CD3特异性结合分子制造技术

本发明专利技术涉及具有改进的特性的与CD3结合的特异性结合分子，特别是抗体及其片段。特别是抗体及其片段。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD3特异性结合分子


[0001]本专利技术涉及具有改进的特性的与CD3结合的特异性结合分子，特别是抗体及其片段。

技术介绍

[0002]CD3(分化簇3)是一种T细胞共受体，其有助于活化细胞毒性T细胞(CD8+T细胞)和T辅助细胞(CD4+T细胞)。CD3与T细胞受体(T
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cell receptor，TCR)和ζ链(zeta链；CD247)缔合以在T淋巴细胞中产生活化信号。TCR、ζ链和CD3分子共同构成了TCR复合物。
[0003]与CD3结合的抗体是已知的并且可用作免疫抑制药物。例子包括muromonab
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CD3(Janssen
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Cilag)、奥昔组单抗(otelixizumab，也称为TRX4)、替利组单抗(teplizumab，也称为PRV
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031)和维西珠单抗(visilizumab)。
[0004]抗CD3抗体也可用作广泛称为T细胞接合双特异性疗法的一类基于蛋白质的疗法中的T细胞募集剂(Baeuerle et al.,Cancer Res.2009Jun 15；69(12):4941
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4)。此类疗法将靶细胞识别结构域与抗CD3结构域相结合。不依赖于T细胞受体特异性，靶细胞(例如癌细胞)和CD3+细胞毒性T细胞的同时接合导致CD3信号通路的活化，并最终导致靶细胞死亡。双特异性抗体兰妥莫单抗(blinatumomab)(Amgen)是用于治疗急性成淋巴细胞性白血病(Acute lymphoblastic leukemia，ALL)的市售T细胞接合治疗剂的例子。许多其他T细胞接合双特异性抗体正在临床试验中进行研究，用于治疗各种癌症和传染病(例如，参见Yuraszeck et al.,Clin Pharmacol Ther.2017May；101(5):634
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645和Husain et al.,BioDrugs.2018Oct；32(5):441
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464中提供的表格)。大多数T细胞接合双特异性抗体识别靶细胞上的细胞表面抗原。此外，还已知T细胞接合双特异性抗体识别源自细胞内抗原并呈递在细胞表面的与MHC形成复合物(pMHC)的短肽(Liddy et al.,Nat Med.2012Jun；18(6):980
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7)。
[0005]抗体UCHT1是本领域已知的临床相关的抗CD3抗体(Shalaby et al.,J Exp Med.1992Jan1；175(1):217
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25；US5821337)。已将人源化UCHT1抗体的scFv片段与可溶性T细胞受体融合，以构建与靶细胞上的pMHC结合的T细胞接合双特异性抗体(例如参见WO2011001152)。

技术实现思路

[0006]本专利技术人惊奇地发现，在UCHT1的氨基酸序列中引入某些突变导致产生具有特别有利于临床使用的意想不到的特性的T细胞接合双特异性分子。
[0007]在第一方面，提供一种特异性结合分子，该特异性结合分子与CD3结合并包含具有免疫球蛋白VL结构域和免疫球蛋白VH结构域的多肽，其中该VL结构域包含互补决定区(Complementarity Determining Region，CDR)VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3，以及其中该VH结构域包含互补决定区(CDR)VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3，各互补决定区具有：
[0008]如下各氨基酸序列，其中
[0009]VLCDR1为QDIRNY
[0010]VLCDR2为YTS
[0011]VLCDR3为QQGNTLPWT
[0012]VHCDR1为GYSFTGYA
[0013]VHCDR2为INPYKGVS
[0014]VHCDR3为ARSGYYGDSDWYFDV；
[0015]或与其至少70％相同的氨基酸序列。
[0016]CDR根据国际免疫遗传学信息系统(International ImMunoGeneTics information system，)定义(LeFranc et al.,Nucleic Acids Res.2009Jan；37(Database issue):D1006
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12)。
[0017]特别地，本专利技术的特异性结合分子在VHCDR1的C末端包含丙氨酸，其对应于编号中的第38位(其在本文中被指定为第165位，并且在图1的重链序列v1中以粗体进行例示和显示)。已经发现，与没有这种突变的分子相比，包括这种突变的分子具有改进的特性，包括改进的特异性窗(specificity window)。
[0018]CDR可以在抗体可变结构域框架序列中提供。框架序列可以是小鼠框架序列或人框架序列或人源化框架序列或任何其他合适的框架。优选的框架是人框架序列或人源化框架序列。人框架或人源化框架基本上具有人免疫球蛋白的氨基酸序列。在某些情况下，小鼠框架、人框架和人源化框架可以任意组合混合。
[0019]优选地，免疫球蛋白VL包含全序列VLFW1
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VLCDR1
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VLFW2
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VLCDR2
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VLFW3
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VLCDR3
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VLFW4，其中VLFW1、VLFW2、VLFW3和VLFW4分别为VL框架(VL framework，VLFW)序列1至4，免疫球蛋白VH包含全序列VHFW1
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VHCDR1
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VHFW2
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VHCDR2
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VHFW3
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VHCDR3
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VHFW4，其中VHFW1、VHFW2、VHFW3和VHFW4分别为VH框架(VH framework，VHFW)序列1至4，任选地其中VLFW序列和VHFW序列是小鼠、人或人源化的框架序列。
[0020]优选地，免疫球蛋白VL包含如下全序列：VLFW1
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VLCDR1
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VLFW2
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VLCDR2
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VLFW3
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VLCDR3
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VLFW4，其中VLFW1、VLFW2、VLFW3和VLFW4分别为框架(Framework，FW)序列1至4，VLFW1、VLFW2、VLFW3和VLFW4各自具有：
[0021]如下的各氨基酸序列，其中：
[0022]VLFW1为AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRAS或DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRAS
[0023]VLFW2为LNWYQQKPGKAPKLLIY
[0024]VLFW3为RLESGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYC
[0025]VLFW4为FGQGTKVEIK；...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种特异性结合分子，所述特异性结合分子与CD3结合并包含具有免疫球蛋白VL结构域和免疫球蛋白VH结构域的多肽，其中所述VL结构域包含互补决定区(CDR)VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3，以及其中所述VH结构域包含互补决定区(CDR)VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3，各互补决定区具有：如下各氨基酸序列，其中VLCDR1为QDIRNYVLCDR2为YTSVLCDR3为QQGNTLPWTVHCDR1为GYSFTGYAVHCDR2为INPYKGVSVHCDR3为ARSGYYGDSDWYFDV；或与其至少70％相同的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的特异性结合分子，其中，所述免疫球蛋白VL包含全序列VLFW1
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VLCDR1
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VLFW2
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VLCDR2
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VLFW3
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VLCDR3
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VLFW4，其中VLFW1、VLFW2、VLFW3和VLFW4分别为VL框架(VLFW)序列1至4，所述免疫球蛋白VH包含全序列VHFW1
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VHCDR1
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VHFW2
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VHCDR2
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VHFW3
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VHCDR3
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VHFW4，其中VHFW1、VHFW2、VHFW3和VHFW4分别为VH框架(VHFW)序列1至4，任选地其中所述VLFW序列和VHFW序列是小鼠、人或人源化的框架序列。3.根据前述权利要求中任一项所述的特异性结合分子，其中，所述免疫球蛋白VL包含全序列VLFW1
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VLCDR1
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VLFW2
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VLCDR2
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VLFW3
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VLCDR3
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VLFW4，其中VLFW1、VLFW2、VLFW3和VLFW4分别为框架(FW)序列1至4，VLFW1、VLFW2、VLFW3和VLFW4各自具有：如下的各氨基酸序列，其中：VLFW1为AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRAS或DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASVLFW2为LNWYQQKPGKAPKLLIYVLFW3为RLESGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCVLFW4为FGQGTKVEIK；或与其至少70％相同的氨基酸序列。4.根据前述权利要求中任一项所述的特异性结合分子，其中，所述免疫球蛋白VH包含全序列VHFW1
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VHCDR1
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VHFW2
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VHCDR2
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VHFW3
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VHCDR3
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VHFW4，其中VHFW1、VHFW2、VHFW3和VHFW4分别为框架(FW)序列1至4，VHFW1、VHFW2、VHFW3和VHFW4各自具有：如下的各氨基酸序列，其中：VHFW1为EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASVHFW2为MNWVRQAPGKGLEWVALVHFW3为TYNQKFKDRFTISVDKSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYC或TYNQKFKDRFTFSVDKSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCVHFW4为WGQGTLVTVSS；或与其至少70％相同的氨基酸序列。5.根据前述权利要求中任一项所述的特异性结合分子，其中，所述免疫球蛋白VL包含以下序列与以下序列至少70％相同的氨基酸序列：AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDIRNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLESGVPSRFSGSGSG...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛蒂娜，
申请(专利权)人：英美偌科有限公司，
类型：发明
国别省市：