从人类脂肪来源间充质干细胞分化为毛乳头细胞的方法技术

本发明专利技术涉及在包含明胶的分化诱导用细胞培养板中利用从人类脂肪来源间充质干细胞分化诱导为毛乳头细胞的培养基组合物来分化的方法及上述培养基组合物。本发明专利技术的包含明胶的培养板可以发挥诱导从人类脂肪来源间充质干细胞直接交叉分化为毛乳头细胞的效果，能够通过使用经济性的材料发挥以低廉的费用有效地在体外大量培养的效果。并且，本发明专利技术的从人类脂肪来源间充质干细胞分化的毛乳头细胞可以用作用于预防或治疗脱发的细胞治疗剂组合物。用作用于预防或治疗脱发的细胞治疗剂组合物。用作用于预防或治疗脱发的细胞治疗剂组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】从人类脂肪来源间充质干细胞分化为毛乳头细胞的方法


[0001]本专利技术涉及在包含明胶的分化诱导用细胞培养板中利用从人类脂肪来源间充质干细胞分化诱导为毛乳头细胞的培养基组合物来分化的方法及上述培养基组合物。

技术介绍

[0002]脱发的种类可以分为男性型、女性型、休止期、圆形脱发。构成毛囊的毛乳头细胞通过若干因素与毛囊附近的细胞相互作用来影响毛发的形成和生长并起到调节生长周期的作用，毛囊由于成为脱发原因的若干因素而退化，从而发生毛发停止生长并脱落的脱发。
[0003]最近，据韩国国民健康保险公署统计，每年因脱发到医院就医的患者有21万人，其中，约44％为20多岁～30多岁的人，女性患者占全部患者的45％，脱发的发病与年龄和性别没有关联性。并且，10岁以下的脱发患者的比例呈逐渐增加的趋势，脱发可以不再视为只有成年人的问题，脱发是一种疾病的观念已被整个社会逐渐认同。
[0004]为了治疗脱发，主要进行自体毛发移植、药物治疗，自体毛发移植的情况虽有能够永久治疗的优点，但却有费用昂贵、若脱发部位面积大则需经多次手术的缺点。并且，药物治疗的情况虽然服用及给药便利，但只是帮助迟延脱发的进程或者维持现有的状态的用途而已，不是永久治疗的方法，而且还有因药物引起的副作用，因此有局限性。此外，虽然开发了基因治疗等诸多方法，但至今尚未结束对其安全性和效果的验证，距临床应用尚需时日。
[0005]近来，在脱发的治疗中应用及适用干细胞的技术备受瞩目。尝试了对在头皮的各处注入脂肪来源干细胞的方式、利用干细胞的多分化功能诱导分化为毛乳头细胞后在体内形成毛囊的方式等。然而，在注入的脂肪来源干细胞的情况下，不是形成根治脱发的新的毛囊，而在诱导分化为毛乳头细胞的情况下，具有要解决通过基因操作分化的细胞的稳定性、对基因操作的心理负担及经济性的问题。因此，需要开发既安全又经济且无须基因操作的有效治疗脱发的方案。

技术实现思路

[0006]技术问题
[0007]本专利技术提供能够发挥可以经济且有效地在体外大量培养的效果的在包含明胶的分化诱导用细胞培养板中利用从人类脂肪来源间充质干细胞分化诱导为毛乳头细胞的培养基组合物来分化的方法及上述培养基组合物。
[0008]技术方案
[0009]本专利技术提供一种用于分化诱导毛乳头细胞的培养板，其特征在于，在培养板内部涂敷有明胶。
[0010]另一方面，在本专利技术中，优选地，上述培养板可以为聚苯乙烯(Polystyrene)培养板。
[0011]另一方面，在本专利技术中，优选地，上述培养板可以用于诱导从人类脂肪来源干细胞分化为毛乳头细胞。
[0012]并且，本专利技术提供一种将人类脂肪来源干细胞分化诱导为毛乳头细胞的方法，其特征在于，包括：步骤(a)，向在内部涂敷有明胶的培养板加入动物细胞培养用培养基后，装载人类脂肪来源间充质干细胞来培养人类脂肪来源间充质干细胞；步骤(b)，更换为第一次分化用培养基来培养在上述步骤(a)的动物细胞培养用培养基中培养的人类脂肪来源间充质干细胞；以及步骤(c)，更换为第二次分化用培养基来培养在上述步骤(b)的第一次分化用培养基中培养的人类脂肪来源间充质干细胞，上述步骤(b)的第一次分化用培养基通过向动物细胞培养用培养基添加视黄酸(retinoicacid)、胎牛血清(FBS)、青霉素(penicillin)及链霉素(streptomycin)来组成，上述步骤(c)的第二次分化用培养基通过向动物细胞培养用培养基添加成纤维细胞生长因子
‑
2(fibroblast growth factor
‑
2；bFGF)、骨形成蛋白2(human recombinant BMP2)、糖原合成激酶3α/β抑制剂(6
‑
bromoindirubin
‑3′‑
oxime)、胎牛血清、青霉素及链霉素来组成。
[0013]并且，本专利技术提供一种用于促进毛发生长或防止脱发的化妆品组合物，其特征在于，包含通过上述分化诱导方法从人类脂肪来源干细胞分化的毛乳头细胞。
[0014]并且，本专利技术提供一种用于促进毛发生长或防止脱发的药学组合物，其特征在于，包含通过上述分化诱导方法从人类脂肪来源干细胞分化的毛乳头细胞。
[0015]另一方面，在本专利技术中，优选地，上述药学组合物可以为皮肤外用剂。
[0016]专利技术的效果
[0017]本专利技术的包含明胶的培养板可以发挥诱导从人类脂肪来源间充质干细胞直接交叉分化为毛乳头细胞的效果，能够通过使用经济性的材料发挥以低廉的费用有效地在体外大量培养的效果。
[0018]并且，本专利技术的从人类脂肪来源间充质干细胞分化的毛乳头细胞可以用作用于预防或治疗脱发的细胞治疗剂组合物。
附图说明
[0019]图1为示出对本专利技术的分化的人类脂肪来源间充质干细胞(dADSC)确认毛乳头细胞特异性基因的基因表达状态的实验结果图表。使用毛乳头细胞(DPC)和未分化的人类脂肪来源间充质干细胞(ADSC)用于比较。
[0020]图2为对本专利技术的分化的人类脂肪来源间充质干细胞执行对于毛乳头细胞特异性基因的流式细胞荧光分选技术分析(FACS)的实验结果。将毛乳头细胞和未分化的人类脂肪来源间充质干细胞用于比较。(a)部分为流式细胞荧光分选技术分析结果，(b)部分为将上述分析结果数值化后示出的柱状图。
[0021]图3为示出通过微阵列技术的样品之间的聚类化数据(层次聚类和MDS分布(Hierarchical clustring&MDS plot))的结果。
[0022]图4为确认通过微阵列技术的细胞之间的毛乳头细胞相似基因表达模式(Wnt信号(Wnt signal))的结果。
[0023]图5为示出微阵列技术结果相关的相似信号传导的预想通路的示意图。
具体实施方式
[0024]本专利技术提供一种用于分化诱导毛乳头细胞的培养板，其特征在于，在培养板内部
涂敷有明胶。在利用本专利技术的涂敷有“明胶”的培养板的情况下，可以发挥诱导从人类脂肪来源间充质干细胞直接交叉分化为毛乳头细胞的效果，能够通过使用经济性的材料发挥以低廉的费用有效地在体外大量培养的效果。
[0025]另一方面，在本专利技术中，优选地，上述培养板可以为聚苯乙烯培养板。
[0026]另一方面，在本专利技术中，上述培养板为了干细胞的分化及增殖而使用适当的细胞外基质分子。可以使用的细胞外基质分子有胶原(collagen)、纤维黏连蛋白(Fibronectin)、基质胶(Matrigel)、明胶(Gelatin)等，在本专利技术中，优选地，使用了细胞的分化及增殖率最高的明胶，不包含饲养细胞(feeder cell)，而使用涂敷有明胶的培养板。通过上述方式不经过用于增殖及分化的共同培养步骤，因此缩短分化所需的时间，从而能够迅速应用于患者，降低在饲养细胞的培养过程中因污染引起疾病传染的可能性，从而获得提高分化细胞的稳定性的效果。
[0027]另一方面本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于分化诱导毛乳头细胞的培养板，其特征在于，在培养板内部涂敷有明胶。2.根据权利要求1所述的用于分化诱导毛乳头细胞的培养板，其特征在于，上述培养板为聚苯乙烯培养板。3.根据权利要求1所述的用于分化诱导毛乳头细胞的培养板，其特征在于，上述培养板用于诱导从人类脂肪来源干细胞分化为毛乳头细胞。4.一种将人类脂肪来源干细胞分化诱导为毛乳头细胞的方法，其特征在于，包括：步骤(a)，向在内部涂敷有明胶的培养板加入动物细胞培养用培养基后，装载人类脂肪来源间充质干细胞来培养人类脂肪来源间充质干细胞；步骤(b)，更换为第一次分化用培养基来培养在上述步骤(a)的动物细胞培养用培养基中培养的人类脂肪来源间充质干细胞；以及步骤(c)，更换为第二次分化用培养基来培养在上述步骤(b)的第一次分化用培养基中培...

【专利技术属性】
技术研发人员：李粹然，
申请(专利权)人：瑞帝安有限公司，
类型：发明
国别省市：