双特异性抗体及其用途制造技术

本公开涉及双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段特异性结合具有不同结合亲和力的两种不同抗原。异性结合具有不同结合亲和力的两种不同抗原。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】双特异性抗体及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年1月28日提交的美国临时专利申请序列号62/797,818的优先权，其全部内容通过引用并入本文。


[0003]本公开涉及双特异性抗体或其抗原结合片段。

技术介绍

[0004]双特异性抗体是可以同时结合两种不同类型的抗原或两种不同表位的人工蛋白。这种双重特异性开辟了广泛的应用，包括将T细胞重定向至肿瘤细胞、同时阻断两个不同的信号传导途径、双重靶向不同的疾病介体、以及将负载物(payload)递送至靶位点。卡妥索单抗(catumaxomab)(抗EpCAM和抗CD3)和博纳吐单抗(blinatumomab)(抗CD19和抗CD3)的批准已成为双特异性抗体的开发中的重要里程碑。
[0005]由于双特异性抗体具有各种应用，因此需要继续开发基于双特异性抗体的各种治疗剂。

技术实现思路

[0006]本公开涉及不平衡的双特异性抗体或抗原结合片段，其中双特异性抗体或抗原结合片段以不同的结合亲和力特异性结合两种不同的抗原。
[0007]一方面，本公开提供一种结合CD3的抗体或其抗原结合片段，其包含：重链可变区(VH)，其包含互补决定区(CDR)1、2、和3，其中VH CDR1区包含与所选VH CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VH CDR2区包含与所选VH CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VH CDR3区包含与所选VH CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含CDR 1、2、和3，其中VL CDR1区包含与所选VL CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VL CDR2区包含与所选VL CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VL CDR3区包含与所选VL CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列。
[0008]在一些实施方案中，所选VH CDR 1、2、3氨基酸序列分别如SEQ ID NO:22
‑
24所示，所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别如以下所示：
[0009]RASSSVSYI X1(SEQ ID NO:71)，
[0010]ATSNLAS(SEQ ID NO:29)，和
[0011]X2QWTSX3PX4T(SEQ ID NO:72)。
[0012]在一些实施方案中，X1是His、Leu、Arg、Pro、Asn、Trp、Ala、Gly、Glu、Thr、Val、Asp、Ser、Met或Asn；X2是Gln、Val、Tyr、Leu、Gly、His、Met、或Pro；X3是Asn、Ser、Leu、Cys、Pro、Thr、Val、Gly、Gln、Ala、Tyr、或Phe，和X4是Pro、Val、Ala、Thr、或Gln。
[0013]在一些实施方案中，X1是Thr，X2是Gln，X3是Asn，和X4是Pro。
[0014]在一些实施方案中，抗体或抗原结合片段特异性结合人CD3。
[0015]在一些实施方案中，抗体或抗原结合片段是双特异性抗体。
[0016]一方面，本公开提供结合CD20的抗体或其抗原结合片段，其包含：重链可变区(VH)，其包含互补决定区(CDR)1、2、和3，其中VH CDR1区包含与所选VH CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VH CDR2区包含与所选VH CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VH CDR3区包含与所选VH CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含CDR 1、2、和3，其中VL CDR1区包含与所选VL CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VL CDR2区包含与所选VL CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VL CDR3区包含与所选VL CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列。
[0017]在一些实施方案中，所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别如SEQ ID NO:16
‑
18所示，所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别如以下所示：
[0018]RASSSVSYI X1(SEQ ID NO:71)，
[0019]ATSNLAS(SEQ ID NO:29)，和
[0020]X2QWTSX3PX4T(SEQ ID NO:72)。
[0021]在一些实施方案中，X1是His、Leu、Arg、Pro、Asn、Trp、Ala、Gly、Glu、Thr、Val、Asp、Ser、Met或Asn；X2是Gln、Val、Tyr、Leu、Gly、His、Met、或Pro；X3是Asn、Ser、Leu、Cys、Pro、Thr、Val、Gly、Gln、Ala、Tyr、或Phe；和X4是Pro、Val、Ala、Thr、或Gln。
[0022]在一些实施方案中，X1是Thr，X2是Gln，X3是Asn，和X4是Pro。
[0023]在一些实施方案中，抗体或抗原结合片段特异性结合人CD20。
[0024]在一些实施方案中，抗体或抗原结合片段是双特异性抗体。
[0025]一方面，本公开提供一种结合CD55的抗体或其抗原结合片段，其包含：重链可变区(VH)，其包含互补决定区(CDR)1、2、和3，其中VH CDR1区包含与所选VH CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VH CDR2区包含与所选VH CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VH CDR3区包含与所选VH CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含CDR 1、2、和3，其中VL CDR1区包含与所选VL CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VL CDR2区包含与所选VL CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VL CDR3区包含与所选VL CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列。
[0026]在一些实施方案中，所选VH CDR1、2、3氨基酸序列分别如以下所示：
[0027]GYGMS(SEQ ID NO:47)，
[0028]TIX1SGGSYTYYSDSVKG(SEQ ID NO:73)，
[0029]R X2G X3LYYYLMDY(SEQ ID NO:69)。
[0030]在一些实施方案中，所选VL CDR 1、2、3氨基酸序列分别如SEQ ID NO:53
‑
55或SEQ ID NO:59
‑
61所示，
[0031]在一些实施方案中，X1是Asn、Ser、Cys、Gly、Val、Glu、Trp、Met、Tyr、Leu、或Pro；X2是Asn、Lys、Thr、Val、Tyr、Leu、Phe、Met、Ala、His、Gln、Ile、或Glu；和X3是Thr、Met或Gly。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种结合CD3的抗体或其抗原结合片段，包含：重链可变区(VH)，其包含互补决定区(CDR)1、2、和3，其中VH CDR1区包含与所选VH CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VH CDR2区包含与所选VH CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VH CDR3区包含与所选VH CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含CDR 1、2、和3，其中VL CDR1区包含与所选VL CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VL CDR2区包含与所选VL CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VL CDR3区包含与所选VL CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，其中所述所选VH CDR 1、2、3氨基酸序列分别如SEQ ID NO:22
‑
24所示，所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别如以下所示：RASSSVSYIX1(SEQ ID NO:71)，ATSNLAS(SEQ ID NO:29)，和X2QWTSX3PX4T(SEQ ID NO:72)，其中X1是His、Leu、Arg、Pro、Asn、Trp、Ala、Gly、Glu、Thr、Val、Asp、Ser、Met或Asn，X2是Gln、Val、Tyr、Leu、Gly、His、Met或Pro，X3是Asn、Ser、Leu、Cys、Pro、Thr、Val、Gly、Gln、Ala、Tyr或Phe，和X4是Pro、Val、Ala、Thr或Gln。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中X1是Thr，X2是Gln，X3是Asn，和X4是Pro。3.根据权利要求1
‑
2中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段特异性结合人CD3。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段是双特异性抗体。5.一种结合CD20的抗体或其抗原结合片段，包含：重链可变区(VH)，其包含互补决定区(CDR)1、2、和3，其中VH CDR1区包含与所选VH CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VH CDR2区包含与所选VH CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VH CDR3区包含与所选VH CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含CDR 1、2、和3，其中VL CDR1区包含与所选VL CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VL CDR2区包含与所选VL CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VL CDR3区包含与所选VL CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，其中所述所选VH CDR 1、2、3氨基酸序列分别如SEQ ID NO:16
‑
18所示，所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别如以下所示：RASSSVSYIX1(SEQ ID NO:71)，ATSNLAS(SEQ ID NO:29)，和X2QWTSX3PX4T(SEQ ID NO:72)，其中X1是His、Leu、Arg、Pro、Asn、Trp、Ala、Gly、Glu、Thr、Val、Asp、Ser、Met或Asn，
X2是Gln、Val、Tyr、Leu、Gly、His、Met、或Pro，X3是Asn、Ser、Leu、Cys、Pro、Thr、Val、Gly、Gln、Ala、Tyr、或Phe，和X4是Pro、Val、Ala、Thr、或Gln。6.根据权利要求5所述的抗体或其抗原结合片段，其中X1是Thr，X2是Gln，X3是Asn，和X4是Pro。7.根据权利要求5
‑
6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段特异性结合人CD20。8.根据权利要求5
‑
7中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段是双特异性抗体。9.一种结合CD55的抗体或其抗原结合片段，包含：重链可变区(VH)，其包含互补决定区(CDR)1、2、和3，其中VH CDR1区包含与所选VH CDR1氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，VH CDR2区包含与所选VH CDR2氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列，和VH CDR3区包含与所选VH CDR3氨基酸序列为至少80％同一性的氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含CDR 1、2、和3，其中VL CDR1区包含与所选VL CDR1氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，VL CDR2区包含与所选VL CDR2氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，和VL CDR3区包含与所选VL CDR3氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中所述所选VH CDR 1、2、3氨基酸序列分别如以下所示：GYGMS(SEQ ID NO:47)，TIX1SGGSYTYYSDSVKG(SEQ ID NO:73)，R X2G X3LYYYLMDY(SEQ ID NO:69)，其中所述所选VL CDR1、2、3氨基酸序列分别如SEQ ID NO:53
‑
55或SEQ ID NO:59
‑
61所示，其中X1是Asn、Ser、Cys、Gly、Val、Glu、Trp、Met、Tyr、Leu、或Pro，X2是Asn、Lys、Thr、Val、Tyr、Leu、Phe、Met、Ala、His、Gln、Ile、或Glu，和X3是Thr、Met或Gly。10.根据权利要求9所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述所选VL CDR 1、2、3氨基酸序列分别如SEQ ID NO:53
‑
55所示。11.根据权利要求9所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述所选VL CDR 1、2、3氨基酸序列分别如SEQ ID NO:59
‑
61所示。12.根据权利要求9
‑
11中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中X1是Ser，X2是Lys，并且X3是Thr。13.根据权利要求9
‑
12中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段特异性结合人CD55。14.根据权利要求9
‑
13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段是双特...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘跃，蔡文燕，史家栋，贾哲君，
申请(专利权)人：AB诊疗公司，
类型：发明
国别省市：