一种从白桐树中提取酚类化合物的方法技术

本发明专利技术提供一种从白桐树中提取酚类化合物的方法，所述方法包括提取、浓缩、萃取、聚酰胺柱层析、C18柱层析、凝胶柱层析、半制备型高效液相色谱法等步骤，采用本发明专利技术方法首次从白桐树中分离得到cleomiscosin C、cleomiscosinA、莨菪亭、6

【技术实现步骤摘要】
一种从白桐树中提取酚类化合物的方法


[0001]本专利技术涉及天然植物化学成分提取分离领域
，具体涉及一种从白桐树中提取酚类化合物的方法。

技术介绍

[0002]白桐树Claoxylon indicum(Reinw.ex Bl.)Hassk.，又名丢了棒、刁了棒、追风棍、咸鱼头大叶大青、赶风债、赶风柴、追风根、美巧怀，为大戟科(Euphorbiac eae)白桐树属(Claoxylon A.Juss.)植物，主产于广东、海南、广西、云南等地，味辛微苦，有小毒，性平，归脾、肾经，功效祛风除湿，消肿止痛，《生草药性备要》记载其“祛风湿脚痛，敷跌打，消肿痛”，可用于风湿类风湿性关节炎，腰腿痛，跌打肿痛，脚气水肿，还可以用于治烧、烫伤，外伤出血，作为一种壮族药物，在民间多用于风湿类风湿骨病的治疗。《中国药典》(1977年版)、《广西壮族自治区壮药质量标准》、《湖南中药饮片炮制规范》(2010年版)、《甘肃省中药饮片炮制规范》(1980年版)等法定规范中均有收载白桐树作为临床药物使用，在治疗风湿类风湿性关节炎及其骨病方面白桐树均有使用，如中华跌打丸(中国药典2010年版一部)、中华跌打酒(卫生部药品标准中药成方制剂第十九册)、伤筋正骨酊(国家中成药标准汇编骨伤科分册)、新力正骨喷雾剂(国家中成药标准汇编骨伤科分册)、驳骨水(卫生部药品标准中药成方制剂第十一册)等多种中成药处方及许多壮族药方都运用了白桐树这味药。
[0003]目前关于白桐树的化学研究报道很少，文献调研结果表明，白桐树属植物含酚类、生物碱、二萜、三萜、皂苷等化学成分，其中酚类(主要是木脂素、新木脂素、香豆素)是该属植物特征性成分，且具有抗癌、调节免疫等多种活性。目前，关于白酮树酚类成分的研究较少，并未有明确的方法来提取白桐树植物中的酚类成分，这严重制约了常用壮族药白桐树的广泛临床应用，因此研究开发一种白桐树植物中酚类化合物的提取分离方法，以便简单、快速的从白桐树中制备得到多种酚类化合物，对于壮药白桐树资源的充分开发和利用具有重要意义。

技术实现思路

[0004]针对现有技术存在的不足，本专利技术目的在于提供一种从白桐树中提取酚类化合物的方法，本专利技术所述提取方法可以简单、快速从白桐树中提取分离纯出cleomiscosin C(1)、cleomiscosin A(2)、莨菪亭(3)、6
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姜酚(4)和6
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姜烯酚(5)5个酚类化合物，其化学结构式见图1。
[0005]为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]本专利技术提供一种从白桐树中提取酚类化合物的方法，所述方法包括以下步骤：
[0007]步骤1：将白桐树植物原料加入溶剂进行提取获得提取液，提取液减压浓缩获得浸膏，所述溶剂为甲醇、乙醇或水中的任意一种或至少两种的组合；
[0008]步骤2：将步骤1所得浸膏加水分散至相对密度1.05～1.20(室温时测定值)得水分散液，加入石油醚萃取，收集水相部分，再用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯部分，减压浓缩得
乙酸乙酯萃取物；
[0009]步骤3：将步骤2所得乙酸乙酯萃取物经聚酰胺柱层析分离纯化得白桐树总多酚粗品；
[0010]步骤4：将步骤3所得白桐树总多酚粗品经C18柱层析分离纯化得柱层析样品I；
[0011]步骤5：将步骤4所得柱层析样品I经凝胶柱层析分离纯化得目标I段组分、目标II段组分和目标Ⅲ段组分；
[0012]步骤6：将目标I段组分和目标II段组分分别经半制备型高效液相色谱法分离纯化得酚类化合物cleomiscosin C、cleomiscosin A、6
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姜烯酚和6
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姜酚，所述半制备型高效液相色谱的分离条件为：色谱柱为耐酸性C18色谱柱，以0.1wt％～0.3wt％的磷酸水溶液和乙腈为流动相，检测波长300～365nm，流速2～5ml/min，分别收集对应于目标成分的色谱图特征峰的洗脱液，浓缩干燥既得所述酚类化合物；
[0013]将目标Ⅲ段组分经重结晶得酚类化合物莨菪亭，所述重结晶溶剂为甲醇、乙醇、氯仿中的任意一种或至少两种的组合。
[0014]作为本专利技术的优先方案，本专利技术中步骤1中白桐树植物原料在提取前还包括前处理步骤，所述前处理为取白桐树植物原料，烘干或晒干，粉碎至20～80目；所述白桐树植物原料为白桐树根、杆或枝中的任意一种或至少两种的组合。
[0015]优选地，步骤1提取中白桐树植物原料与溶剂的质量体积比为1:8～20，进一步优选为1:8～13，单位为g/ml，所述原料与溶剂的质量体积比是指原料的质量与溶剂的体积之比，例如，每g原料采用8～20ml的溶剂进行提取。
[0016]优选地，步骤1所述提取中溶剂为70vol％～100vol％的甲醇或乙醇水溶液；
[0017]优选地，步骤1中所述提取方法选自热回流提取、超声提取或超声辅助热回流提取中的一种或至少两种的组合；
[0018]优选地，所述超声提取，超声功率为20KHz～40KHz，优选为20KHz～30KHz，超声时间为1～3h，优选为1.5～2.5h，提取次数为1～4次；
[0019]优选地，所述热回流提取，温度为50～100℃，时间1～3h，优选2～3h,提取1～4次；
[0020]优选地，所述超声辅助热回流提取，超声功率为20KHz～40KHz，优选为20KHz～30KHz，超声时间为1～3h，优选为1.5～2h，温度为50～100℃，提取次数为1～4次。
[0021]优选地，步骤1中，所述减压浓缩为浓缩至无有机溶剂气味且相对密度在1.20以下(室温时测定值)。
[0022]优选地，步骤2中，所述石油醚萃取中，水分散液与石油醚的体积比为1:1～3，进一步优选为1:1，经石油醚萃取可以除去大部分小极性脂溶性杂质成分。
[0023]优选地，步骤2中，所述乙酸乙酯萃取中，水相部分与乙酸乙酯的体积比为1:1～3，进一步优选为1:1，经乙酸乙酯萃取保留酚类成分，水溶性强极性杂质成分则留在水层而被除去。
[0024]优选地，步骤3中，所述聚酰胺柱为粒径为30～200目的聚酰胺，优选60～100目；所述乙酸乙酯萃取物与聚酰胺填料的质量比为1:50～100，如55倍、60倍、70倍、75倍、80倍、85倍、90倍或95倍等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用；所述聚酰胺柱的高径比为5～10:1，如6:1、7:1、8:1或9:1等，但并不仅限于所列举的数值，该数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0025]优选地，步骤3所述聚酰胺柱层析分离纯化用洗脱溶剂为乙醇水溶液，洗脱流速为5～20ml/min，洗脱方式为梯度洗脱：先用25vol％～30vol％乙醇洗脱5～8个柱体积除去杂质，再用60vol％～75vol％乙醇洗脱3～6个柱体积，收集洗脱液，最后用95vol％乙醇冲洗柱子。
[0026]优选地，步骤4所述洗脱在5～20bar的中低压色谱条本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从白桐树中提取酚类化合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1：将白桐树植物原料加入溶剂进行提取获得提取液，提取液减压浓缩获得浸膏，所述溶剂为甲醇、乙醇或水中的任意一种或至少两种的组合；步骤2：将步骤1所得浸膏加水分散至相对密度1.05～1.20(室温时测定值)，得水分散液，加入石油醚萃取，收集水相部分，再用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯部分，减压浓缩得乙酸乙酯萃取物；步骤3：将步骤2所得乙酸乙酯萃取物经聚酰胺柱层析分离纯化得白桐树总多酚粗品；步骤4：将步骤3所得白桐树总多酚粗品经C18柱层析分离纯化得柱层析样品I；步骤5：将步骤4所得柱层析样品I经凝胶柱层析分离纯化得目标I段组分、目标II段组分和目标Ⅲ段组分；步骤6：将目标I段组分和目标II段组分分别经半制备型高效液相色谱法分离纯化得酚类化合物cleomiscosin C、cleomiscosin A、6
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姜烯酚和6
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姜酚，所述半制备色谱的分离条件为：色谱柱为耐酸性C18色谱柱，以0.1～0.3wt％的磷酸水溶液和乙腈为流动相，检测波长300～365nm，流速2～5ml/min，分别收集对应于目标成分的色谱图特征峰的洗脱液，浓缩干燥既得所述酚类化合物；将目标Ⅲ段组分经重结晶得酚类化合物莨菪亭，所述重结晶溶剂为甲醇、乙醇、氯仿中任意一种或至少两种的组合。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1中所述提取中白桐树植物原料与溶剂的质量体积比为1:8～20，单位为g/ml；所述提取方法为热回流提取、超声提取或超声辅助热回流提取中的任意一种或至少两种的组合；提取次数为1～4次，合并多次提取液，减压浓缩回收溶剂得浸膏；优选地，所述超声提取，超声功率为20KHz～40KHz，超声时间为1～3h；优选地，所述热回流提取，温度为50～100℃，时间为1～3h；优选地，所述超声辅助热回流提取，超声功率为20KHz～40KHz，超声时间为1～3h，温度为50～100℃；优选地，所述减压浓缩为浓缩至无有机溶剂气味且相对密度在1.20以下(室温时测定值)。3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2中所述石油醚萃取中水分散液与石油醚的体积比为1:1～3；所述乙酸乙酯萃取中，水相部分与乙酸乙酯的体积比为1:1～3。4....

【专利技术属性】
技术研发人员：王志尧，常霞，王伟，王韬，马艳妮，姜晓，陈飞，罗远情，
申请(专利权)人：河南省科学院，
类型：发明
国别省市：