一种鼠去氧胆酸的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种鼠去氧胆酸的制备方法，该方法以猪去氧胆酸(3α，6α

【技术实现步骤摘要】
一种鼠去氧胆酸的制备方法


[0001]本专利技术属于有机化学合成领域，具体是指一种鼠去氧胆酸的制备方法。

技术介绍

[0002]胆汁酸是胆汁的重要成分，胆汁酸主要存在于肠肝循环系统并通过再循环起一定的保护作用；胆汁酸是与无数生物学功能相关的重要内源性分子，包括胆固醇的吸收和排泄，在代谢中起到了促进脂类乳化、增强胰腺脂解的作用，直接参与了脂质和葡萄糖代谢，与肥胖和免疫应道存在着极其密切的关系；而在临床和疾病诊断方面，胆汁酸在研究肝胆胃肠疾病上起到了重要的作用。
[0003]鼠去氧胆酸是啮齿动物代谢过程中的一种重要次级胆汁酸，对于研究啮齿动物的胆汁酸代谢过程有一定的意义。
[0004]目前鼠去氧胆酸制备方法的报导尚未出现，故有必要研究一种简单、方便，适合大量生产的鼠去氧胆酸制备方法，为后续研究提供数据支持和标样。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于：提供一种鼠去氧胆酸的制备方法，该制备方法以猪去氧胆酸为原料，原料易得，且反应简单，副反应少，转化率高，适合大量生产。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采取以下技术方案：
[0007]一种鼠去氧胆酸(3α，6β
‑
二羟基
‑
5β
‑
胆烷酸)的制备方法，以猪去氧胆酸(3α，6α
‑
二羟基
‑
5β
‑
胆烷酸)为原料合成鼠去氧胆酸，反应过程包括，3、7位羟基氧化，3位羰基还原，7位羰基还原，提纯；具体步骤如下：
[0008][0009]本专利技术中，所述步骤a包括：将化合物A(3α，6α
‑
二羟基
‑
5β
‑
胆烷酸)，即猪去氧胆酸，悬浮于丙酮中，降温至0℃以下，缓慢加入氧化剂，反应完成后，加入还原剂终止反应，蒸馏除去丙酮，加水结晶，过滤洗涤，得到化合物B(3，6
‑
二羰基
‑
5β
‑
胆烷酸)。
[0010]所述丙酮与所述化合物A的体积质量比为5.0
‑
10.0ml:1g；
[0011]所述氧化剂为次氯酸、琼斯试剂或高锰酸钾溶液中的任一种；
[0012]所述次氯酸与所述化合物A的体积质量比为4.0
‑
5.0ml:1g；
[0013]所述琼斯试剂与所述化合物A的体积质量比为1.2
‑
1.5ml:1g；
[0014]所述高锰酸钾溶液与所述化合物A的体积质量比为4.0
‑
5.0ml:1g；
[0015]所述还原剂为亚硫酸氢钠；
[0016]所述亚硫酸氢钠与所述化合物A的质量比为0.02
‑
0.04:1。
[0017]本专利技术中，所述步骤b包括：将化合物B溶解于氢氧化钠溶液中，磷酸二氢钠调节溶液pH至7.0
‑
7.5，加入葡萄糖、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)、葡萄糖脱氢酶(GDH)、3
‑
α类固醇脱氢酶(3
‑
αHSDH)，维持溶液pH为7.0
‑
7.5反应4h，反应完成后，升温至70
‑
75℃，搅拌2h，降温至常温，加酸调节溶液pH至3
‑
4结晶，过滤，洗涤至洗水pH试纸检测中性。滤饼加入甲醇溶解，过滤除去甲醇不溶物，得到化合物C(3α
‑
羟基，6
‑
羰基
‑
5β
‑
胆烷酸甲醇)。
[0018]所述氢氧化钠溶液和所述化合物A的体积质量比为10
‑
11ml:1g；
[0019]所述葡萄糖和所述化合物A的质量比0.5
‑
0.6:1；
[0020]所述烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和所述化合物A的质量比为0.001
‑
0.002:1；
[0021]所述葡萄糖脱氢酶和所述化合物A的质量比0.01
‑
0.02:1；
[0022]所述3
‑
α类固醇脱氢酶和所述化合物A质量比为0.01
‑
0.02:1。
[0023]所述氢氧化钠溶液的含量为1％；所述酸为浓度5mol/L的盐酸。
[0024]本专利技术中，所述步骤c包括：在化合物C的溶液中，加入硼氢化钠还原反应1h，在7位羰基还原反应中加入与化合物C的溶液等体积的水，搅拌均匀后加酸调节溶液pH至3
‑
4结晶，过滤洗涤，干燥，得到3α，6β
‑
二羟基
‑
5β
‑
胆烷酸。
[0025]所述硼氢化钠和所述化合物A的质量比为0.10
‑
0.15:1；
[0026]所述步骤c中的酸为浓度为5mol/L的盐酸；
[0027]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0028](1)本专利技术以猪去氧胆酸(3α，6α
‑
二羟基
‑
5β
‑
胆烷酸)为原料合成鼠去氧胆酸(3α，6β
‑
二羟基
‑
5β
‑
胆烷酸)的方法，原料来源广泛，价格低廉；
[0029](2)本专利技术的合成路线，反应简单，副反应少，转化率高，适合大量生产；
[0030](3)本专利技术得到的鼠去氧胆酸纯度高，杂质少，可为后续研究提供数据及标样。
具体实施方式
[0031]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但并不局限于此。
[0032]实施例1
[0033]本实施例的鼠去氧胆酸的制备方法，包括如下步骤：
[0034]a.制备3，6
‑
二羰基
‑
5β
‑
胆烷酸
[0035]在500ml反应瓶中加入10g猪去氧胆酸,50ml丙酮，降温至0℃以下，缓慢加入46ml含量为10％的次氯酸，加完后继续反应30min，取样HPLC检测猪去氧胆酸残留为0.237％，加入0.3g亚硫酸氢钠终止反应；蒸馏除去丙酮，加200ml水搅拌30min结晶完全，过滤，2*250ml水洗涤滤饼，至洗水用pH试纸检测为中性，得到3，6
‑
二羰基
‑
5β
‑
胆烷酸湿品约12.5g，HPLC检测纯度为98.352％。
[0036]b.制备3α
‑
羟基，6
‑
羰基
‑
5β
‑
胆烷酸
[0037]将上步的3，6
‑
二羰基
‑
5β
‑
胆烷酸溶解于100ml浓度为1％的氢氧化钠溶液中，并调节溶液pH至7.0
‑
7.5，加入5g葡萄糖、10mg烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)、100mg葡萄本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鼠去氧胆酸的制备方法，以猪去氧胆酸为原料合成鼠去氧胆酸，其特征在于，反应过程包括：3、7位羟基氧化，3位羰基还原，7位羰基还原及提纯；具体包括如下步骤：2.根据权利要求1所述的鼠去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述步骤a包括：将化合物A，悬浮于丙酮中，降温至0℃以下，缓慢加入氧化剂，反应完成后，加入还原剂终止反应，蒸馏除去丙酮，加水结晶，过滤洗涤，得到化合物B；所述氧化剂为次氯酸、琼斯试剂或高锰酸钾溶液中的任一种；所述还原剂为亚硫酸氢钠。3.根据权利要求2所述的鼠去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述丙酮与所述化合物A的体积质量比为5.0
‑
10.0ml:1g；所述次氯酸与所述化合物A的体积质量比为4.0
‑
5.0ml:1g；所述琼斯试剂与所述化合物A的体积质量比为1.2
‑
1.5ml:1g；所述高锰酸钾溶液与所述化合物A的体积质量比为4.0
‑
5.0ml:1g；所述亚硫酸氢钠与所述化合物A的质量比为0.02
‑
0.04:1。4.根据权利要求2或3所述的鼠去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述次氯酸的浓度为10％；所述高锰酸钾溶液为高锰酸钾的饱和溶液。5.根据权利要求1所述的鼠去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述步骤b包括：将化合物B溶解于氢氧化钠溶液中，用磷酸二氢钠调节溶液pH至7.0
‑
7.5，加入葡萄糖、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、葡萄糖脱氢酶、3
‑
α类固醇脱氢酶，维持溶液pH为7.0
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【专利技术属性】
技术研发人员：秦和平，张和平，祝国祥，林志锋，凌芬娜，
申请(专利权)人：中山百灵生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：