一种半红树植物黄槿的组织培养方法技术

本发明专利技术公开了一种半红树植物黄槿的组织培养方法，属于植物组织培养领域。该方法包括：(1)外植体选择与消毒：以幼嫩的黄槿茎尖作为外植体，消毒处理；(2)愈伤组织形成：将消毒后的黄槿茎尖接入诱导培养基，诱导生成愈伤组织；(3)丛生芽诱导形成：将愈伤组织转接到分化培养基中，诱导形成丛生芽；(4)丛生芽继代培养：丛生芽诱导至平均高度达到1

【技术实现步骤摘要】
一种半红树植物黄槿的组织培养方法


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，尤其涉及一种半红树植物黄槿的组织培养方法。

技术介绍

[0002]黄槿(学名：Hibiscus tiliaceus Linn.)是锦葵科、木槿属常绿灌木或乔木，分布于中国、越南、柬埔寨、老挝、缅甸、印度、印度尼西亚、马来西亚及菲律宾等热带国家；在中国分布于台湾、广东和福建等省。它以观叶、观花为主。黄槿的花期全年，以夏季最盛。可为行道树及海岸绿美化植栽。多生于滨海地区，为海岸防沙、防潮、防风之优良半红树植物树种。
[0003]目前，黄槿主要采用播种、扦插方式进行栽培，播种需要采种、晾种以及筛选优良种子等，步骤繁琐且种子萌发率极低；而扦插相对于播种不需要收获种子和筛选良种等过程，但扦插通常采用半木质化的枝条，嫩枝往往被丢弃，对环境不友好；此外，扦插一般在3－6月进行，易受季节影响。黄槿作为防护植物使用，需求量大并且对于成活率要求也比较高，但是迄今为止，相关黄槿组织培养技术的报道极少。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种半红树植物黄槿的组织培养方法，以解决上述现有技术存在的问题，通过组织培养能快速得到大量的黄槿组培苗，成活率高，能够满足滨海地区防护林种植的需求。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供一种半红树植物黄槿的组织培养方法，包括以下步骤：
[0007](1)外植体选择与消毒：以幼嫩的黄槿茎尖作为外植体，并用自来水水洗干净后进行消毒处理；
[0008](2)愈伤组织形成：将消毒后的黄槿茎尖接入诱导培养基，诱导生成愈伤组织；所述诱导培养基为2/3MS培养基+1.5
‑
3.0mg/L 6
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BA+0.15
‑
0.30mg/L NAA+25
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32g/L蔗糖+4.5
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8.5g/L琼脂，pH6.0；
[0009](3)丛生芽诱导形成：将所得愈伤组织转接到分化培养基中，诱导丛生芽分化；所述分化培养基为2/3MS培养基+1.5
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3.5mg/L 6
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BA+0.05
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0.15mg/L NAA+25
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32g/L蔗糖+4.5
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8.5g/L琼脂，pH6.0；
[0010](4)丛生芽继代培养：将单个丛生芽转接到继代培养基中，增殖培养；所述继代培养基为1/2MS培养基+1.0
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3.0mg/L 6
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BA+0.05
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0.15mg/L NAA+25
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32g/L蔗糖+4.5
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8.5g/L琼脂，pH6.0；
[0011](5)根诱导形成：将继代培养成熟的芽转接到生根培养基中诱导根的分化；所述生根培养基为1/2MS培养基+0.1
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0.5mg/L IBA+0.1
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0.5mg/L NAA+10
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30g/L蔗糖+4.5
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8.5g/L琼脂，pH6.0；
[0012](6)幼苗植株驯化：待组培苗长出7
‑
8片叶片，株高为5
‑
6cm时，放置在散射光下炼苗1
‑
2天，移栽到黄心土和泥炭土混合基质中驯化。
[0013]优选的是，步骤(1)中，用自来水把外植体冲洗干净后，放入75％酒精中3
‑
12s，无菌水冲洗3
‑
5次，再用0.1％HgCl2浸泡灭菌3
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5min，再次用无菌水冲洗5
‑
7次。
[0014]优选的是，步骤(2)中，愈伤组织诱导培养条件为：23
‑
25℃先暗培养3
‑
5天，再置于1500
‑
3000Lux光照培养12h和黑暗培养12h交替进行，培养14
‑
21天。
[0015]优选的是，步骤(3)中，诱导丛生芽分化的条件为：23
‑
25℃，1500
‑
3000Lux光照培养12h和黑暗培养12h交替进行，共培养17
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22天。
[0016]优先的是，步骤(4)中，丛生芽增殖培养的条件为：23
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25℃，1500
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3000Lux光照培养12h和黑暗培养12h交替进行，共培养21
‑
28天。
[0017]优选的是，步骤(5)中，诱导根生成的条件为：23
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25℃，每天1500
‑
3000Lux光照培养12h和黑暗培养12h交替进行，共培养23
‑
34天。
[0018]优选的是，步骤(6)中，黄心土和泥炭土按照1:1混合制备成混合基质，用600倍多菌灵进行喷施拌土，用塑料膜密封后暴晒灭菌一周，将步骤(5)的组培苗移栽到混合基质驯化，及时喷水并覆盖塑料膜保湿。苗上方覆盖单层遮阳网，一周后移除，培养20
‑
30天。
[0019]优选的是，控制温度为23
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25℃，空气湿度50
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60％，混合基质湿度80
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85％。
[0020]本专利技术公开了以下技术效果：
[0021]本专利技术公开的黄槿的组织培养方法，是以茎尖为外植体，主要通过优化组培过程中的诱导培养基、分化培养基以及生根培养基，经过大量试验证明：愈伤组织、分化芽以及根的生长对于培养基中无机盐以及植物激素的需求差异较大，同时经过优化的组织培养方法，只需100
‑
130天就可实现黄槿组培苗批量生产，并且移栽成活率可达到98.5％，能够满足滨海地区防护林造林的需求。
附图说明
[0022]图1为实施例2形成的愈伤组织；
[0023]图2为实施例2形成的叶；
[0024]图3为实施例2形成的根；
[0025]图4为实施例2组培苗准备移栽时的状态；
[0026]图5为实施例2移栽后28天黄槿生长状况。
具体实施方式
[0027]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0028]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0029]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种半红树植物黄槿的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体选择与消毒：以幼嫩的黄槿茎尖作为外植体，并用自来水水洗干净后进行消毒处理；(2)愈伤组织形成：将消毒后的黄槿茎尖接入诱导培养基，诱导生成愈伤组织；所述诱导培养基为2/3MS培养基+1.5
‑
3.0mg/L 6
‑
BA+0.15
‑
0.30mg/L NAA+25
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32g/L蔗糖+4.5
‑
8.5g/L琼脂，pH6.0；(3)丛生芽诱导形成：将所得愈伤组织转接到分化培养基中，诱导丛生芽分化；所述分化培养基为2/3MS培养基+1.5
‑
3.5mg/L 6
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BA+0.05
‑
0.15mg/L NAA+25
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32g/L蔗糖+4.5
‑
8.5g/L琼脂，pH6.0；(4)丛生芽继代培养：将单个丛生芽转接到继代培养基中，增殖培养；所述继代培养基为1/2MS培养基+1.0
‑
3.0mg/L 6
‑
BA+0.05
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0.15mg/LNAA+25
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32g/L蔗糖+4.5
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8.5g/L琼脂，pH6.0；(5)根诱导形成：将分化生成的芽转接到生根培养基中，诱导根分化，生成组培苗；所述生根培养基为1/2MS培养基+0.1
‑
0.5mg/L IBA+0.1
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0.5mg/L NAA+10
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18g/L蔗糖+4.5
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8.5g/L琼脂，pH6.0；(6)幼苗植株驯化：待组培苗长出7
‑
8片叶片，株高为5
‑
6cm时，放置在散射光下炼苗1
‑
2天，移栽到黄心土和泥炭土混合基质中驯化培养。2.如权利要求1所述的黄槿的组织培养方法，其特征在于，步骤(1)中，用自来水把外植体...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜照奎，杨党，李钧敏，
申请(专利权)人：台州学院，
类型：发明
国别省市：