雪茄烟中一种具有抗烟草花叶病毒活性的喹啉生物碱及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种喹啉生物碱(Ⅰ)及其制备方法和应用。以雪茄烟烟叶为原料，以高浓度甲醇、高浓度丙酮/水或高浓度乙醇/水提取，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏；浸膏用硅胶干法装柱进行硅胶柱层析；以氯仿

【技术实现步骤摘要】
雪茄烟中一种具有抗烟草花叶病毒活性的喹啉生物碱及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于雪茄烟综合利用
，具体涉及一种从雪茄烟中首次提取得到的喹啉生物碱。同时，本专利技术还涉及该化合物的制备方法和在抗烟草花叶病毒中的应用。

技术介绍

[0002]烟草是世界上化学成分最为复杂的植物，次生代谢产物非常丰富，据1982年Dube和Green等报道，烟草中已鉴定出的化学成分就超过2549种，到2008年，Rodgman和perfetti的报道称，烟草、烟草代用品以及卷烟烟气中发现的化合物总数大约为8700种。目前，人们从烟草中鉴定出来的单体化学物质就超过3000多种，而且还有许多成分尚未鉴定出来。
[0003]雪茄烟属于烟草属栽培烟草(Nicotiana tabacum)的变种。雪茄烟经过烟叶种植、晾制、发酵后，卷制成品，供消费者吸食。雪茄烟是中国烟草核心竞争力的重要组成部分，是卷烟消费的有益补充。自2012年以来，国内雪茄烟市场呈现爆发式增长，年均销量增幅保持在40％以上，到2019年，国内手工雪茄产销量已突破540万支。中国雪茄市场已初具规模，国内雪茄消费群体正在不断发展与壮大。此外，雪茄烟除主要用于卷烟抽吸用途外，还可从中提取多种有利用价值的化学成分，为药物和生物农药开发提供新的先导性化合物。
[0004]喹啉生物碱类化合物在很多天然植物中存在，这类生物碱的生理活性极强，一直是国内外研究开发利用的热点。无论是从天然植物中提取还是人工合成或分子结构改造，以及构效关系的研究，异喹啉类生物碱一直是寻找有开发应用前景的先导化合物和生物活性成分的源泉。为可从烟草属植物中发现更多的活性化合物，发展和方法烟草的非吸烟用途，本专利技术从云南雪茄烟烟叶中分离得到了一种新的喹啉生物碱，该化合物至今尚未见到相关报道，值得一提的是该化合物具有显著的抗烟草花叶病毒活性。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种新的喹啉生物碱。
[0006]本专利技术的另一个目的是提供一种制备所述喹啉生物碱的方法。
[0007]本专利技术的目的还在于提供所述喹啉生物碱在抗烟草花叶病毒中的应用。
[0008]除非另有说明，本专利技术中所采用的百分数均为质量百分数。
[0009]本专利技术从雪茄烟中分离出一种新的喹啉生物碱，其分子式为C
13
H
11
NO3，具有下述结构式：
[0010][0011]该化合物的命名为：(7
‑
甲氧基
‑
呋喃[3,2
‑
c]喹啉
‑6‑
基)
‑
甲醇，英文名为：(7
‑
methoxy
‑
furo[3,2
‑
c]quinolin
‑6‑
yl)
‑
methanol，为浅黄色胶状物。
[0012]制备所述喹啉生物碱的方法，该方法包括以下步骤：
[0013](1)浸膏提取：将烟叶样品粉碎，用高浓度甲醇(w％：80％～100％)或高浓度乙醇(w％：80％～100％)或高浓度丙酮(w％：60％～90％)为提取溶剂，提取溶剂：雪茄烟(重量比)＝2～4:1，浸泡24h～72h，提取3～5次，合并提取液、过滤浓缩成浸膏；
[0014](2)硅胶柱层析：浸膏用重量比1.5～3倍量的纯甲醇或纯乙醇或纯丙酮溶解后用重量比0.8～1.2倍的80～100目硅胶拌样，用重量比2～4倍量的160～300目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析；以体积配比为(1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1和1:2)的氯仿
‑
丙酮溶液进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；
[0015](3)高压液相色谱分离纯化：柱层析洗脱液的7:3部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所述的喹啉生物碱。
[0016]高压液相色谱分离纯化是采用21.2mm
×
250mm，5μm的C
18
色谱柱，流速为20mL/min，流动相为52％的甲醇，紫外检测器检测波长为334nm，每次进样200μL，收集30.2min的色谱峰，多次累加后蒸干。
[0017]经所述高效液相色谱分离纯化后，一个优选的后续处理方案为，所得化合物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用凝胶柱层析分离，以进一步分离纯化。
[0018]表
‑
1.化合物的1H NMR和
13
C NMR数据(CDCl3)
[0019][0020]以上述方法制备得到的喹啉生物碱的结构通过以下方法进行测定。本专利技术化合物为浅黄色胶状物。高分辨质谱(HR
‑
ESIMS)给出准分子离子峰m/z 252.0645[M+Na]+
(计算值252.0637)。结合1H和
13
C NMR谱给出一个分子式C
13
H
11
NO3，不饱和度为9。其红外光谱显示有羟基(3389cm
‑1)、碳氮键(1819cm
‑1)和芳环(1614,1469,1374cm
‑1)结构，紫外光谱在210、242、334nm有最大吸收证实化合物中存在芳环共轭结构。化合物的1H和
13
C NMR和DEPT数据(表
‑
1)显示化合物中存在13个碳和11个氢，包含1个1,2,4,5
‑
四取代的苯环(C
‑
5～C
‑
8，C
‑
4a和C
‑
8a；H
‑
5和H
‑
8)，一个呋喃结构片段(C
‑
2和C
‑
3,H
‑
2和H
‑
3)，一个羟甲基(
‑
CH2‑
OH,C
‑
1'和H
‑
1')，一个甲氧基(
‑
MeO
‑
7，δ
H 3.78s和δ
C 56.3q)，以及一个
–
C＝C
‑
CH＝N
‑
结构片段(C
‑
4，C
‑
3a，C
‑
9a；H
‑
9a)。
[0021]根据其核磁共振信号，苯环、呋喃环和
–
C＝C
‑
CH＝N
‑
结构片段包含了9个不饱和度中的8个，苯环和
–
C＝C
‑
CH＝N
‑
结构片段之间应该形成1个喹啉环以满足9个不饱和度，而且
可推测化合物可能是呋喃[3,2
‑
c]喹啉结构。该推测进一步可通过H
‑
5和C
‑
4、C
‑
4a、C本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有下述结构式的喹啉生物碱：该化合物的命名为：(7
‑
甲氧基
‑
呋喃[3,2
‑
c]喹啉
‑6‑
基)
‑
甲醇，英文名为：(7
‑
methoxy
‑
furo[3,2
‑
c]quinolin
‑6‑
yl)
‑
methanol。2.一种权利要求1所述的喹啉生物碱的制备方法，该方法包括以下步骤：(1)浸膏提取:以烟叶为原料，将烟叶粉碎或切成小段，用重量百分浓度80％～100％的甲醇或乙醇，或重量百分浓度60％～90％的丙酮为提取溶剂，提取溶剂；烟叶的重量比＝2～4:1，浸泡24h～72h，提取3～5次，合并提取液、过滤浓缩成浸膏；(2)硅胶柱层析：浸膏用重量比2～4倍量的160～300目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析；以氯仿
‑
丙酮溶液进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；(3)高压液相色谱分离纯化：洗脱液的7:3部分进一步用高压液相色...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴玉萍，孔光辉，蔺忠龙，赵高坤，姚恒，张光海，李薇，阴根云，肖东，师建全，杨光宇，胡秋芬，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：