一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用制造技术

本发明专利技术公开了生物医药技术领域的一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，包括HER2蛋白作为药物靶点的多肽TYELD在制备产品中的应用，多肽TYELD序列如SEQ ID NO:1所示，以及通过提取细胞总RNA、反转录、实时定量PCR步骤，检测乳腺癌细胞系SKBR

【技术实现步骤摘要】
一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体是一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用。

技术介绍

[0002]人表皮生长因子受体
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2(human epidermal growth factor receptor 2，HER
‑
2)是一种跨膜受体，在15％～25％的乳腺癌中过表达。HER
‑
2过表达与不良生物学特性和临床结局相关，是乳腺癌的有效治疗靶点。
[0003]HER2如何引发乳腺癌？在正常细胞中，HER2在不同细胞过程中和维持HER2蛋白表达水平的稳定中有重要作用，然而由于某些原因导致的过表达HER2基因或者过表达的HER2蛋白，会导致肿瘤的形成及迁移，HER2形成二聚体后，影响细胞的过程，包括抑制细胞自噬以促进细胞迁移，EGFR受体的首选是与HER2形成二聚体，能激活细胞增殖的RAS/Raf/MAPK信号通路及细胞存活的PI3K/Akt通路，所有过表达的HER2会破坏细胞过程的动态平衡，导致肿瘤不受控制的生长。
[0004]目前市面上有四种抗HER2药物，包括单克隆抗体，小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)，抗体偶联药物(Antibody
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Drug Conjugates，ADC)及其他抗HER2药。单克隆抗体包括曲妥单抗，帕妥珠单抗等，其分子机制通过与HER2受体结合，阻止HER2二聚体的形成，或者进行免疫应答，抑制HER2的分解，最后破坏下游信号通路；小分子酪氨酸激酶抑制剂包括Lapatinib拉帕替尼，Afatinib阿法替尼及Neratinib来那替尼,其通过与HER2胞外酪氨酸激酶结合，以抑制酪氨酸激酶的磷酸化，从而抑制下游信号通路的活性；单抗药物包括赫赛丁等，其作用机制与HER2胞外结构结合形成复合体后，诱发细胞内吞后使药物发挥作用。然而HER
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2抗体(如曲妥珠单抗)不可避免的耐药性和心脏毒性问题在一定程度上限制了其广泛应用。
[0005]然而目前市场上还没有针对HER2的多肽偶联药物(peptide
‑
drug conjugate，PDC)上市，多肽偶联药物是采用特定的连接子将靶向性的多肽和具有生物活性的抗癌剂连接起来，利用多肽的靶向性，从而降低抗癌剂对正常细胞的杀伤作用，进而增强抗肿瘤药效，PDC具有靶向性强、特异性高和毒副作用低等特点，同时相对于ADC，工艺简单，成本低廉，可极大的降低病人的经济负担，因此是当下生物医药研究的热点之一。
[0006]因此，本专利技术提供了一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0008]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0009]一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，包括HER2蛋白作为药物
靶点的多肽TYELD在制备产品中的应用，所述多肽TYELD序列如SEQ ID NO:1所示，以及通过提取细胞总RNA、反转录、实时定量PCR步骤，检测乳腺癌细胞系SKBR
‑
3和MCF7是否高表达HER2。
[0010]作为本专利技术进一步的方案：所述多肽TYELD的功能如下：
[0011]1)提高抗乳腺癌药物的溶解度；
[0012]2)增强抗乳腺癌药物的靶向性；
[0013]3)降低抗乳腺癌药物的毒副作用；
[0014]4)减少抗乳腺癌药物的剂量；
[0015]5)提高抗乳腺癌药物的疗效。
[0016]作为本专利技术再进一步的方案：所述的抗乳腺癌药物包括但不限于：通过生物信息技术模拟和经过相关细胞、动物实验筛选的具有靶向性的多肽、以及该多肽与抗肿瘤剂偶联形成的复合体、烷化剂或具有烷化作用的药剂、抗代谢物、抗生素、双膦酸盐、生物碱类、长春花生物碱类以及其它抗肿瘤剂。
[0017]作为本专利技术再进一步的方案：所述烷化剂或具有烷化作用的药剂包括但不限于：环磷酰胺(CTX)、苯丁酸氮芥(CHL)、顺铂(CisP)、奥沙利铂、白消安、美法仑、卡氮芥(BCNU)、三乙撑蜜胺(TEM)；
[0018]所述抗代谢物包括但不限于：甲氨蝶呤(MTX)、依托泊苷(VP16)、6
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巯基嘌呤(6MP)、6
‑
硫鸟嘌呤(6TG)、阿糖胞苷(AraC)、5
‑
氟尿嘧啶(5
‑
FU)、卡培他滨、达卡巴嗪(dacarbazine，DTIC)；
[0019]所述抗生素包括但不限于：烯二炔抗生素，所述烯二炔抗生素包括但不限于卡奇霉素(calicheamicin)；达内霉素(dynemicin)，所述达内霉素包括但不限于达内霉素A；
[0020]所述双膦酸盐包括但不限于氯屈膦酸盐(clodronate)、埃斯培拉霉素(esperamicin)、新制癌菌素发色团(neocarzinostatin chromophore)和相关色蛋白烯二炔抗生素发色团、阿克拉霉素(aclacinomysin)、放线菌素、安曲霉素(authramycin)、偶氮丝氨酸、博莱霉素(bleomycin)、放线菌素C(cactinomycin)、卡拉霉素(carabicin)、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6
‑
重氮基
‑5‑
氧代
‑
L
‑
正亮氨酸、多柔比星(包括但不限于吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2
‑
吡咯啉基
‑
多柔比星和脱氧多柔比星)、表柔比星、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(包括但不限于丝裂霉素C)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺拉霉(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链脲霉素、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他汀(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；
[0021]所述生物碱类包括但不限于美登素(maytansine)及其衍生物(包括但不限于DM1、DM4)；
[0022]所述长春花生物碱类包括但不限于长春新碱(VCR)、长春本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，包括HER2蛋白作为药物靶点的多肽TYELD在制备产品中的应用，所述多肽TYELD序列如SEQ ID NO:1所示，以及通过提取细胞总RNA、反转录、实时定量PCR步骤，检测乳腺癌细胞系SKBR
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3和MCF7是否高表达HER2。2.根据权利要求1所述的一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，其特征在于：所述多肽TYELD的功能如下：1)提高抗乳腺癌药物的溶解度；2)增强抗乳腺癌药物的靶向性；3)降低抗乳腺癌药物的毒副作用；4)减少抗乳腺癌药物的剂量；5)提高抗乳腺癌药物的疗效。3.根据权利要求2所述的一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，其特征在于：所述的抗乳腺癌药物包括但不限于：通过生物信息技术模拟和经过相关细胞、动物实验筛选的具有靶向性的多肽、以及该多肽与抗肿瘤剂偶联形成的复合体、烷化剂或具有烷化作用的药剂、抗代谢物、抗生素、双膦酸盐、生物碱类、长春花生物碱类以及其它抗肿瘤剂。4.根据权利要求3所述的一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，其特征在于：所述烷化剂或具有烷化作用的药剂包括但不限于：环磷酰胺(CTX)、苯丁酸氮芥(CHL)、顺铂(CisP)、奥沙利铂、白消安、美法仑、卡氮芥(BCNU)、三乙撑蜜胺(TEM)；所述抗代谢物包括但不限于：甲氨蝶呤(MTX)、依托泊苷(VP16)、6
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巯基嘌呤(6MP)、6
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硫鸟嘌呤(6TG)、阿糖胞苷(AraC)、5
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氟尿嘧啶(5
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FU)、卡培他滨、达卡巴嗪(dacarbazine，DTIC)；所述抗生素包括但不限于：烯二炔抗生素，所述烯二炔抗生素包括但不限于卡奇霉素(calicheamicin)；达内霉素(dynemicin)，所述达内霉素包括但不限于达内霉素A；所述双膦酸盐包括但不限于氯屈膦酸盐(clodronate)、埃斯培拉霉素(esperamicin)、新制癌菌素发色团(neocarzinostatin chromophore)和相关色蛋白烯二炔抗生素发色团、阿克拉霉素(aclacinomysin)、放线菌素、安曲霉素(authramycin)、偶氮丝氨酸、博莱霉素(bleomycin)、放线菌素C(cactinomycin)、卡拉霉素(carabicin)、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6
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重氮基
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氧代
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L
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正亮氨酸、多柔比星(包括但不限于吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2
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吡咯啉基
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多柔比星和脱氧多柔比星)、表柔比星、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(包括但不限于丝裂霉素C)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺拉霉(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链脲霉素、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他汀(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；所述生物碱类包括但不限于美登素(maytansine)及其衍生物(包括但不限于DM1、DM4)；
所述长春花生物碱类包括但不限于长春新碱(VCR)、长春花碱；所述其它抗肿瘤剂包括但不限于如紫杉醇及紫杉醇衍生物、喜树碱及其喜树碱衍生物、秋水仙碱、细胞抑制剂、糖皮质激素类(包括但不限于地塞米松(DEX))和皮质类固醇类(包括泼尼松)、核苷酶抑制剂(包括羟基脲)、氨基酸消耗酶(包括天冬酰胺酶)、甲酰四氢叶酸、亚叶酸、雷替曲塞以及和类似其它叶酸衍生物的各种抗肿瘤剂。5.根据权利要求1所述的一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，其特征在于：HER2基因的引物序列如下：HER2
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F5'
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CCAGGACCTGCTGAACTGGT
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3'HER2
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R5'
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GTACGAGCCGCACATCC
‑
3'6.根据权利要求1所述的一种针对乳腺癌HER2靶点的多肽偶联药物的开发及应用，其特征在于：细胞总RNA(total RNA)提取步骤如下：S1：RNA清洗缓冲液II在使用前必须用乙醇(96
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100％)稀释，并在室温下保存；S2：用500μL的GTC缓冲液在离心管中裂解细胞；S3：将裂解液移入gDNA去除管中，再置于2mL收集管，室温下14000g离心3...

【专利技术属性】
技术研发人员：王石雷，叶金磊，
申请(专利权)人：深圳市泰尔康生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：