新型特异性结合多肽及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种针对靶标Swiss Prot Q16552的新型、特异性结合治疗性和/或诊断性多肽，和针对靶标Swiss Prot Q9NPF7的新型、特异性结合治疗性和/或诊断性多肽。此外，本发明专利技术涉及针对Swiss Prot Q16552和SwissProt Q9NPF7之一或两者的新型、特异性结合治疗性和/或诊断性多肽。本发明专利技术还涉及编码这种多肽的核酸分子及用于产生这种多肽和核酸分子的方法。此外，本发明专利技术涉及包含该多肽的组合物及这些多肽的治疗性和/或诊断性用途。这些多肽的治疗性和/或诊断性用途。

【技术实现步骤摘要】
新型特异性结合多肽及其用途

技术介绍

[0001]各种脂质运载蛋白的突变蛋白是一类快速扩张的治疗剂。事实上，可将脂质运载蛋白突变蛋白构建为对与野生型脂质运载蛋白的天然配体(例如白细胞介素
‑
17A或白细胞介素
‑
23)不同的靶标显示出高亲和力和特异性(如，WO 99/16873、WO 00/75308、WO 03/029463、WO 03/029471和WO 05/19256)。
[0002]A.白细胞介素
‑
17A
[0003]白细胞介素
‑
17A(IL
‑
17A，与IL
‑
17同义)是一种从T细胞的Th17系产生的细胞因子。IL
‑
17最初命名为“CTL
‑
相关抗原8”(CTLA
‑
8)(Rouvier等，J.Immunol,150 5445
‑
5556(1993)；Yao等Immunity,3:811
‑
821(1995))。随后克隆CTLA
‑
8的人等价物并命名为“IL
‑
17”(Yao等，J.Immunol,155(12):5483
‑
5486(1995)；Fossiez等，J.Exp.Med.,183(6):2593
‑
2603(1996))。
[0004]人IL
‑
17A(CTLA
‑
8，还命名为ILr/>‑
17，Swiss Prot Q16552)是具有17,000道尔顿Mr的糖蛋白(Spriggs等，J.Clin.Immunol,17:366
‑
369(1997))。IL
‑
17A既可以作为同二聚体IL
‑
17A/A存在也可以作为与同源IL
‑
17F复合以形成异二聚体的IL
‑
17A/F的异二聚体存在。IL
‑
17F(IL
‑
24,ML
‑
1)与IL
‑
17A具有55％的氨基酸同一性。IL
‑
17A和IL
‑
17F还具有相同的受体(IL
‑
17RA)，该受体在包括血管内皮细胞、外周T细胞、B细胞、成纤细胞、肺细胞、骨髓单核细胞和骨基质细胞的多种细胞上表达(Kolls等，Immunity,21:467
‑
476(2004)；Kawaguchi等，J.Allergy Clin.Immunol,114(6):1267
‑
1273(2004)；Moseley等，Cytokine Growth Factor Rev.,14(2):155
‑
174(2003))。已经鉴定了IL
‑
17的其它同源物(IL
‑
17B、IL
‑
17C、IL
‑
17D和IL
‑
17E)。这些其它家族成员与IL
‑
17A具有小于30％的氨基酸同一性(Kolls等，2004)。
[0005]IL
‑
17A主要由Th17细胞表达并在类风湿性关节炎(RA)患者的滑液中以升高的水平存在，并且已经显示其参与早期RA发展。IL
‑
17A也在多发性硬化(MS)患者的脑脊液中过表达。此外，IL
‑
17是TNF
‑
α和IL
‑
1的诱导剂，后者主要对骨质侵蚀和对受影响的患者的非常疼痛的后果负责(Lubberts E.(2008)Cytokine,41,84
‑
91页)。此外，IL
‑
17A的不恰当或过量产生与各种其它疾病和障碍的病理学相关，例如骨关节炎、骨植入物松动、急性移植排斥(Antonysamy等，(1999)J.Immunol,162,577
‑
584页；van Kooten等(1998)J.Am.Soc.Nephrol.,9，1526
‑
1534页)、败血病、败血症性或内毒素性休克、过敏、哮喘(Molet等，(2001)J.Allergy Clin.Immunol.,108，430
‑
438页)、骨质疏松、银屑病(Teunissen等(1998)J.Invest.Dermatol,111，645
‑
649页)、缺血、系统性硬化症(Kurasawa等，(2000)Arthritis Rheum.,43，2455
‑
2463页)、中风和其它炎症性障碍。
[0006]尽管已经描述了多种IL
‑
17A抑制剂，但由于发现了这种关键的促炎细胞因子，目前的方法不是最佳的，例如复杂哺乳动物细胞生产系统的必要性、对二硫键稳定性的依赖性、一些抗体片段聚集的趋势、有限的溶解度和最后但并非最不重要，即使当人源化时，这些IL
‑
17A抑制剂也可能引起不期望的免疫响应。因此，仍然需要开发具有IL
‑
17A结合亲和力的蛋白质，例如脂质运载蛋白突变蛋白。
[0007]B.白细胞介素
‑
23
[0008]白细胞介素
‑
23(也称为IL
‑
23)是由两个亚单位即p19和p40组成的异二聚体细胞因子(B.Oppmann等，Immunity 13,715(2000))。p19(Swiss Prot Q9NPF7，在本文中可互换地称为“IL
‑
23p19”)亚单位在结构上与IL
‑
6、粒细胞集落刺激因子(G
‑
CSF)和IL
‑
12的p35亚单位相关。IL
‑
23通过结合由IL
‑
23R和IL
‑
12β1组成的异二聚体受体来介导信号传导。由IL
‑
12β1和IL
‑
12β2组成的IL
‑
12受体共享IL
‑
12β1亚单位。最近已经描述了转基因p19小鼠展现了深度的系统性炎症和嗜中性粒细胞增多症(M.T.Wiekowski等，J Immunol166,7563(2001))。
[0009]已经报道人IL
‑
23促进T细胞，特别是记忆T细胞的增殖，并且可以有助于Th17细胞的分化和/或维持(D.M.Frucht,Sci STKE 2002Jan 8；2002(114):PE1)。
[0010]尽管已经描述了多种IL
‑
23的选择性抑制剂(通过结合p19亚单位)，但由于发现了这种关键的异二聚体细胞因子，这些现有的方法仍然具有许多严重的缺点，例如本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种以可检测的亲和力结合IL
‑
23p19和/或IL
‑
17A的脂质运载蛋白突变蛋白。2.根据权利要求1所述的突变蛋白，其中，所述突变蛋白是具有IL
‑
23p19结合特异性的人脂质运载蛋白2(hNGAL)突变蛋白，其中所述突变蛋白在对应于成熟hNGAL(SEQ ID NO:43)线性多肽序列的序列位置处包含十个或更多个以下氨基酸残基突变：Gln 28
→
His；Leu 36
→
Glu；Ala 40
→
Leu；Ile 41
→
Leu；Gln 49
→
Arg；Tyr 52
→
Thr；Asn 65
→
Asp；Ser 68
→
Arg；Leu 70
→
Glu；Arg 72
→
Gly；Lys 73
→
Ala或Val；Lys 75
→
Thr；Cys 76
→
Tyr或Arg；Asp 77
→
Lys；Trp 79
→
Gln或Arg；Arg 81
→
Gly；Cys 87
→
Ser；Asn 96
→
Gly；Lys 98
→
Glu；Tyr 100
→
Met；Leu 103
→
Met；Tyr 106
→
Phe；Asn 114
→
Asp；Met 120
→
Ile；Lys 125
→
Tyr；Ser 127
→
Tyr；Lys 134
→
Glu；和Cys 175
→
Ala。3.根据权利要求2所述的突变蛋白，其中：(a)所述突变蛋白能够以约1nM或更低的KD结合IL
‑
23p19；(b)所述突变蛋白与人IL
‑
23和小鼠IL
‑
23交叉反应；和/或(c)所述突变蛋白能够抑制IL
‑
23与其受体IL
‑
23R的结合。4.根据权利要求2所述的突变蛋白，其中，与所述成熟hNGAL线性多肽序列相比，所述突变蛋白包含下列氨基酸残基突变组之一：(a)Gln 28
→
His；Leu 36
→
Glu；Ala 40
→
Leu；Ile 41
→
Leu；Gln 49
→
Arg；Tyr 52
→
Thr；Asn 65
→
Asp；Ser 68
→
Arg；Leu 70
→
Glu；Arg 72
→
Gly；Lys 73
→
Ala；Lys 75
→
Thr；Cys 76
→
Tyr；Asp 77
→
Lys；Trp 79
→
Gln；Arg 81
→
Gly；Asn 96
→
Gly；Lys 98
→
Glu；Tyr 100
→
Met；Leu 103
→
Met；Tyr 106
→
Phe；Met 120
→
Ile；Lys 125
→
Tyr；Ser 127
→
Tyr；和Lys 134
→
Glu；(b)Gln 28
→
His；Leu 36
→
Glu；Ala 40
→
Leu；Gln 49
→
Arg；Tyr 52
→
Thr；Asn 65
→
Asp；Ser 68
→
Arg；Leu 70
→
Glu；Arg 72
→
Gly；Lys 73
→
Val；Lys 75
→
Thr；Cys 76
→
Arg；A...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：皮里斯制药有限公司，
类型：发明
国别省市：