一种天然聚合多糖用于制备样本处理液及其在免疫层析检测试剂盒的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种天然聚合多糖Biosaccharide Gum

【技术实现步骤摘要】
一种天然聚合多糖用于制备样本处理液及其在免疫层析检测试剂盒的应用


[0001]本专利技术涉及医学检验领域，具体地，涉及一种天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1用于制备样本处理液及其在免疫层析检测试剂盒的应用。

技术介绍

[0002]免疫层析检测试剂盒是基于免疫层析原理建立起来的一种适用于现场检测的技术，典型的免疫试纸包括样品垫、标记垫、包被膜和吸收垫。以硝酸纤维素膜作为固相载体包被的抗原或抗体得到反应膜，经毛细管虹吸作用使待测样品中的抗体或抗原与反应膜上包被物质结合，通过标记垫上胶体金或荧光标记物呈现反应结果。
[0003]硝酸纤维素膜是免疫层析试纸的重要功能部分，必须能够吸附足量的蛋白以保证能有锐利紧凑的捕获线形成，同时，非特异性背景应该足够低，以方便地进行结果读取。蛋白(如BSA)能有效地降低非特异背景，但它们也可能对膜的侧向流速率造成不利影响；通常也使用Tween 20、Triton X-100、PVP、Brij、PEG等表面活性剂或亲水聚合物进行封闭以降低膜的疏水性，同时也减少背景着色，并使反应膜达到均一或一致的样品润湿率
[0004]对于传染疾病检测，检测的重复性、灵敏度和精确性要求极高。例如，新型冠状病毒S蛋白抗体检测试剂盒(荧光免疫层析法)，要求检测的非特异背景更低以降低假阳性，同时还要求好的灵敏度以提高阳性检出率。在采用双抗原夹心法原理实现检测新冠病毒蛋白抗体的过程中，不可避免会采用单一的抗原作为包被抗原和标记抗原，夹心法检测时可能存在两个荧光标记抗原结合到同一个抗体从而导致灵敏度降低，出现弱阳性样本漏检的现象。因此如何增强待检测物与标记物的结合是提高检测灵敏度和准确性所必须解决的技术问题。
[0005]在实际测试过程中，血清等样本经样本处理液处理后复溶标记垫上的荧光微球标记物。但是，一些形状大小不规则的荧光微球标记物在结合过程中往往不能均一地包被蛋白，并且可能无法在溶液中形成排斥；这将导致聚集的形成，导致侧向流检测出现问题，极可能产生假阳性结果。
[0006]Biosaccharide Gum-1是一种通过细菌发酵获得的线性结构的阴离子多糖，由半乳糖醛酸，L-岩藻糖和D-半乳糖组成。这种天然衍生的聚合物在水性环境中被水合，从而形成了称为水凝胶的凝胶膜状结构。鉴于其既可以在皮肤表面也可以在头发上形成膜的能力，并且还可以捕获水分子，因此它具有优良的保湿特性，提供了舒适性和柔软性等卓越的感官能力。Biosaccharide Gum-1在化妆品行业得到大量应用。
[0007]我们首次发现Biosaccharide Gum-1可以比较好的增强标记垫上的标记物复溶和释放能力，也能有效降低反应膜的非特异背景，改善检测灵敏度。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是提供一种天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1用于制备样本处理
液，这种技术可以改善标记垫上的标记物的复溶和释放能力，降低体外诊断试剂盒的非特异检测信号，提高待检测物与标记物的结合效果的方法。
[0009]为达到上述目的，本专利技术的第一个方面提供了一种天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1用于制备样本处理液的方法，所述方法包括：在pH为8.0-8.5的缓冲液中，制备含0.2％-0.4％(v/v)浓度Biosaccharide Gum-1的样本处理液；
[0010]其中，所述缓冲液是但不限于20mM-100mM的磷酸盐、Tris、硼酸等缓冲液；
[0011]优选的，所述缓冲液的pH值为8.0-8.5；
[0012]优选的，所述样本处理液还含有0.5％-2％(v/v)吐温20、0.9％-5％氯化钠和0.03％的proclin300等成份。
[0013]优选的，所述天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1的CAS号是178463-23-5。
[0014]本专利技术进一步提供了所述制备的样本处理液在免疫层析检测中的用途。同时，举例介绍用于检测新型冠状病毒S蛋白抗体的检测试剂盒(荧光免疫层析法)。
[0015]本专利技术进一步提供了新型冠状病毒蛋白S抗体检测试剂盒(荧光免疫层析法)，所述试剂盒含有本专利技术所述的样本处理液。
[0016]本专利技术公开了天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1在降低体外诊断试剂盒非特异性信号方面的应用。
[0017]优选的，所述体外诊断试剂盒为免疫层析法检测试剂盒，优选为，新型冠状病毒抗体荧光免疫层析法检测试剂盒。
[0018]优选的，所述处理液包括天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1。
[0019]优选的，所述处理液选自磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液或硼酸缓冲液。
[0020]优选的，所述处理液中聚合多糖Biosaccharide Gum-1的浓度为0.2％-0.4％(V/V)。
[0021]优选的，所述磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液或硼酸缓冲液的浓度为20mM-100mM。
[0022]优选的，所述处理液还包括吐温20、氯化钠以及proclin300。
[0023]本专利技术公开了一种免疫检测试剂盒，所述试剂盒包括样本处理液，所述样本处理液包括天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1。
[0024]优选的，所述处理液中聚合多糖Biosaccharide Gum-1的浓度为0.2％-0.4％(V/V)。
[0025]本专利技术进一步公开了所述的处理液在制备免疫检测试剂盒中的用途，优选的，所述免疫检测试剂盒为荧光免疫层析检测试剂盒。
[0026]本公开的第三个方面提供的新型冠状病毒S蛋白抗体检测试剂盒(荧光免疫层析法)，采用新型冠状病毒抗原RBD蛋白标记荧光微球制备标记垫；采用新型冠状病毒抗原RBD蛋白包被硝酸纤维素膜制备反应膜；
[0027]其中，所述荧光微球为聚苯乙烯包埋镧系元素微球、聚乙烯包埋量子点微球或聚苯乙烯包埋有机荧光染料微球。其中，所述荧光微球的尺寸优选为50-300nm。
[0028]可选的，所述标记垫上含有的抗原标记微球是将所述抗原标记微球以2-3mg/mL的浓度溶于喷涂缓冲液中，使用3-5μL/cm的喷涂速度通过喷金点膜机喷涂在标记垫上干燥后得到的。
[0029]在专利技术公开了一种试纸条，所述试纸条包括在基板上依次相连接的吸水垫、反应
膜、标记垫和样品垫；所述反应膜上设置有C线和T线，所述T线上包被有新型冠状病毒抗原RBD蛋白，所述标记垫中含有包被了新型冠状病毒抗原RBD蛋白标记微球；所述C线上包被有新型冠状病毒抗原RBD蛋白的兔多克隆抗体。
[0030]本专利技术进一步公开了荧光免疫层析试纸条的检测原理为。将待检样品滴入样品垫中，若样品中有待测抗体，待检样品中的待测抗体先和所述抗原标记微球表面的抗原结合，由于毛细管作用，待测抗体和抗原标记微球形成的复合体沿基膜向前泳动，到达检测线时遇到包被在硝酸纤维素基膜上的新型冠状病毒抗原RBD蛋白，由于包被在硝酸纤维本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1在降低体外诊断试剂盒非特异性信号方面的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述体外诊断试剂盒为免疫层析法检测试剂盒，优选为，新型冠状病毒抗体荧光免疫层析法检测试剂盒。3.一种用于免疫层析的样本处理液，其特征在于，所述处理液包括天然聚合多糖Biosaccharide Gum-1。4.根据权利要求3所述的处理液，其特征在于，所述处理液选自磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液或硼酸缓冲液。5.根据权利要求3-4任一权利要求所述的处理液，其特征在于，所述处理液中聚合多糖Biosaccharide Gum-1的浓度为0.2％-0.4％(V/V)。6.根据权利要求5所述的处理液，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：段学军，张旭东，樊荣，李玉彬，常天亮，侯莉莉，孙蕴娴，马群超，
申请(专利权)人：北京北方生物技术研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：