一种多肽偶联药物化合物及其制备与应用制造技术

本发明专利技术涉及一种多肽偶联药物化合物及其制备与应用。所述多肽偶联药物化合物结构如式(I)所示。本发明专利技术化合物通过构建具有靶向性的无侧链保护基团的环肽，使其通过化学键与有效抗肿瘤药物分子结合制得，操作过程反应条件较为温和，一次合成成功率高，纯度较高，该化合物具有较好抗肿瘤活性，为制备新型抗肿瘤靶向多肽药物偶联药物提供了新的方案。肽药物偶联药物提供了新的方案。肽药物偶联药物提供了新的方案。

【技术实现步骤摘要】
一种多肽偶联药物化合物及其制备与应用
(一)

[0001]本专利技术涉及一种多肽偶联药物(PDC)化合物GD
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H
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DOX及其制备方法，以及其在制备抗肿瘤靶向多肽药物偶联药物中的应用。
(二)
技术介绍

[0002]阿霉素(Doxorubicin，DOX)是一种广谱抗肿瘤药物，可以嵌入DNA中并抑制核酸合成，从而导致肿瘤细胞凋亡。但是，DOX不能区分肿瘤细胞和体内正常细胞，这可能会导致严重的副作用。而与传统的小分子抗肿瘤药物相比，PDC是一种新型的结合药物，具有很好的靶向性，在水中具有良好的溶解性。
(三)
技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种基于含RGD序列的环肽构建及其与DOX药物分子结合生成一种多肽偶联药物(PDC)化合物GD
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DOX及其制备方法，以及其在制备抗肿瘤靶向多肽药物偶联药物中的应用。
[0004]本专利技术采用的技术方案是：
[0005]一种多肽偶联药物化合物(GD
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DOX)，结构如下式所示：
[0006][0007]本专利技术还涉及所述多肽偶联药物化合物的制备方法，所述方法包括：环肽化合物1先切去Boc保护基生成化合物2，化合物2与琥珀酸酐反应生成端基羧基的酰胺保护基化合物3，化合物3经反应生成Boc保护的化合物4，化合物4脱Boc生成化合物5，最后化合物5与DOX的盐酸盐反应，在氮气氛围下暗室中反应完全后，再经分离纯化得到式(I)的多肽偶联药物化合物。
[0008]涉及反应式如下：
[0009][0010]具体的，所述方法如下：化合物1溶于盐酸二氧六环溶液中切去Boc保护基，待反应完全用冰乙醚使产物析出，并用展开剂为二氯甲烷/甲醇(DCM/MeOH)＝20∶1的制备型薄层色谱(PTLC)分离纯化得化合物2；化合物2在N,N
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二甲基甲酰胺(DMF)和N,N
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二异丙基乙胺(DIEA)反应液中与琥珀酸酐反应，反应完后用乙酸乙酯和水萃取，分离有机相，分别用10ml 1N HCl，10ml饱和氯化钠洗涤，并用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到化合物3；化合物3在1
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乙基
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3(3
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二甲基丙胺)碳二亚胺(EDCI)、1
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羟基苯并三唑(HOBT)和DIEA反应液中与氨基甲酸叔丁酯盐酸盐反应，反应完后，用乙酸乙酯和水萃取，分离有机相，再次分别用10ml 1N HCl，10ml饱和氯化钠洗涤，并用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到化合物4；化合物4在0℃下，在95％的三氟乙酸(TFA)溶液中脱Boc，反应完后用冰乙醚使产物析出，过滤，用乙醚洗涤三次后真空干燥，通过反向制备色谱进行纯化得到化合物5；化合物5最后在DMF、甲醇(MeOH)混合溶液中与DOX的盐酸盐反应，在氮气氛围下暗室中反应完全后，用水稀释并通过反向制备色谱进一步纯化冻干得到PDC化合物。
[0011]本专利技术还涉及制所述多肽偶联药物化合物的前体化合物，其结构如下式之一所示：
[0012][0013][0014]将得到的PDC化合物GD
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DOX(I)的靶向性和抗肿瘤活性做了检测，通过共聚焦荧光显微镜观察GD
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DOX对整联蛋白αvβ3高表达细胞系A549和低表达细胞系Hela的细胞荧光成像实验来证实其靶向性。通过HeLa细胞的抗肿瘤活性MTT实验表明，GD
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DOX(I)对整联蛋白αvβ3过表达细胞系如A549具有良好的靶向和抑制活性，且GD
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DOX(I)对A549细胞的毒性显示出了很好的剂量依赖性。
[0015]本专利技术还涉及所述的多肽偶联药物化合物在制备抗肿瘤靶向多肽药物偶联药物中的应用。
[0016]具体的，所述肿瘤为肺癌。
[0017]本专利技术的有益效果主要体现在：本专利技术化合物通过构建具有靶向性的无侧链保护基团的环肽，使其通过化学键与有效抗肿瘤药物分子结合制得，操作过程反应条件较为温和，一次合成成功率高，纯度较高，该化合物具有较好抗肿瘤活性，为制备新型抗肿瘤靶向多肽药物偶联药物提供了新的方案。
(四)附图说明
[0018]图1为化合物1的核磁氢谱；
[0019]图2为化合物1的碳谱；
[0020]图3为化合物(I)的液相谱图；
[0021]图4为化合物(I)的质谱；
[0022]图5为化合物2的氢谱；
[0023]图6为化合物3的氢谱；
[0024]图7为化合物4的氢谱；
[0025]图8为化合物5的氢谱；
[0026]图9为化合物(I)与抗肿瘤药物DOX的靶向性比较的细胞荧光成像图；
[0027]图10为化合物(I)与抗肿瘤药物DOX的抗肿瘤活性比较。
(五)具体实施方式
[0028]下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此：
[0029]实施例1：化合物1的制备
[0030][0031][0032]如式V
a
所示含烯烃的色氨酸线性多肽(0.2mmol)，对苯醌(0.4mmol)，Pd(OAc)2(0.02mmol)称于10mL规格的圆底烧瓶中，加入10mL 1,4二氧六环/AcOH＝3：1溶液。盖上胶塞反应物加热至80摄氏度24小时。将40mL乙酸乙酯和20ml水加入到反应液中。有机层分别用20mL 1N盐酸，20mL饱和碳酸氢钠，20mL饱和氯化钠溶液洗涤，并用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到的粗产物通过硅胶柱或制备硅胶板进一步纯化(乙酸乙酯：石油醚＝4：1，R
f
＝0.2)，获式1所示的化合物纯品80.7mg(收率40％)，其核磁氢谱、碳谱参见图1～图2。
[0033]1H NMR(600MHz,DMSO)δ11.43(s,1H),8.20(s,1H),8.15(d,J＝8.9Hz,1H),7.94(s,1H),7.89(d,J＝7.2Hz,1H),7.63(d,J＝15.9Hz,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.34(d,J＝8.2Hz,1H),7.22(t,J＝7.5Hz,1H),7.04(t,J＝7.6Hz,1H),6.82(d,J＝9.0Hz,1H),6.70(d,J＝15.4Hz,1H),6.40(d,J＝15.9Hz,1H),6.34(dd,J＝17.3,1.4Hz,1H),4.78
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4.68(m,2H),4.55(d,J＝8.3Hz,1H),4.47
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4.42(m,1H),4.32(dd,J＝13.6,7.5Hz,1H),3.79(s,1H),3.69(s,3H),3.65(d,J＝6.0Hz,1H),3.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽偶联药物化合物，结构如式(I)所示：2.制备权利要求1所述多肽偶联药物化合物的方法，所述方法包括：环肽化合物1先切去Boc保护基生成化合物2，化合物2与琥珀酸酐反应生成端基羧基的酰胺保护基化合物3，化合物3经反应生成Boc保护的化合物4，化合物4脱Boc生成化合物5，最后化合物5与DOX的盐酸盐反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱勍，晏郑情，王鹏，刘江，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：