海松烷型二萜类化合物及制备方法和在制备抗炎药物中的应用技术

本发明专利技术涉及天然药物化学技术领域，特别涉及海松烷型二萜类化合物及制备方法和在制备抗炎药物中的应用，所述方法包括：(1)：将NaH萃取得到萃取物，将萃取物蒸发干燥得到粗品；(2)：将粗品悬浮于水中后用等体积正己烷和乙酸乙酯萃取得到萃取物，采用硅胶柱色谱对正己烷萃取物进行分离，得到24个组分，为Fr.1

【技术实现步骤摘要】
海松烷型二萜类化合物及制备方法和在制备抗炎药物中的应用


[0001]本专利技术涉及天然药物化学
，特别涉及海松烷型二萜类化合物及制备方法和在制备抗炎药物中的应用。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]炎症是由内外环境中的有害刺激引起的复杂的生理和病理反应。它通过相关的信号通路清除有害因素和受损组织，并在许多人类疾病的发展中发挥重要作用。脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁中的一种成分，是体内炎症和免疫反应的诱导剂。它是强有力的单核巨噬细胞激活剂，在启动宿主对细菌感染的炎症和免疫反应中起着重要作用。巨噬细胞受刺激后可分泌多种炎症介质，如一氧化氮、前列腺素E2、诱导型一氧化氮合酶、环氧合酶
‑
2、肿瘤坏死因子
‑
子、白细胞介素
‑
6、白细胞介素
‑
1素等。这些炎症介质的大量产生可能导致全身炎症反应综合征、严重的组织损伤和内毒素休克。因此，活化的巨噬细胞已被广泛用于评价各种药物的抗炎作用。
[0004]核因子κ子(NF
‑
κF)是一类具有多种生物活性的核转录因子家族。NF
‑
κF易被某些刺激性物质诱导和激活。通过特异性结合启动子基因位点，NF
‑
κF启动下游基因的转录和促进蛋白的表达，从而促进炎症相关因子的合成和分泌，导致体内一系列变化，并介导相关疾病的发生。NF
‑
κF已被证明是炎症级联反应的上游信号之一。通过抑制NF
‑
κF信号，RAW264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶和环氧合酶
‑
2的水平可以下调，炎性介质的释放也可以减少。这种抑制主要是通过NF
‑
κF信号级联和随后的p65从细胞质到细胞核的转位来介导的。此外，已有研究证明，细胞外信号调节激酶和PI3K/AKT等上游激酶也参与了NF
‑
κF转录活性的增强，因此，NF
‑
κF在介导炎症和免疫应答中起着核心作用。
[0005]荆芥属植物Nepetaadenophyta Hedge(简称：NaH)为巴基斯坦吉尔吉特地区特色植物，在当地吉尔吉特地区广泛使用，具有祛风止面、穿透皮疹、祛疮的功效。目前报道该植物化学成分的文献较少，尚未发现具有抗炎作用的活性成分。组分及其药理活性研究较少，未有对该植物进行分离和药理研究。

技术实现思路

[0006]为了解决现有技术的不足，本公开提供了海松烷型二萜类化合物及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用，对荆芥属植物Nepetaadenophyta Hedge(简称：NaH)中抗炎活性成分(2R,4aS,4bS,8aS)
‑2‑
ethenyl
‑
1,2,3,4,4a,4b,5,6,7,8,8a,9
‑
dodecahydro
‑
2,4b,8,8
‑
tetramethyl
‑
3,5
‑
phenanthrenediol(简称：NAC)进行分离和结构鉴定，并对NAC抗炎活性的分子机制进行了系统研究。并采用GC
‑
MS/MS、LC
‑
MS/MS和NMR法进行结构解析，采用细
胞和小鼠实验对分离得到的单体化合物抗炎活性进行了评价。
[0007]具体地，本专利技术是通过如下技术方案实现的：
[0008]在本专利技术的第一方面，一种从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法，包括：
[0009](1)：将NaH药材萃取得到萃取物，将萃取物蒸发干燥得到粗品；
[0010](2)：将粗品悬浮于水中后用等体积正己烷和乙酸乙酯萃取得到萃取物，采用硅胶柱色谱对正己烷萃取物进行分离，得到24个组分，为Fr.1
‑
Fr.24；
[0011](3)：继续对Fr.11进行二次分离，以甲醇为溶剂进行重结晶，获得高纯度化合物(2R,4aS,4bS,8aS)
‑2‑
ethenyl
‑
1,2,3,4,4a,4b,5,6,7,8,8a,9
‑
dodecahydro
‑
2,4b,8,8
‑
tetramethyl
‑
3,5
‑
phenanthrenediol。
[0012]在本专利技术的第二方面，海松烷型二萜类化合物，采用任一所述的从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法提取得到，所述化合物结构如下：
[0013][0014]在本专利技术的第三方面，以任一所述的从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法提取得到的化合物为活性成分，加入药剂学上接受的辅料按照常规的制备方法可以制成药剂学上接受的任一制剂。
[0015]在本专利技术的第四方面，任一所述的从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法提取得到的化合物在以下任一领域中的应用，所述应用包括：
[0016]抑制RAW264.7细胞中的NO、TNF
‑
α、IL
‑
1β、PGE2和IL
‑
6的表达；
[0017]或，减少LPS激活的细胞中NO和PGE2的产生；
[0018]或，抑制TLR4、p
‑
p65和p
‑
IκBα及其下游靶点；
[0019]或，抑制p
‑
p65蛋白的表达。
[0020]在本专利技术的第五方面，任一所述的从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法提取得到的化合物和/或所述的制剂在制备治疗炎症药物中的应用。
[0021]本专利技术一个或多个实施例具有以下有益效果：
[0022](1)、研究结果表明，NAC能显著抑制RAW264.7细胞中的NO、TNF
‑
α、IL
‑
1β、PGE2和IL
‑
6的表达。AKT1在LPS诱导的COX
‑
2表达、ROS生成和HO
‑
1过表达中起关键作用，为炎症性疾病的治疗提供了新的特异性靶点和替代途径，在开发新型功能食品和开发天然药物方面具有很大潜力。
[0023](2)、本专利技术建立的分离方法，可快速制备出NAC，为该化合物的快速制备提供技术途径。
[0024](3)、本专利技术首次从NaH中提取分离出了高纯度海松烷型二萜类化合物NAC，并发现该化合物具有抗炎作用，对于制备治疗炎症药物具有重要的应用前景。
附图说明
[0025]构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。以下，结合附图来详细说明本专利技术的实施方案，其中：本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法，其特征是，包括：(1)：将NaH萃取得到萃取物，将萃取物蒸发干燥得到粗品；(2)：将粗品悬浮于水中后用等体积正己烷和乙酸乙酯萃取得到萃取物，采用硅胶柱色谱对正己烷萃取物进行分离，得到24个组分，为Fr.1
‑
Fr.24；(3)：继续对Fr.11进行二次分离，以甲醇为溶剂进行重结晶，获得高纯度化合物NAC。2.如权利要求1所述的一种从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法，其特征是，步骤(1)中，所述萃取包括：将NaH在室温下用无水乙醇浸泡提取，保持固液比为1:10
‑
20；优选的，为1:15；或，所述蒸发采用的旋转蒸发器进行蒸发。3.如权利要求1所述的一种从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法，其特征是，步骤(2)中，采用硅胶柱色谱进行分离时，洗脱剂为正己烷/乙酸乙酯。4.如权利要求1所述的一种从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法，其特征是，步骤(2)中，采用硅胶柱色谱进行分离时，以正己烷/乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱：20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、纯乙酸乙酯，v/v。5.如权利要求1所述的一种从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法，其特征是，步骤(3)中，所述二次分离包括：正己烷/乙酸乙酯＝5:1，v/v洗脱组分Fr.11进行二次分离，以氯仿/甲醇体系为洗脱剂，进行梯度洗脱。6.如权利要求5所述的一种从NaH中提取海松烷型二萜类化合物的方法，其特征是，所述氯仿/甲醇的体积...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔莉，陈龙，马超，王岱杰，吕翠，张浩，张宇，孙轩，谢磊，
申请(专利权)人：山东省分析测试中心，
类型：发明
国别省市：