一种治疗头颈部肿瘤的增效组合药物制造技术

本发明专利技术属医药、生物技术领域，涉及治疗头颈部肿瘤的增效药物，具体涉及自噬抑制剂与尼拉帕尼药物组合物及其在制备头颈部肿瘤增效药物中的用途。所述组合物，尼拉帕尼诱导DNA单链断裂抑制头颈部肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细胞自噬,抑制细胞自噬损伤肿瘤细胞同源重组修复(HR)对DNA双链断裂修补能力，显著増强尼拉帕尼对肿瘤细胞的杀伤效果。本发明专利技术的组合药物，能减少尼拉帕尼治疗用量，逆转肿瘤细胞耐药性，降低对人体的毒副作用。降低对人体的毒副作用。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗头颈部肿瘤的增效组合药物


[0001]本专利技术属于医药、生物
，涉及治疗头颈部肿瘤的增效药物，具体涉及自噬抑制剂与尼拉帕尼药物组合物及其在制备头颈部肿瘤增效药物中的用途。

技术介绍

[0002]现有技术公开了聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase，PARP)超家族拥有17位成员，是一种关键的DNA修复酶，具有DNA损伤应答、调控细胞凋亡、维持基因组稳定等作用；其中，DNA损伤修复依赖的PARPs主要包括PARP-1和PARP-2。研究显示，在细胞DNA损伤时，PARP通过与DNA单链损伤位点结合并激活PARP催化活性，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)与PARP活性位点结合，募集其它DNA修复蛋白共同修复DNA损伤。近年来，以DNA损伤修复为靶点研发的PARP抑制剂成为抗癌领域的一个热点(Hottiger MO,Hassa PO,Luscher B,Schuler H,Koch-Nolte F(2010)Toward a unified nomenclature for mammalian ADPribosyltransferases.Trends Biochem Sci 35(4):208
–
219.)。
[0003]有研究公开了PARP抑制剂通过竞争性结合PARP催化位点影响PARP功能而阻碍DNA损伤修复，使DNA单链断裂转为双链断裂，最终致肿瘤细胞死亡。现已获FDA批准的3种PARP抑制剂中，尼拉帕尼(Niraparib)捕获PARP能力明显优于奥拉帕尼(Olaparib)和鲁卡帕尼(Rucaparib)。
[0004]细胞自噬(autophagy)又称II型程序性细胞死亡(type IIprogrammed cell death)，是真核生物应激反应时体内常见的“自我降解”(cellular degradation)的现象，将细胞自身受损或多余的细胞器和蛋白包裹，形成囊泡在溶酶体中降解，借以实现细胞代谢需求及某些细胞器的更新，维持细胞内环境的稳定。细胞自噬在多种人类疾病中起着重要的作用，包括衰老，自身免疫性疾病和神经退行性病变等，尤其与肿瘤的发生发展密切相关。因此干预细胞自噬有望成为一种新的抗癌手段。
[0005]有研究表明，细胞自噬的缺失导致自噬底物P62蛋白积累，P62蛋白直接与DNA损伤反应(DDR)相关蛋白结合，抑制DNA修复蛋白募集；同时，自噬的缺失会增加蛋白酶体活性，增强检查点激酶1(Chk1)降解，进而阻碍细胞同源重组修复(HR)，DNA双链断裂无法修复，促进肿瘤细胞死亡，因此，探究联合自噬抑制剂增加PARP抑制剂临床抗癌疗效并减弱PARP抑制剂毒性的可行性对肿瘤治疗具有重要意义。
[0006]据统计，头颈部肿瘤以上呼吸道和上消化道上皮层最为常见，其中，喉癌发生率占头颈部肿瘤第三位；全球每年约50万例头颈部肿瘤被确诊，相关死亡人数多达40万。我国头颈部肿瘤发生率远高于其他国家，约占实体肿瘤的10％。(Lewis-Jones H，Colley S，Gibson D，et al.Imaging inhead and neck cancer：United KingdomNational MultidisciplinaryGuidelines.J Laryngol Otol.2016；130(S2)：S28-S31)。相关研究表明，吸烟、酗酒及人乳头状瘤病毒感染是其主要致病风险因素，其中，超过90％的头颈部肿瘤为鳞状细胞癌(Head and neck squamous cell carcinoma，HNSCC)，50％以上患者在初诊时已为局部晚期或转移性HNSCC，其中，约50％患者在2年内复发，一线治疗失败后，患者
中位生存期大于6个月，5年生存率小于5％。目前治疗方法包括手术、放化疗等对HSCCN患者生存率无显著提高。
[0007]基于现有技术的现状，本申请的专利技术人拟提供新的治疗头颈部肿瘤的增效药物，具体涉及自噬抑制剂与尼拉帕尼药物组合物及其在制备头颈部肿瘤增效药物中的用途。

技术实现思路

[0008]本专利技术目的是基于现有技术的现状，提供新的治疗头颈部肿瘤的增效药物，具体涉及一种自噬抑制剂和尼拉帕尼的组合药物；该药物组合物包含一种或多种细胞自噬抑制剂，其特点在于自身无明显细胞毒性但抑制细胞自噬显著增强尼拉帕尼的疗效，从而减低尼拉帕尼在治疗肿瘤时的用量，减少潜在的副作用和降低治疗成本。
[0009]本专利技术将一种或多种细胞自噬抑制剂和PARP抑制剂尼拉帕尼联合制备用于增强尼拉帕尼抗肿瘤的药物组合物，该药物组合物可通过使用一种或者几种自噬抑制剂与尼拉帕尼制成复方药物或是组合物，进行联合给药或是序贯给药，增强尼拉帕尼的抗肿瘤疗效。
[0010]本专利技术中，所述的细胞自噬抑制剂选自3-MA(3-Methyladenine)、渥曼青霉素(wortmannin)、LY294002、放线菌酮、巴法洛霉素A1(Bafilomycin A1)、NH4Cl、氯喹(Chloroquine)或羟基氯喹(hydroxychloroquine)；更优选3-MA(3-Methyladenine)、氯喹(Chloroquine)或羟基氯喹(Hydroxychloroquine)中的一种或多种。
[0011]本专利技术中，所述的尼拉帕尼是特异性抑制PARP-1和PARP-2。
[0012]本专利技术中，所述的增效药物组合可用于治疗头颈肿瘤包括口腔癌、口咽癌、下咽癌、鼻咽癌、喉癌，更优选的所述是喉癌。
[0013]本专利技术的治疗头颈部肿瘤的组合药物，可通过尼拉帕尼诱导肿瘤细胞DNA损伤进而抑制肿瘤细胞的增殖，以及诱导肿瘤细胞发生细胞自噬，抑制细胞自噬阻碍同源重组修复达到显著增强尼拉帕尼对肿瘤细胞的杀伤效果。
[0014]本专利技术提供了由一种或多种细胞自噬抑制剂与尼拉帕尼制成的组合药物，该组合物联合给药或是序贯使用能增强尼拉帕尼对肿瘤的杀伤作用，增强尼拉帕尼的疗效，进一步为临床提供新的抗癌方案。
附图说明
[0015]图1显示不同浓度尼拉帕尼作用24h、48h后Tu212细胞活力。
[0016]图2显示不同浓度尼拉帕尼作用48h后诱导Tu212细胞DNA损伤。
[0017]图3显示透射电镜下给药组Tu212细胞内出现典型双层膜结构自噬体。
[0018]图4显示激光共聚焦下尼拉帕尼诱导Tu212细胞产生细胞自噬。
[0019]图5显示Western-blot检测自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I表达水平。
[0020]图6显示抑制自噬增强尼拉帕尼对Tu212细胞杀伤。
[0021]图7显示抑制自噬增强尼拉帕尼对Tu212细胞DNA损伤。
[0022]图8显示抑制自噬损伤Tu212细胞同源重组修复(HR)。
具体实施方式：
[0023]实施例1：尼拉帕尼显著抑制肿瘤细胞增殖
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种治疗头颈部肿瘤的增效组合药物，其特征在于，所述组合物由一种或多种细胞自噬抑制剂和尼拉帕尼组成。2.按权利要求1所述的治疗头颈部肿瘤的增效组合药物，其特征在于，所述的细胞自噬抑制剂选自3-甲基腺嘌呤(3-MA)、LY294002、放线菌酮、巴伐洛霉素A1、氯喹(Chloroquine)、羟基氯喹。3.按权利要求1所述的治疗头颈部肿瘤的增效组合药物，其特征在于，所述的细胞自噬抑制剂是氯喹(Chloroquine)。4.按权利要求1所述的治疗头颈部肿瘤的增效组合药物，其特征在于，所述的尼拉帕尼(Niraparib)是第三...

【专利技术属性】
技术研发人员：纪云翔，李力，赵骞，
申请(专利权)人：复旦大学附属华山医院，
类型：发明
国别省市：