一种同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA-2Na含量的方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，具体公开了一种同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
‑
2Na含量的方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
‑
2Na含量的方法。

技术介绍

[0002]低浓度硫酸阿托品滴眼液是目前最为有效的防治青少年儿童近视的制剂。低浓度硫酸阿托品滴眼液在制备、生产、储存、临床使用过程中，受到温度、光照、含氧量、溶液pH、储存时间、渗透压、粘度等因素的影响，原料药硫酸阿托品的小分子酯键、共轭双键、甲苯式侧链结构等不饱和化学键及离子键、络合配位键、范德华力易不稳定而发生降解或者分子结构发生变化，导致低浓度阿托品滴眼液变质甚至失效，而且会产生相应的醇、酸、酮、酯、生物碱等物质，这些产物大部分不具有相应的临床防治近视的药效，甚至还有较大的毒副作用，给患者带来一定的安全隐患。
[0003]针对上述问题，目前是在低浓度硫酸阿托品滴眼液中添加EDTA
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2Na稳定剂来解决的,EDTA
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2Na又名乙二胺四乙酸二钠，是一种重要络合剂，其与苯扎氯铵联合应用作为防腐体系已被广泛应用。EDTA
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2Na在液体制剂如滴眼液和注射液中用作稳定剂的原理是EDTA
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2Na与金属离子形成稳定的水溶性螯合物，能够防止自身氧化，有利于提高药物在制备、存储和临床配制过程中的稳定性。但是EDTA
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2Na会对粘膜、上呼吸道、眼睛及皮肤产生刺激作用，而且还会与钙离子结合成可溶的络合物，降低血钙浓度从而引起低钙血症，长期使用EDTA
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2Na超标的产品可能对人体健康产生不良影响，因此滴眼液中应严格控制EDTA
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2Na的含量，这就必须要确保EDTA
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2Na的准确定量。
[0004]现有测定液体制剂中EDTA
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2Na含量的方法主要有滴定法、气相色谱法、高效液相色谱法和液相色谱
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串联质谱法。其中滴定法测定误差大，操作繁琐，需要基准物质进行标定；气相色谱法样品前处理需采用有机溶剂提取或柱前衍生，处理复杂；液相色谱
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串联质谱法测定成本较高，而且受到外界的影响较大，检测方法的难度较高；高效液相色谱相对来说成本低，操作简单，是目前最常用的检测液体制剂中EDTA
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2Na的方法。
[0005]目前已有大量的研究报道滴眼液中EDTA
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2Na的高效液相色谱检测方法，例如：薛琦等采用反相离子对高效液相色谱法测定混悬滴眼液中乙二胺四乙酸二钠含量（薛琦,杨龙华.反相离子对高效液相色谱法测定混悬滴眼液中乙二胺四乙酸二钠含量[J].中国药业,2012,21(01):24
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25）；孙春霞等采用HPLC测定氯化钠滴眼液中乙二胺四乙酸二钠的含量（孙春霞,韩文芳,李津.HPLC测定氯化钠滴眼液中乙二胺四乙酸二钠的含量[J].食品与药品,2015,17(04):270
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272）；专利CN111398443A公开了一种他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二钠的测定方法。但是硫酸阿托品滴眼液中稳定剂EDTA
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2Na的测定，并不像其它原料药的滴眼液那样容易，由于硫酸阿托品的分子本身为类似于酯类的络合物，其与EDTA
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2Na两者会相互作用，导致EDTA
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2Na和硫酸阿托品的含量均无法准确测定。利用参考文献提供的HPLC法检测时，会出现EDTA
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2Na色谱峰严重拖尾、平峰或者不出峰等问题，以及受到溶
液中EDTA
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2Na分子的影响导致的硫酸阿托品色谱峰前沿、拖尾严重等问题；而且现有技术中，也没有同时检测低浓度阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA含量的方法的报道。

技术实现思路

[0006]为解决上述问题，本专利技术提供了一种同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
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2Na含量的方法，能够避免EDTA
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2Na和硫酸阿托品分子之间的相互影响，准确测定两者的含量。
[0007]一种同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
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2Na含量的方法，包括以下步骤：S1.制备对照品溶液：称取EDTA
‑
2Na标准物质，用纯水溶解，得到EDTA
‑
2Na对照品溶液；称取硫酸阿托品标准物质，用纯水溶解，得到硫酸阿托品对照品溶液；S2.制备样品溶液：量取阿托品滴眼液，加入氯化金属盐，得到样品溶液；S3.采用以下条件分别对对照品溶液和样品溶液进行HPLC检测：色谱柱：反相C18柱；流动相：流动相A为乙腈
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庚烷磺酸钠水溶液，流动相B为乙酸铵水溶液或者四丁基氢氧化铵水溶液；pH：控制流动相A的初始pH为4.0
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5.0；S4.记录对照品溶液EDTA
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2Na和硫酸阿托品的浓度和对应的峰面积以及样品溶液EDTA
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2Na和硫酸阿托品的峰面积；用外标法从样品溶液的峰面积求得其对应的硫酸阿托品和EDTA
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2Na含量。
[0008]本专利技术首次通过在样品溶液中加入金属离子络合物（即氯化金属盐），同时选取乙腈
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庚烷磺酸钠水溶液为流动相A，乙酸铵水溶液或者四丁基氢氧化铵水溶液为流动相B，并将流动相A的pH严格控制在4
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5（现有的液体制剂中检测EDTA
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2Na采用的HPLC法所用的缓冲溶液的pH或者在4.0以下，或者6.0以上），有效解决了低浓度硫酸阿托品滴眼液定量检测时，硫酸阿托品和EDTA
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2Na分子之间相互影响导致两者含量无法准确测定或者测定结果不准确的问题。采用本专利技术的方法可以确保EDTA
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2Na和硫酸阿托品的出峰正常，分离度和峰形良好，EDTA
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2Na和硫酸阿托品的含量和质量控制结果准确可靠。
[0009]优选的，步骤S2中，所述氯化金属盐为FeCl3、CuCl2、MgCl2或者 CaCl2。
[0010]进一步的，所述氯化金属盐以固体形式加至阿托品滴眼液中，在阿托品滴眼液中的加入量为2
‑
20 mg/mL。
[0011]优选的，步骤S3中，在流动相A中加入醋酸、甲酸或者三氟乙酸调节pH。
[0012]优选的，步骤S3中，所述流动相A中乙腈的体积分数为75%
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95%，流动相A的盐浓度（即庚烷磺酸钠浓度）为0.01mol/L
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0.05mol/L；所述流动相B的盐浓度为0.01mol/L
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0.05mol/L。
[0013]优选的，步骤S3中，HPLC检测的流速为0.3
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1.0mL/min，检测波长为210
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
‑
2Na含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：S1.制备对照品溶液：称取EDTA
‑
2Na标准物质，用纯水溶解，得到EDTA
‑
2Na对照品溶液；称取硫酸阿托品标准物质，用纯水溶解，得到硫酸阿托品对照品溶液；S2.制备样品溶液：量取阿托品滴眼液，加入氯化金属盐，得到样品溶液；S3.采用以下条件分别对对照品溶液和样品溶液进行HPLC检测：色谱柱：反相C18柱；流动相：流动相A为乙腈
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庚烷磺酸钠水溶液，流动相B为乙酸铵水溶液或者四丁基氢氧化铵水溶液；pH：控制流动相A的初始pH为4.0
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5.0；S4.记录对照品溶液EDTA
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2Na和硫酸阿托品的浓度和对应的峰面积以及样品溶液EDTA
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2Na和硫酸阿托品的峰面积；用外标法从样品溶液的峰面积求得其对应的硫酸阿托品和EDTA
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2Na含量。2.根据权利要求1所述的同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
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2Na含量的方法，其特征在于：步骤S2中，所述氯化金属盐为FeCl3、CuCl2、MgCl2或者 CaCl2。3.根据权利要求2所述的同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
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2Na含 量的方法，其特征在于：所述氯化金属盐以固体形式加至阿托品滴眼液中，加入量为2
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20 mg/mL。4.根据权利要求1所述的同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
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2Na含量的方法，其特征在于：步骤S3中，在流动相A中加入醋酸、甲酸或者三氟乙酸调节pH。5.根据权利要求1所述的同时测定阿托品滴眼液中硫酸阿托品和EDTA
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2Na含量的方法，其特征在于：步骤S3中，所述流动相A中乙腈的体积分数为75%

【专利技术属性】
技术研发人员：李大伟，李文龙，林天翼，鲍亚童，张浙南，王富成，林建华，
申请(专利权)人：杭州赫尔斯科技有限公司，
类型：发明
国别省市：