的质量比例的组合；所述修饰剂为半胱氨酸脱硫酶、生物素按照1:7的质量比例的组合；
[0023](1)向羊血清蛋白、卵清蛋白中加入水稀释，再向其中加入明胶搅拌混合均匀，得到蛋白液；
[0024](2)向蛋白液中加入修饰剂混合均匀，然后置于温度37℃下搅拌反应15min，得到修饰蛋白液，向修饰蛋白液中加入改性剂，继续于温度37℃下搅拌反应15min，得到改性蛋白液，将所述改性蛋白液离心分离出改性蛋白；
[0025](3)将所述改性蛋白与硫酸软骨素混合均匀，即得到改性封闭剂。
[0026]实施例2
[0027]一种改性封闭剂，包含如下重量份的原料：5份羊血清蛋白、1份明胶、20份修饰剂、30份改性剂、50份硫酸软骨素；所述改性剂为对十二烷基苯磺酰叠氮、二硫丁二钠按照1:5的质量比例的组合；所述修饰剂为半胱氨酸脱硫酶、生物素按照10:1的质量比例的组合；
[0028](1)向羊血清蛋白、卵清蛋白中加入水稀释，再向其中加入明胶搅拌混合均匀，得到蛋白液；
[0029](2)向蛋白液中加入修饰剂混合均匀，然后置于温度36℃下搅拌反应12min，得到修饰蛋白液，向修饰蛋白液中加入改性剂，继续于温度36℃下搅拌反应12min，得到改性蛋白液，将所述改性蛋白液离心分离出改性蛋白；
[0030](3)将所述改性蛋白与硫酸软骨素混合均匀，即得到改性封闭剂。
[0031]实施例3
[0032]一种改性封闭剂，包含如下重量份的原料：8份羊血清蛋白、1份卵清蛋白、2份明胶、30份修饰剂、50份改性剂、60份硫酸软骨素；所述改性剂为对十二烷基苯磺酰叠氮、二硫丁二钠按照2:1的质量比例的组合；所述修饰剂为半胱氨酸脱硫酶、生物素按照1:4的质量比例的组合；
[0033](1)向羊血清蛋白、卵清蛋白中加入水稀释，再向其中加入明胶搅拌混合均匀，得到蛋白液；
[0034](2)向蛋白液中加入修饰剂混合均匀，然后置于温度37℃下搅拌反应10min，得到修饰蛋白液，向修饰蛋白液中加入改性剂，继续于温度37℃下搅拌反应10min，得到改性蛋白液，将所述改性蛋白液离心分离出改性蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种改性封闭剂，其特征在于，包含如下重量份的原料：5
‑
15份羊血清蛋白、0
‑
5份卵清蛋白、1
‑
6份明胶、20
‑
50份修饰剂、30
‑
80份改性剂、50
‑
100份硫酸软骨素。2.根据权利要求1所述改性封闭剂，其特征在于，包含如下重量份的原料：8
‑
10份羊血清蛋白、1
‑
3份卵清蛋白、2
‑
5份明胶、30
‑
45份修饰剂、50
‑
70份改性剂、60
‑
90份硫酸软骨素。3.根据权利要求1或2所述改性封闭剂，其特征在于，所述改性剂为对十二烷基苯磺酰叠氮、二硫丁二钠按照任意比例的组合；所述修饰剂为半胱氨酸脱硫酶、生物素按照任意比例的组合。4.根据权利要求3所述改性封闭剂，其特征在于，所述改性剂为对十二烷基苯磺酰叠氮、二硫丁二钠按照1
‑
3:1的质量比例的组合。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：李名星，张设熙，莫智林，韦佳志，韦松利，方运清，
申请(专利权)人：广西康柏莱科技有限公司，
类型：发明
国别省市：