本申请涉及检测设备技术领域，尤其涉及一种数字微流控芯片、包括该数字微流控芯片的数字微流控芯片系统、包括该数字微流控芯片系统的酶联免疫检测系统及采用酶联免疫检测系统的检测方法。上述酶联免疫检测系统，包括数字微流控芯片系统、驱动控制单元和光学检测系统。驱动控制单元用于驱动数字微流控芯片系统内的液体流动，光学检测系统用于检测检测点的光学性质。上述酶联免疫检测系统及检测方法，可以实现ELISA检测反应。酶联免疫检测系统具有较高的集成度且与现有技术相比具有制备方法简单、自动化程度高、成本低且灵活度高等优势。可以大大的减少在进行ELISA流程操作时的人为误差、人工时间成本和试剂的消耗，同时提高了检测的准确率和效率。高了检测的准确率和效率。高了检测的准确率和效率。
【技术实现步骤摘要】
数字微流控芯片、数字微流控芯片系统、酶联免疫检测系统及方法
[0001]本专利技术涉及检测设备
，尤其涉及一种数字微流控芯片、数字微流控芯片系统、酶联免疫检测系统及方法。
技术介绍
[0002]酶联免疫检测方法(Enzyme Immunoassay,ELISA)是目前应用最为广泛的一种免疫分析方法，目前临床和实验室通常使用96孔板作为该检测反应的载体，先对孔板进行一抗的吸附、封闭和清洗等操作，完成一抗的包埋。然后加入待测样品或者含有特定抗原的标准品，孵育一段时间后清洗多余抗原，再加入带有特异性酶标记的二抗，再孵育一段时间，让二抗与抗原充分结合后再清洗掉多余的二抗。最后，加入底物进行显色反应，实现信号的检测。由此可见常规ELISA检测所需人工密集性操作十分繁琐，且对试剂消耗量较大，存在较高的误操作风险。
[0003]因此很多研究人员引入微流控芯片作为ELISA的反应载体，用以代替96孔板。目前多是使用连续型、含有多种微通道结构的微流控芯片，将目标试剂的操控、抗体-抗原结合反应以及反应结果的检测等ELISA的全流程集成于微流控芯片上。
[0004]传统的基于微流通道结构的ELISA微流控芯片，主要通过软光刻或者注塑等方法进行制作。若要进行多指标联检的ELISA微流控芯片的开发，上述芯片将具有较为复杂的空间微流通道结构，应用软光刻或者注塑工艺加工难度很大，大大提高了ELISA的检测成本。
技术实现思路
[0005]鉴于此，有必要提供一种能够进行多指标联检的制造方法简单的数字微流控芯片、数字微流控芯片系统、酶联免疫检测系统及方法。
[0006]一种数字微流控芯片，包括待测样本储液区组、阴性对照储液区、阳性对照储液区、基底试剂储液区、终止试剂储液区、洗涤液储液区、缓冲液储液区、抗体储液区、废液区和反应区；
[0007]所述反应区包括至少三个检测点，所述检测点分别为待测样本检测点组、阴性对照检测点和阳性对照检测点；
[0008]所述待测样本储液区组和所述待测样本检测点组连通；
[0009]所述阴性对照储液区和所述阴性对照检测点连通；
[0010]所述阳性对照储液区和所述阳性对照检测点连通；
[0011]所述基底试剂储液区、所述终止试剂储液区、所述洗涤液储液区、所述缓冲液储液区、所述抗体储液区、所述废液区分别和全部所述检测点连通。
[0012]在一个实施例中，所述反应区包括相对设置的第一侧和第二侧，以及相对设置的第三侧和第四侧；
[0013]所述待测样本储液区组、所述阴性对照储液区、所述阳性对照储液区和所述废液
区均位于所述反应区的第一侧；
[0014]所述洗涤液储液区位于所述反应区的第二侧；
[0015]所述缓冲液储液区和所述抗体储液区位于所述反应区的第三侧；
[0016]所述基底试剂储液区和所述终止试剂储液区位于所述反应区的第四侧。
[0017]在一个实施例中，所述待测样本储液区组包括第一待测样本储液区、第二待测样本储液区和第三待测样本储液区；
[0018]所述待测样本检测点组包括第一待测样本检测点、第二待测样本检测点和第三待测样本检测点；
[0019]所述第一待测样本储液区和所述第一待测样本检测点连通；
[0020]所述第二待测样本储液区和所述第二待测样本检测点连通；
[0021]所述第三待测样本储液区和所述第三待测样本检测点连通。
[0022]在一个实施例中，所述第一待测样本检测点、所述第二待测样本检测点、所述第三待测样本检测点、所述阴性对照检测点和所述阳性对照检测点呈矩阵排列。
[0023]一种数字微流控芯片系统，包括上盖和上述数字微流控芯片，所述上盖和所述数字微流控芯片封装设置；
[0024]所述上盖开设有待测样本进样孔、阴性对照进样孔、阳性对照进样孔、基底试剂进样孔、终止试剂进样孔、洗涤液进样孔、缓冲液进样孔、抗体进样孔和一抗包被检测区；
[0025]所述待测样本进样孔和所述待测样本储液区组对应设置，所述阴性对照进样孔和所述阴性对照储液区对应设置，所述阳性对照进样孔和所述阳性对照储液区对应设置，所述基底试剂进样孔和所述基底试剂储液区对应设置，所述终止试剂进样孔和所述终止试剂储液区对应设置，所述洗涤液进样孔和所述洗涤液储液区对应设置，所述缓冲液进样孔和所述缓冲液储液区对应设置，所述抗体进样孔和所述抗体储液区对应设置，所述一抗包被检测区和所述检测点对应设置。
[0026]在一个实施例中，所述上盖的制备方法如下：
[0027]将所述上盖的导电面的一抗包被检测区用遮挡片进行遮挡；
[0028]在所述上盖的导电面制备疏水层；
[0029]移除所述一抗包被检测区上所述遮挡片；
[0030]在所述一抗包被检测区处捕获一抗进行修饰。
[0031]在一个实施例中，在所述一抗包被检测区处捕获一抗进行修饰的方法如下：
[0032]将所述一抗包被检测区按照每列一种目标抗原所对应的一抗进行修饰，在4℃的环境下静止12-18小时，然后应用清洗缓冲液清洗；
[0033]再加入封闭缓冲液室温条件下静止2小时，再采用清洗缓冲液清洗后，即得到带有一抗修饰的所述上盖。
[0034]一种酶联免疫检测系统，包括上述数字微流控芯片系统、驱动控制单元和光学检测系统，所述驱动控制单元用于驱动所述数字微流控芯片系统内的液体流动，所述光学检测系统用于检测检测点的光学信号。
[0035]一种采用上述酶联免疫检测系统的检测方法，包括以下步骤：
[0036]向所述数字微流控芯片的对应储液区分别加入所需体积的待测样本、阳性对照、阴性对照、基底试剂、终止试剂、缓冲液、抗体和洗涤液；
[0037]定量分配所述缓冲液，生成缓冲液液滴，转移至全部所述检测点；
[0038]定量分配阳性对照，产生阳性对照液滴，转移至阳性对照检测点，所述阳性对照液滴与所述缓冲液液滴混合组成阳性对照反应液液滴；
[0039]定量分配阴性对照，产生阴性对照液滴，转移至阴性对照检测点，所述阴性对照液滴与所述缓冲液液滴混合组成阴性对照反应液液滴；
[0040]定量分配待测样本，产生待测样本液滴，转移至待测样本检测点组，所述待测样本液滴与所述缓冲液液滴混合组成待测样本反应液液滴，静置；
[0041]将阳性对照反应液液滴、阴性对照反应液液滴和待测样本反应液液滴均依次转移至废液区形成废液；
[0042]定量分配洗涤液，产生洗涤液液滴，清洗阳性对照反应液液滴经过的路径、阴性对照反应液液滴经过的路径和待测样本反应液液滴经过的路径以及全部所述检测点，将使用后的洗涤液液滴转移至废液区；
[0043]定量分配抗体，产生抗体液滴，转移至全部所述检测点，静置；
[0044]定量分配洗涤液，产生洗涤液液滴，清洗全部所述检测点，将使用后的洗涤液液滴转移至废液区；
[0045]定量分配基底试剂，产生基底试剂液滴，转本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种数字微流控芯片，其特征在于，包括待测样本储液区组、阴性对照储液区、阳性对照储液区、基底试剂储液区、终止试剂储液区、洗涤液储液区、缓冲液储液区、抗体储液区、废液区和反应区；所述反应区包括至少三个检测点，所述检测点分别为待测样本检测点组、阴性对照检测点和阳性对照检测点；所述待测样本储液区组和所述待测样本检测点组连通；所述阴性对照储液区和所述阴性对照检测点连通；所述阳性对照储液区和所述阳性对照检测点连通；所述基底试剂储液区、所述终止试剂储液区、所述洗涤液储液区、所述缓冲液储液区、所述抗体储液区、所述废液区分别和全部所述检测点连通。2.如权利要求1所述的数字微流控芯片，其特征在于，所述反应区包括相对设置的第一侧和第二侧，以及相对设置的第三侧和第四侧；所述待测样本储液区组、所述阴性对照储液区、所述阳性对照储液区和所述废液区均位于所述反应区的第一侧；所述洗涤液储液区位于所述反应区的第二侧；所述缓冲液储液区和所述抗体储液区位于所述反应区的第三侧；所述基底试剂储液区和所述终止试剂储液区位于所述反应区的第四侧。3.如权利要求1所述的数字微流控芯片，其特征在于，所述待测样本储液区组包括第一待测样本储液区、第二待测样本储液区和第三待测样本储液区；所述待测样本检测点组包括第一待测样本检测点、第二待测样本检测点和第三待测样本检测点；所述第一待测样本储液区和所述第一待测样本检测点连通；所述第二待测样本储液区和所述第二待测样本检测点连通；所述第三待测样本储液区和所述第三待测样本检测点连通。4.如权利要求3所述的数字微流控芯片，其特征在于，所述第一待测样本检测点、所述第二待测样本检测点、所述第三待测样本检测点、所述阴性对照检测点和所述阳性对照检测点呈矩阵排列。5.一种数字微流控芯片系统，其特征在于，包括上盖和如权利要求1-4任一项所述的数字微流控芯片，所述上盖和所述数字微流控芯片封装设置；所述上盖开设有待测样本进样孔、阴性对照进样孔、阳性对照进样孔、基底试剂进样孔、终止试剂进样孔、洗涤液进样孔、缓冲液进样孔、抗体进样孔和一抗包被检测区；所述待测样本进样孔和所述待测样本储液区组对应设置，所述阴性对照进样孔和所述阴性对照储液区对应设置，所述阳性对照进样孔和所述阳性对照储液区对应设置，所述基底试剂进样孔和所述基底试剂储液区对应设置，所述终止试剂进样孔和所述终止试剂储液区对应设置，所述洗涤液进样孔和所述洗涤液储液区对应设置，所述缓冲液进样孔和所述缓冲液储液区对应设置，所述抗体进样孔和所述抗体储液区对...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡思怡，马汉彬，苏阳，
申请(专利权)人：江苏液滴逻辑生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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