本发明专利技术提供了一种二维液相色谱装置，其包括：切换阀、第一维色谱柱、第二维色谱柱、捕集柱、第一泵、第二泵、第一检测器、第二检测器、废液池和馏分收集器。所述切换阀为十通阀，具有1～10号位。本发明专利技术利用该二维液相色谱装置能够通过一次纯化获得两种高纯组分，由于目标组分是在系统内部切换，避免了变性，具有效率高、纯度高和自动化程度高的优点。本发明专利技术还提供了采用该装置从当归中提取欧前胡素和异欧前胡素的方法。的方法。的方法。
【技术实现步骤摘要】
一种二维液相色谱装置及采用该装置从当归中提取欧前胡素和异欧前胡素的方法
[0001]本专利技术涉及分析化学
，具体涉及一种二维液相色谱装置，以及采用该装置从当归中提取欧前胡素和异欧前胡素的方法。
技术介绍
[0002]当归(Radix Angelica Sinensis(Oliv.)Diels)，为伞形科植物当归的根，其性温，味甘、辛，是最常用的无毒药物，有补血活血、调经止痛、润肠通便等功效，为妇科之要药。近年来，关于当归中香豆素成分文献报道日益增多，其以呋喃香豆素结构类型为主，该类化合物对生长细胞具有调亡作用，可明显抑制肿瘤细胞增生，是值得深入研究的重要化合物。
[0003]欧前胡素和异欧前胡素，是当归中含有的呋喃香豆素类化合物，具有抗菌、平喘及抗过敏等作用。但是欧前胡素和异欧前胡素具有光敏性，在提取纯化贮存过程中要注意避光处理。目前，当归中香豆素类化合物的纯化一般使用柱色谱法，采用离线多步操作，即第一步纯化后，收集馏分，减压浓缩，加溶剂稀释样品，再上样到柱色谱，重复操作。这种常规的多步操作非常繁琐，每次转换色谱模式都需要富集处理一次样品，特别是正相模式与反相模式联用时，两者之间转换时需要处理得到干燥的样品，这对于欧前胡素和异欧前胡素这种光敏感样品是不利的。而且离线的多种色谱法联用试剂用量大，试剂容易挥发，对环境不友好，同时在操作过程中欧前胡素和异欧前胡素不可避免的发生降解。因此提供一种二维液相色谱装置，从当归中提取欧前胡素和异欧前胡素的方法是有实际意义的。
[0004]鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
[0005]本专利技术的第一目的在于提供一种二维液相色谱装置。
[0006]本专利技术的第二目的在于提供采用该装置从当归中提取欧前胡素和异欧前胡素的方法。
[0007]为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：
[0008]本专利技术提供了一种二维液相色谱装置，包括：切换阀、第一维色谱柱、第二维色谱柱、捕集柱、第一泵、第二泵、第一检测器、第二检测器、废液池和馏分收集器，其中，
[0009]所述第一泵的出口端通过管路连接第一维色谱柱的进口端，第一维色谱柱的出口端通过管路连接第一检测器的进口端，
[0010]所述切换阀为十通阀，具有1～10号位，所述1～10号位依次按顺时针方向排序，且沿十通阀周向均匀分布，所述切换阀的1号位通过管路连接第一检测器的出口端，切换阀的2号位通过管路与捕集柱进口端连接，切换阀的3号位通过管路与切换阀的8号位连接，切换阀的4号位通过管路与第二维色谱柱进口端连接，切换阀的5号位通过管路与捕集柱出口端连接，切换阀的6号位通过管路与废液池连接，切换阀的7号位通过管路与切换阀的10号位
连接，切换阀的9号位通过管路与第二泵出口端连接，
[0011]所述第二维色谱柱的出口端通过管路连接第二检测器的进口端，第二检测器的出口端通过管路连接馏分收集器，馏分收集器废液出口端通过管路与废液池连接。
[0012]优选地，所述切换阀有A和B两种工作位置，当切换阀处于位置A时，1号位与10号位相连，9号位与8号位相连，7号位与6号位相连，5号位与4号位相连，3号位与2号位相连；
[0013]当所述切换阀处于位置B时，切换阀1号位与2号位相连，3号位与4号位相连，5号位与6号位相连，7号位与8号位相连，9号位与10号位相连。
[0014]优选地，所述第一维色谱柱选自氨基、氰基、硅胶色谱柱中的任意一种；所述第二维色谱柱选自C18、C8、C4色谱柱中的任意一种；所述第一维色谱柱和第二维色谱柱内的填料粒径为10
‑
200μm；所述第一维色谱柱、第二维色谱柱为玻璃柱或不锈钢柱，其直径为20
‑
800mm；运行压力为1
‑
10MPa。
[0015]优选地，所述捕集柱的作用为通过产生真空环境，除去馏分中的溶剂。
[0016]优选地，所述第一检测器和第二检测器选自紫外
‑
可见光检测器、示差检测器、蒸发光检测器中的任意一种。
[0017]优选地，所述第一维色谱柱流动相为氯仿
‑
甲醇混合溶剂，其中氯仿与甲醇的体积比为5:1～3:1；目标组分的洗脱体积为柱体积的2～4倍体积；所述第二维色谱柱流动相为甲醇
‑
水混合溶剂，其中甲醇与水的体积比为2:1～4:1，目标组分的洗脱体积为柱体积的6～8倍体积；
[0018]优选地，所述第一维色谱柱与第二维色谱柱上样量均为装填填料量的千分之一至百分之一。
[0019]本专利技术还提供了使用所述色谱装置从当归中提取欧前胡素和异欧前胡素的方法，包括以下步骤：
[0020](1)当归香豆素的提取：将当归加热回流后，依次进行过滤除渣和减压浓缩，浓缩液经乙酸乙酯萃取，得到香豆素提取液；
[0021](2)第一维液相色谱纯化：将所述香豆素提取液上样到第一维色谱柱，此时切换阀处于位置A，以氯仿
‑
甲醇混合溶剂为流动相洗脱，得到第一维洗脱液；
[0022](3)目标组分的捕获：待第一维色谱柱上的组分洗脱完成后，将切换阀切换至位置B，第一维洗脱液中的馏分被捕集柱捕获并除去溶剂；
[0023](4)第二维液相色谱纯化：将切换阀切换至位置A，捕集柱与第二维色谱柱相连，以甲醇
‑
水混合溶剂为流动相洗脱，采用馏分收集器自动收集目标组分，得到第二维洗脱液；
[0024](5)干燥：将第二维洗脱液干燥，得到含有欧前胡素及异欧前胡素的产品。
[0025]本专利技术的有益效果：
[0026]本专利技术提供了一种二维液相色谱装置，其包括：切换阀、第一维色谱柱、第二维色谱柱、捕集柱、第一泵、第二泵、第一检测器、第二检测器、废液池和馏分收集器。所述切换阀为十通阀，具有1～10号位。本专利技术利用该二维液相色谱装置能够通过一次纯化获得两种高纯组分，由于目标组分是在系统内部切换，避免了变性，具有效率高、纯度高和自动化程度高的优点。
[0027]本专利技术还提供了采用该装置从当归中提取欧前胡素和异欧前胡素的方法，包括以下步骤：1)提取香豆素提取液；2)将香豆素提取液上样到第一维色谱柱，以氯仿
‑
甲醇混合
溶剂为流动相洗脱，得到第一维洗脱液；3待第一维色谱柱上的组分洗脱完成后，第一维洗脱液中的馏分被捕集柱捕获并除去溶剂；(4)以甲醇
‑
水混合溶剂为流动相洗脱，采用馏分收集器自动收集目标组分，得到第二维洗脱液；5)收集第二维目标组分，干燥，得到纯度>99％的产品。上述方法适宜从植物中提取中等极性小分子化合物。
附图说明
[0028]图1为本专利技术二维液相色谱装置图；
[0029]其中，1
‑
切换阀、2
‑
第一维色谱柱、3
‑
第二维色谱柱、4
‑
捕集柱、5
‑
第一泵、6
‑
第二泵本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种二维液相色谱装置，其特征在于，所述装置包括：切换阀、第一维色谱柱、第二维色谱柱、捕集柱、第一泵、第二泵、第一检测器、第二检测器、废液池和馏分收集器，其中，所述第一泵的出口端通过管路连接第一维色谱柱的进口端，第一维色谱柱的出口端通过管路连接第一检测器的进口端，所述切换阀为十通阀，具有1～10号位，所述1～10号位依次按顺时针方向排序，且沿十通阀周向均匀分布，所述切换阀的1号位通过管路连接第一检测器的出口端，切换阀的2号位通过管路与捕集柱进口端连接，切换阀的3号位通过管路与切换阀的8号位连接，切换阀的4号位通过管路与第二维色谱柱进口端连接，切换阀的5号位通过管路与捕集柱出口端连接，切换阀的6号位通过管路与废液池连接，切换阀的7号位通过管路与切换阀的10号位连接，切换阀的9号位通过管路与第二泵出口端连接，所述第二维色谱柱的出口端通过管路连接第二检测器的进口端，第二检测器的出口端通过管路连接馏分收集器，馏分收集器废液出口端通过管路与废液池连接。2.根据权利要求1所述的二维液相色谱装置，其特征在于，所述切换阀有A和B两种工作位置，当切换阀处于位置A时，1号位与10号位相连，9号位与8号位相连，7号位与6号位相连，5号位与4号位相连，3号位与2号位相连。3.根据权利要求2所述的二维液相色谱装置，其特征在于，当所述切换阀处于位置B时，切换阀1号位与2号位相连，3号位与4号位相连，5号位与6号位相连，7号位与8号位相连，9号位与10号位相连。4.根据权利要求1所述的二维液相色谱装置，其特征在于，所述第一维色谱柱选自氨基、氰基、硅胶色谱柱中的任意一种；所述第二维色谱柱选自C18、C8、C4色谱柱中的任意一种。5.根据权利要求4所述的二维液相色谱装置，其特征在于，所述第一维色谱柱和第二维色谱柱内的填料粒径为10
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200μm；所述第一维色谱柱、第二维色谱柱为玻璃柱或不锈钢柱，其直径为20<...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘君，刘文飞，
申请(专利权)人：耒阳市刘燕酿制生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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