包含皂苷的抗体药物缀合物（ADC）制造技术

本发明专利技术涉及抗体

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含皂苷的抗体药物缀合物（ADC）


[0001]本专利技术涉及抗体
‑
药物缀合物(ADC)，其通过共施用ADC与包含共价连接的皂苷的部分而加强。本专利技术还涉及抗体
‑
寡核苷酸缀合物 (AOC)，其通过共施用AOC与包含共价连接的皂苷的部分而加强。本专利技术还涉及经由共价接头与皂苷缀合的ADC和AOC。本专利技术还涉及经由共价键与皂苷缀合的效应子部分(如毒素)或反义寡核苷酸诸如例如BNA。本专利技术还涉及与靶向部分(如抗体)共价缀合的BNA。本专利技术还涉及治疗性组合，其包含第一药物组合物以及包含第二药物组合物，所述第一药物组合物包含细胞靶向部分(如抗体)和与其共价结合的反义寡核苷酸(如BNA)的缀合物，所述第二药物组合物包含游离皂苷或细胞靶向部分(如抗体)和与其共价连接的皂苷的缀合物。此外，本专利技术涉及这些缀合物或治疗性组合物或治疗性组合中的任一种，其用作药物。本专利技术还涉及这些缀合物或治疗性组合物或治疗性组合中的任一种，其用于治疗或预防癌症的方法中。最后，本专利技术涉及用于产生本专利技术的这些缀合物中的任一种的方法。
[0002]背景
[0003]在理论上，具有治疗性生物活性的分子在许多情况下适合应用为有效治疗药物以用于治疗有需要的人类患者中的疾病，如癌症。一个典型的实例是小分子生物活性部分。然而，目前临床中使用的许多(如果不是全部)潜在的类药(drug
‑
like)分子和治疗剂至少存在众多缺点和缺陷之一。当施用至人体时，除了针对待治疗疾病或健康问题的潜在方面的生物学活性之外，治疗活性分子还可发挥脱靶效应。此类脱靶效应是不希望的，并且存在所施用分子诱发健康或甚至危及生命的副作用的风险。正是此类不良事件的发生导致许多类药化合物和治疗性部分未能通过III期临床试验或甚至IV期临床试验(进入市场后随访)。因此，强烈希望提供药物分子，如小分子治疗剂，其中药物分子的治疗性效应应该，如，(1)对驱动疾病的生物因素或生物过程具有高度特异性，(2)足够安全，(3)足够有效，(4)充分针对患病细胞且对非患病细胞几乎没有脱靶活性，(5)具有足够及时的作用模式(如施用的药物分子应在一定的时间范围内到达人类患者中的靶向部位，并应在靶向部位处保持一定的时间范围)，和/或(6)在患者体内具有足够长的持续治疗活性，等等。不幸的是，迄今为止，尽管已经进行了长期和深入的研究并且尽管在个别遇到困难和缺陷的几个领域取得的令人印象深刻的进展，但具有许多或甚至所有上述有益特征的
‘
理想
’
治疗剂对于患者来说仍是不可用的。
[0004]化疗是癌症治疗中最重要的治疗选项之一。然而，它通常与低治疗窗有关，因为与健康组织中的分裂细胞相比，它对癌细胞没有特异性。单克隆抗体的专利技术提供了利用其特异性结合特性作为将细胞毒性剂靶向递送至癌细胞同时保留正常细胞的机制的可能性。这可以通过细胞毒性效应子(也称为有效载荷或弹头)化学缀合至抗体以产生抗体
‑ꢀ
药物缀合物(ADC)来实现。通常，使用非常有效的有效载荷(如美坦新 (DM1))，它们的未缀合形式具有有限的治疗指数(比较毒性剂量与有效剂量的比率)。DM1与曲妥珠单抗(ado
‑
曲妥珠单抗美坦新)的缀合，也称为Kadcycla，将猴子中的DM1耐受剂量提高至少两倍。在过去的几十年中，已经为开发治疗性ADC做出了巨大的努力和投资。然而，尽管临床前数据很有希望，但
将ADC引入临床仍然具有挑战性。2000 年，第一个获批用于临床使用的ADC是吉妥珠单抗奥佐米星(麦罗塔 (Mylotarg)，CD33靶向的，Pfizer/Wyeth)用于复发性急性髓系白血病 (AML)。然而，由于包括其安全性概况在内的诸多问题，麦罗塔应美国联邦药品管理局(Federal Drug Administration，FDA)的要求从市场上撤出。与用常规化疗治疗的患者相比，用麦罗塔治疗的患者更常被发现死亡。麦罗塔在2017年再次以较低的推荐剂量、不同的时间表联合化疗或其自身以及新的患者群体进入市场。迄今为止，只有5种ADC被批准用于临床使用，同时大约55种ADC的临床开发已停止。然而，人们的兴趣仍然很高，并且目前大约有80种ADC在近600项临床试验中仍处于临床开发。
[0005]尽管有可能使用患者通常不能耐受的毒性有效载荷，但低治疗指数(比较毒性剂量与有效剂量的比率)是导致许多ADC在临床开发中停止的主要问题，这可能由若干种机制导致，如对正常细胞的脱靶毒性、对细胞毒性剂产生抗性以及药物在循环中过早释放。FDA对ADC的系统审查发现，大多数ADC的毒性特征可以根据所使用的有效载荷进行分类，但不能根据所使用的抗体进行分类，这表明毒性主要是由有效载荷的过早释放决定的。在停止使用的大约55种ADC中，估计至少有23种是由于治疗指数不佳导致。例如，曲妥珠单抗特司林 (trastuzumab tesirine)缀合物(ADCT
‑
502，HER
‑
2靶向的，ADC治疗剂) 的开发最近因治疗指数窄而停止，这可能是由于在表达相当水平的 HER2的肺组织中的中靶、脱组织效应。此外，由于缺少主要终点，3 期试验中的几种ADC已停止。例如，在新诊断的成胶质细胞瘤患者中测试的德帕妥昔组单抗莫福汀(depatuxizumab mafodotin)缀合物(ABT
‑ꢀ
414，EGFR靶向的，AbbVie)和在患有铂抗性卵巢癌的患者中测试的索星
‑
米妥昔单抗(mirvetuximab soravtansine)缀合物(IMGN853，叶酸受体α(FRα)靶向的，ImmunoGen)的3期试验最近停止了，显示没有存活益处。重要的是注意一些ADC的临床使用剂量可能不足以发挥其全部抗癌活性。例如，ado
‑
曲妥珠单抗美坦新在人体内的MTD为3.6mg/kg。在乳腺癌的临床前模型中，ado
‑
曲妥珠单抗美坦新在3mg/kg以上的剂量水平下诱导肿瘤消退，但在15mg/kg下观察到更有效的功效。这表明，在临床施用剂量下，ado
‑
曲妥珠单抗美坦新可能不会发挥其最大的潜在抗肿瘤效应。
[0006]ADC主要由抗体、细胞毒性部分(如有效载荷)和接头组成。在新的ADC的设计和开发中已经提出并实施了几种新型策略，以克服靶向ADC的每种组分的现有问题。例如，通过鉴定和验证针对抗体组分的足够抗原靶标，通过选择在肿瘤中具有高表达水平而在正常组织中几乎不表达的抗原，存在于细胞表面上以易于接近循环ADC的抗原以及在结合后允许ADC内化到细胞中的抗原；以及活性的替代机制；设计和优化提高ADC的溶解度和药物抗体比(DAR)并克服可将化疗剂转运出细胞的蛋白质诱导的抗性的接头；通过包含更多有效载荷来提高DAR比率，选择和优化抗体以提高抗体的同质性和可开发性。除了ADC的技术开发外，还正在部署新的临床和转化策略以最大化治疗指数，如通过分次给药改变给药时间表；进行生物分布研究；包括生物标志物以优化患者选择，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.具有化合物I的化学结构的治疗性分子：A1
m
((
‑
L9
w
)((
‑
L1
q
‑
B1
n
)
u
((
‑
L2
r
‑
L3
s
)(
‑
L4
v
‑
C)
p
)
t
))
x
(化合物I)，其中如果B1是第一效应子部分，则A1是第一配体，或者如果B1是所述第一配体，则A1是所述第一效应子部分；C是皂苷；如果A1是所述第一配体并且B1是所述第一效应子部分，则m＝0或1；如果A1是所述第一效应子部分并且B1是所述第一配体，则m＝0
‑
32；如果B1是所述第一配体并且A1是所述第一效应子部分，或者如果A1是所述第一配体并且B1是所述第一效应子部分，则n＝0或1；p＝1
‑
128中的任一个；L1是用于共价偶联两个化学基团的至少一个接头；L2是用于共价偶联两个化学基团的至少一个接头；L3是用于共价偶联两个化学基团的至少一个寡聚支架或多聚支架；L4是用于共价偶联两个化学基团的至少一个接头；L9是用于共价偶联三个化学基团的三官能接头；q＝0或1；r＝0或1；s＝0或1；如果s＝0时，则t＝0、1或2，以及如果s＝1，则t＝0
‑
16中的任一个；如果A1是所述第一配体并且B1是所述第一效应子部分，则u＝0
‑
32中的任一个，或者如果A1是所述第一效应子部分并且B1是所述第一配体，则u＝1；v＝0或1；w＝1或0；以及x＝1
‑
16。2.治疗性组合，其包含权利要求1所述的治疗性分子和具有化合物II的化学结构的第二治疗性分子：A2
a
((
‑
L10
j
)((
‑
L5
d
‑
B2
b
)
h
((
‑
L6
e
‑
L7
f
)(
‑
L8
i
‑
C)
c
)
g
))
k
(化合物II)，其中如果B2是第二效应子部分，则A2是第二配体，或者如果B2是所述第二配体，则A2是所述第二效应子部分；C是皂苷；如果A2是所述第二配体并且B2是所述第二效应子部分，则a＝0或1，或者如果A2是所述第二效应子部分并且B2是所述第二配体，则a＝0
‑
32；如果B2是所述第二配体并且A2是所述第二效应子部分，或者如果A2是所述第二配体并且B2是所述第二效应子部分，则b＝0或1；c＝1
‑
128中的任一个；
L5是用于共价偶联两个化学基团的至少一个接头；L6是用于共价偶联两个化学基团的至少一个接头；L7是用于共价偶联两个化学基团的至少一个寡聚支架或多聚支架；L8是用于共价偶联两个化学基团的至少一个接头；L10是用于共价偶联三个化学基团的三官能接头；d＝0或1；e＝0或1；f＝0或1；如果f＝0，则g＝0、1或2，并且如果f＝1，则g＝0
‑
16中的任一个；如果A2是所述第二配体并且B2是所述第二效应子部分，则h＝0
‑
32中的任一个，或者如果A2是所述第二效应子部分并且B2是所述第二配体，则h＝1；i＝0或1；j＝1或0，以及；k＝1
‑
16。3.如权利要求2所述的第二治疗性分子，其中如果f＝0并且t>0，则g＝0、1或2，如果f＝0并且t＝0，则g＝1或2，如果f＝1并且t>0，则g＝0
‑
16中任一个，以及如果f＝1并且t＝0，则g＝1
‑
16中任一个。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2或3所述的第二治疗性分子，其中所述第一配体A1或B1和/或所述第二配体A2或B2包含以下或由以下组成：免疫球蛋白、免疫球蛋白的结合结构域或免疫球蛋白的结合片段，如抗体、IgG、包含Vhh结构域或Vh结构域或者由其组成的分子、Fab、scFv、Fv、dAb、F(ab)2、Fcab片段；或者包含以下或由以下组成：至少一种非蛋白质配体和/或至少一种蛋白质配体，所述配体如EGF或细胞因子用于结合细胞表面分子，条件是所述第一配体和所述第二配体是相同的或不同的。5.如权利要求1
‑
4中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
4中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述第一配体A1或B1和/或所述第二配体A2或B2结合肿瘤细胞受体，优选肿瘤细胞特异性受体的肿瘤细胞表位，优选肿瘤细胞特异性表位，所述肿瘤细胞特异性受体优选选自CD71、CA125、EpCAM(17
‑
1A)、CD52、CEA、CD44v6、FAP、EGF
‑
IR、整合素、多配体蛋白聚糖
‑
1、血管整合素α
‑
Vβ
‑
3、HER2、EGFR、CD20、CD22、叶酸受体1、CD146、CD56、CD19、CD138、CD27L受体、PSMA、CanAg、整合素
‑
αV、CA6、CD33、间皮素、Cripto、CD3、CD30、CD239、CD70、CD123、CD352、DLL3、CD25、肝配蛋白A4、MUC1、Trop2、CEACAM5、CEACAM6、HER3、CD74、PTK7、Notch3、FGF2、C4.4A、FLT3、CD38、FGFR3、CD7、PD
‑
L1、CTLA4、CD52、PDGFRA、VEGFR1、VEGFR2，更优选选自CD71、EGFR和HER2，条件是所述第一配体和所述第二配体结合相同或不同的肿瘤细胞表位，优选肿瘤细胞特异性表位，和/或其中所述第一配体能够结合的肿瘤细胞受体，优选肿瘤细胞特异性受体与所述第二配体能够结合的肿瘤细胞受体，优选肿瘤细胞特异性受体是相同的或不同的。6.如权利要求1
‑
5中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
5中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述第一配体A1或B1和/或所述第二配体A2或B2包含以下或由以下组成：西妥昔单抗、达雷木单抗、吉妥珠单抗、曲妥珠单抗、帕尼单抗、本妥昔单抗、英妥珠单抗、莫西莫单抗、泊洛妥珠单抗、奥滨尤妥珠单抗、IgG型OKT
‑
9抗CD71单克隆抗体、帕妥珠单
抗、利妥昔单抗、奥法木单抗、赫塞汀、阿仑单抗、匹那妥珠单抗、OKT
‑
10、抗CD38单克隆抗体、表A2或表A3或表A4的抗体，优选西妥昔单抗或曲妥珠单抗或OKT
‑
9，或者其至少一个肿瘤细胞受体结合结构域和/或其至少一个肿瘤细胞受体结合片段，其优选是肿瘤细胞特异性受体结合结构域和/或肿瘤细胞特异性受体结合片段，条件是所述第一配体与所述第二配体是相同的或不同的。7.如权利要求1
‑
6中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
6中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述第一配体A1或B1在所述第一配体与其在肿瘤细胞上的结合伴侣结合之后由所述肿瘤细胞内化，并且其中优选地，所述第一配体与所述肿瘤细胞结合之后是例如经由所述第一配体和所述肿瘤细胞上所述第一配体的结合伴侣的复合物的内吞作用进行的肿瘤细胞受体介导的内化。8.如权利要求1
‑
7中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
7中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述第二配体A2或B2在所述第二配体与其在肿瘤细胞上的结合伴侣结合之后由所述肿瘤细胞内化，并且其中优选地，所述第二配体与所述肿瘤细胞结合之后是例如经由所述第二配体和所述肿瘤细胞上所述第二配体的结合伴侣的复合物的内吞作用进行的肿瘤细胞受体介导的内化。9.如权利要求1
‑
8中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
8中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述第一效应子部分A1或B1和/或所述第二效应子部分A2或B2包含寡核苷酸、核酸和异源核酸中的任何一种或多种的至少一种或者由其组成，所述寡核苷酸、核酸和异源核酸优选选自以下中的任何一种或多种：载体、基因、诱导细胞自杀的转基因、脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)、反义寡核苷酸(ASO，AON)、短干扰RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)、DNA适配体、RNA适配体、mRNA、微环DNA、肽核酸(PNA)、氨基磷酸酯吗啉代寡聚物(PMO)、锁核酸(LNA)、桥接核酸(BNA)、2
’‑
脱氧
‑2’‑
氟阿拉伯糖核酸(FANA)、2
’‑
O
‑
甲氧基乙基
‑
RNA(MOE)、2
’‑
O,4
’‑
氨基亚乙基桥接核酸、3
’‑
氟己糖醇核酸(FHNA)、质粒、二醇核酸(GNA)和苏糖核酸(TNA)、或它们的衍生物，更优选BNA，例如用于沉默HSP27蛋白表达的BNA，条件是所述第一效应子部分和所述第二效应子部分是相同的或不同的。10.如权利要求1
‑
9中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
9中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述第一效应子部分A1或B1和/或所述第二效应子部分A2或B2包含至少一种蛋白质分子或由其组成，所述蛋白质分子优选选自以下中的任何一种或多种：肽、蛋白质、酶如脲酶和Cre重组酶、蛋白质毒素、核糖体失活蛋白、选自表A5的至少一种蛋白质毒素和/或细菌毒素、植物毒素，更优选选自以下中的任何一种或多种：病毒毒素，如凋亡蛋白；细菌毒素，如志贺毒素、志贺样毒素、铜绿假单胞菌外毒素(PE)或PE的外毒素A、全长或截短的白喉毒素(DT)、霍乱毒素；真菌毒素，如α
‑
帚曲菌素；植物毒素，包括核糖体失活蛋白和2型核糖体失活蛋白的A链，如石竹素例如石竹素
‑
30或石竹素
‑
32、皂草素例如皂草素
‑
S3或皂草素
‑
S6、三角梅核糖体失活蛋白或三角梅核糖体失活蛋白的去免疫化衍生物去三角梅核糖体失活蛋白、志贺样毒素A、商陆抗病毒蛋白、蓖麻毒素、蓖麻毒素A链、蒴莲根毒素、蒴莲根毒素A链、相思子毒素、相思子毒素A链、蒴莲毒素、蒴莲毒素A链、槲寄生素、槲寄生素A链；或者动物或人类毒素，如蛙RNA酶或者来自人类的颗粒酶B或血管生长素，或者它们的任何片段或衍生物；优选地，所述蛋白质毒素是石竹素和/或皂草素，条件是第一效应子部分和第二效应子部分是相同的或不同的。
11.如权利要求1
‑
10中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
10中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述第一效应子部分A1或B1和/或所述第二效应子部分A2或B2包含至少一种有效载荷或由其组成，所述有效载荷优选选自以下中的任何一种或多种：靶向核糖体的毒素、靶向延长因子的毒素、靶向微管蛋白的毒素、靶向DNA的毒素和靶向RNA的毒素，更优选选自以下中的任何一种或多种：美坦新、pasudotox、美登素衍生物DM1、美登素衍生物DM4、单甲基澳瑞他汀E(MMAE，维多汀)、单甲基澳瑞他汀F(MMAF，莫福汀)、卡奇霉素、N
‑
乙酰基
‑
γ
‑
卡奇霉素、吡咯并苯并二氮杂(PBD)二聚体、苯并二氮杂CC
‑
1065类似物、倍癌霉素、多柔比星、紫杉醇、多西他赛、顺铂、环磷酰胺、依托泊苷、多西他赛、5
‑
氟尿嘧啶(5
‑
FU)、米托蒽醌、微管菌素、吲哚啉苯并二氮杂AZ13599185、念珠藻素、根瘤菌素、甲氨蝶呤、蒽环类药物、喜树碱类似物、SN
‑
38、DX
‑
8951f、甲磺酸依喜替康、截短形式的铜绿假单胞菌外毒素(PE38)、倍癌霉素衍生物、鹅膏蕈碱、α
‑
鹅膏蕈碱、斯考他汀、泰兰斯他汀、奥佐米星、特司林、Amberstatin269和soravtansine或它们的衍生物。12.如权利要求1
‑
11中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
11中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述治疗性分子和/或所述第二治疗性分子包含以下中的任一种或由其组成：吉妥珠单抗奥佐米星、本妥昔单抗维多汀、曲妥珠单抗美坦新、英妥珠单抗奥佐米星、moxetumomab pasudotox和泊洛妥珠单抗维多汀以及表A2和表A3的抗体
‑
药物缀合物，或者其至少一个肿瘤细胞特异性受体结合结构域和/或其至少一个肿瘤细胞特异性受体结合片段，其优选是肿瘤细胞特异性受体结合结构域和/或肿瘤细胞特异性受体结合片段，条件是所述治疗性分子和所述第二治疗性分子是相同的或不同的。13.如权利要求1
‑
12中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
12中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述皂苷C是属于在C
‑
23位具有醛官能团的12,13
‑
脱氢齐墩果烷类型并且任选地在所述皂苷的C
‑
3β
‑
OH基团处的碳水化合物取代基中包含葡糖醛酸官能团的三萜皂苷或双糖链三萜皂苷，和/或是从石头花属物种和/或肥皂草属物种和/或麦仙翁属物种和/或皂皮树属物种如皂皮树(Quillaja saponaria)分离的皂苷。14.如权利要求1
‑
13中任一项所述的治疗性分子或者如权利要求2
‑
13中任一项所述的第二治疗性分子，其中所述皂苷C是单一特异性皂苷或者是两个或更多个不同皂苷的混合物，如表A1或方案I中的皂苷中的一种或多种、SO1861、SA1657、GE1741、SA1641、QS
‑
21、QS
‑
21A、QS
‑
21A
‑
api、QS
‑
21A
‑
xyl、QS
‑
21B、QS
‑
21B
‑
api、QS
‑
21B
‑
xyl、QS
‑7‑
xyl、QS
‑7‑
api、QS
‑
17
‑
api、QS
‑
17
‑
xyl、QS1861、QS1862、皂皮树皂苷、Saponinum album、QS
‑
18、Quil
‑
A、Gyp1、丝石竹皂苷A、AG1、AG2、SO1542、SO1584、SO1658、SO1674、SO1832，或者它们的立体异构体中的任一种和/或它们的任何组合，优选地，所述皂苷是SO1861和/或GE1741和/或SA1641和/或QS
‑
21和/或具有皂皮酸苷元核心、在C
‑
3β
‑
OH基团处具有Gal
‑
(1
→
2)
‑
[Xyl
‑
(1
→
3)]
‑
GlcA碳水化合物取代基以及在C
‑
28
‑
OH基团处具有Glc
‑
(1
→
3)
‑
Xyl
‑
(1
→
4)
‑
Rha
‑
(1
→
2)
‑
[Xyl
‑
(1
→
3)
‑4‑
OAc
‑
Qui
‑
(1
→
4)]
‑
Fuc碳水化合物取代基的皂苷，和/或是3
‑
O
‑
β
‑
D
‑
半乳吡喃糖基
‑
(1
→
2)
‑
[β
‑
D
‑
木吡喃糖基
‑
(1
→
3)]
‑
β
‑
D
‑
葡糖醛酸吡喃糖基皂皮酸28
‑
O
‑
β
‑
D
‑
葡吡喃糖基
‑
(1
→
3)
‑
β
‑
D
‑
木吡喃糖基
‑
(1
→
4)
‑
α
‑
L
‑
鼠李吡喃糖基
‑
(1
→
2)
‑
[β
‑
D
‑
木吡喃糖基
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁本，
申请(专利权)人：夏里特柏林大学医学院，
类型：发明
国别省市：