用于调节τ蛋白表达的组合物制造技术

本文公开了用于降低τ蛋白mRNA和蛋白质表达的反义化合物和方法。这种方法、化合物和组合物可用于治疗、预防或改善τ蛋白相关疾病、病症和病状。病症和病状。

【技术实现步骤摘要】
用于调节
τ
蛋白表达的组合物
[0001]本申请是申请号为201480040726.6、申请日为2014年7月21日、专利技术名称为“用于调节τ蛋白表达的组合物”的中国专利技术专利申请的分案申请，原申请为国际申请号为PCT/US2014/047486的国家阶段申请，该国际申请要求申请日为2013年7月19日、申请号为61/856,551的美国申请，申请日为2013年9月18日、申请号为61/879,621的美国申请，申请日为2013年10月1日、申请号为61/885,371的美国申请，申请日为2014年6月19日、申请号为62/014,486的美国申请的优先权。
[0002]序列表
[0003]本申请正连同呈电子格式的序列表一起申请。序列表是提供为2014年7月17日建立的大小为916Kb的题为BIOL0227WOSEQ_ST 25.txt的文档。电子格式的序列表中的信息以全文引用的方式并入本文中。


[0004]提供用于降低τ蛋白mRNA和蛋白质在动物中的表达的组合物和方法。此种方法适用于通过抑制τ蛋白在动物中的表达来治疗、预防或改善神经退化性疾病，包括τ蛋白病变、阿尔茨海默病(Alzheimer
’
s Disease)、额颞叶痴呆(FTD)、FTDP
‑
17、进行性核上麻痹(PSP)、慢性创伤性脑病变(CTE)、皮质基底神经节退化(CBD)、癫痫和Dravet综合征(Dravet
’
s Syndrome)。
[0005]τ蛋白的主要功能在于结合且稳定化作为有丝分裂、胞质分裂和囊泡转运中涉及的重要细胞骨架结构组分的微管。τ蛋白见于多种组织中，但在神经元的轴索中特别丰富。在人类中，存在六种通过替代性拼接外显子2、3和10产生的τ蛋白同源异构体。在蛋白质的N末端处拼接外显子2和3导致包括0、1或2个含29个氨基酸的酸性域，并且分别称为0N、1N或2Nτ蛋白。这些域对τ蛋白功能的影响并不完全明确，但可在与质膜的相互作用中起作用。在C末端处包括外显子10导致包括由外显子10编码的微管结合域。因为在τ蛋白中其他地方存在3个微管结合域，所以此τ蛋白同源异构体(包括有外显子10)称为4Rτ蛋白，其中
‘
R
’
是指微管结合域的重复序列的数目。无外显子10的τ蛋白称为3Rτ蛋白。因为更多微管结合域(4R相较于3R)会增加与微管的结合，所以4Rτ蛋白假定会显著增加微管结合和装配。3R/4Rτ蛋白的比率受发育调控，其中胎儿组织仅表达3Rτ蛋白且成年人类组织表达近似相等含量的3R/4Rτ蛋白。偏离3R/4Rτ蛋白的正常比率为神经退化性FTDτ蛋白病变的特征。未知的是在成年动物中随后阶段改变3R/4Rτ蛋白比率将如何影响τ蛋白发病机制。
[0006]丝氨酸
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苏氨酸指导的磷酸化调控τ蛋白的微管结合能力。过度磷酸化促进τ蛋白自微管脱离。已描述τ蛋白的其他转译后修饰；然而，这些修饰的意义为不明确的。τ蛋白的磷酸化也受发育调控，其中胎儿组织中的磷酸化较高且成人中的磷酸化低得多。神经退化性病症的一个特征为τ蛋白磷酸化异常增加。
[0007]微管网络涉及在细胞内为维持细胞的形态和操作转运机构所需的许多重要过程(包括结构完整性)中。因为τ蛋白结合微管会使微管稳定，所以τ蛋白可能为一些这些过程的关键介体并且破坏神经退化性疾病中的正常τ蛋白可破坏一些这些关键细胞过程。
[0008]τ蛋白可在神经退化性综合征中重要的一个早期指示为认识到τ蛋白为阿尔茨海默病中的神经纤维内含物的关键组分。实际上，神经纤维内含物为过度磷酸化τ蛋白的聚集体。连同含有β淀粉状蛋白的斑块一起，神经纤维内含物为阿尔茨海默病的标志且与认知损害显著相关。AD中的95％τ蛋白累积物见于神经元过程中且称为神经炎性营养不良。此微管相关蛋白质变得自微管脱离且形成蛋白质的累积物所凭借的过程以及此如何与神经元毒性相关并未被充分了解。
[0009]神经元τ蛋白内含物不仅为阿尔茨海默病，而且也是额颞叶痴呆(FTD)、PSP和CBD的子组的病理学特征。τ蛋白与神经退化之间的关联是通过发现τ蛋白基因的突变会引起FTD的子组而得以巩固。这些遗传数据也已强调τ蛋白的3R:4R比率的重要性。引起FTD的许多τ蛋白突变导致τ蛋白拼接变化，其导致优先包括外显子10，并且因此导致4Rτ蛋白增加。总体τ蛋白含量为正常的。τ蛋白同源异构体变化或氨基酸变化或两者变化是否导致神经退化仍然未知。最新数据表明PSP也可与4R:3Rτ蛋白比率增加相关。
[0010]为帮助了解τ蛋白比率对神经退化的影响，已使用包括τ蛋白启动子和外显子10的侧接内含子序列的袖珍基因产生基于一个拼接τ蛋白突变(N279K)的小鼠模型。如同在人类中一样，相较于表达WTτ蛋白的转基因，此等小鼠显示4Rτ蛋白的含量增加，并且发展行为和运动异常以及聚集τ蛋白在脑和脊髓中累积。
[0011]蛋白质“τ蛋白”已与多种脑疾病相关联，这些疾病包括阿尔茨海默病、额颞叶痴呆、进行性核上麻痹、皮质基底神经节退化、拳击手型痴呆、与染色体相关联的帕金森氏症(parkinsonism)、Lytico
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Bodig病(Lytico
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Bodig disease)、缠结占优性痴呆(tangle
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predominant dementia)、神经节神经胶质瘤、神经节细胞瘤、脑膜血管瘤病、亚急性硬化性泛脑炎、铅毒脑病、结节性硬化、哈勒沃登
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施帕茨病(Hallervorden
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Spatz disease)、皮克氏病(Pick's disease)、嗜银颗粒疾病(argyrophilic grain disease)、皮质基底退化或额颞叶退化以及其他疾病。诸如AD的τ蛋白相关病症为老年人中最常见痴呆病因。AD影响全世界估计1500万人并且群体的40％超过85岁。AD的特征在于两种病理学标志：τ蛋白神经纤维内含物(NFT)和β淀粉状蛋白(Aβ)斑块。
[0012]当前缺乏可接受的用于治疗此种神经退化性疾病的选项。因此，本文的一个目标在于提供用于治疗此种疾病的方法。
[0013]专利技术概述
[0014]本文提供用于调节τ蛋白mRNA和蛋白质表达的方法、化合物和组合物。在某些实施例中，可用于调节τ蛋白mRNA和蛋白质表达的化合物为反义化合物。在某些实施例中，反义化合物为反义寡核苷酸。
[0015]在某些实施例中，可在细胞或组织中进行调节。在某些实施例中，细胞或组织处于动物体内。在某些实施例中，动物为人类。在某些实施例中，降低τ蛋白mRNA含量。在某些实施例中，降低τ蛋白含量。这种降低可以时间依赖性方式或以剂量依赖性方式出现。
[0016]还提供可用于预防、治疗和改善疾病、病症和病状的方法、化合物和组合物。在某些实施例中，这种τ蛋白相关疾病、病症和病状为神经退化性疾病。在某些实施例中，这种神经退化性疾病、病症和病状包括τ蛋白病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包含经修饰寡核苷酸的化合物，所述经修饰寡核苷酸由12至30个连接的核苷组成并且具有包含核碱基序列SEQ ID NO:20
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2443和SEQ ID NO:2478
‑
2483中任一者的至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19或至少20个连续核碱基的核碱基序列。2.如权利要求1所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸具有包含所述核碱基序列SEQ ID NO:446、313、321、1634和2309中任一者的至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19或至少20个连续核碱基的核碱基序列。3.如权利要求1所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸具有包含SEQ ID NO:446的至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19或至少20个连续核碱基的核碱基序列。4.如权利要求1所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸具有包含SEQ ID NO:313的至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19或至少20个连续核碱基的核碱基序列。5.如权利要求1所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸具有包含SEQ ID NO:321的至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19或至少20个连续核碱基的核碱基序列。6.如权利要求1所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸具有包含SEQ ID NO...

【专利技术属性】
技术研发人员：H，
申请(专利权)人：比奥根MA公司，
类型：发明
国别省市：