WTN多肽及其在检测前列腺癌中的用途制造技术

本发明专利技术提供了WTN多肽及其在检测前列腺癌中的用途，同时提供了包括WTN多肽的多肽复合物、其编码DNA分子、其所在的载体、宿主细胞和药物组合物、检测PSMA的试剂盒，所述试剂盒包括前述WTN多肽的缀合物。括前述WTN多肽的缀合物。括前述WTN多肽的缀合物。

【技术实现步骤摘要】
ID NO:1所示的多肽有90％以上的同源性的多肽，具体地，所述多肽与SEQ ID NO:1有90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％，100％的同源性。
[0009]优选地，所述WTN多肽在SEQ ID NO:1所示的多肽的第1位、第2位、第3位、第4位、第5位、第6位、第7位、第8位、第9位、第10位、第11位和第12位中的一个或多个位置发生取代、缺失或添加。
[0010]优选地，所述WTN多肽是SEQ ID NO:1所示的多肽。
[0011]优选地，所述WTN多肽是在SEQ ID NO:1所示的多肽主链或侧链末端的氨基、羧基、巯基、酚羟基、咪唑基、胍基、吲哚基、甲硫基等位点进行化学修饰后的产物。
[0012]优选地，所述的化学修饰包括乙酰化、酰胺化、糖基化、聚乙二醇(PEG)修饰、脂肪酸修饰及本领域已知的其它多肽修饰技术。
[0013]优选地，所述乙酰化和酰胺化包括多肽主链N端乙酰化，多肽主链C端酰胺化。
[0014]优选地，所述糖基化修饰包括N
‑
糖基化、O
‑
糖基化、S
‑
糖基化、C
‑
糖基化以及糖基磷脂酰肌醇修饰。
[0015]优选地，所述N
‑
糖基化是通过天冬酰胺使侧链的酰胺氮进行连接。
[0016]优选地，所述O
‑
糖基化是与丝氨酸或苏氨酸残基上的氧相连。
[0017]优选地，所述的糖结构包括各种单糖、寡糖和多糖。
[0018]优选地，所述PEG修饰类型包括直链PEG，支链PEG，同双官能团PEG衍生物，异官能团双取代PEG衍生物和多臂官能团PEG衍生物。
[0019]优选地，所述脂肪酸修饰可分为不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸修饰。
[0020]优选地，所述饱和脂肪酸包括肉豆蔻酸、棕榈酸。
[0021]优选地，所述不饱和脂肪酸修饰包括油酸、亚油酸。
[0022]本专利技术第二方面提供了一种多肽复合物，所述多肽复合物是在前述WTN多肽的氨基端和/或羧基端以肽键连接结构域；
[0023]优选地，所述结构域是由氨基酸组成的；
[0024]优选地，所述结构域包括铰链区、跨膜结构域和/或信号转导结构域；
[0025]优选地，所述铰链区包括CD8α铰链区、CD28铰链区、CD4铰链区、CD5铰链区、CD134铰链区、CD137铰链区、ICOS铰链区中的一种或多种的组合。
[0026]优选地，所述跨膜结构域包括蛋白质的跨膜结构域，所述蛋白质包括：2B4基因表达的蛋白、T细胞受体的α、β或ζ链，CD28，CD3ε，CD45，CD4，CD5，CD8，CD9，CD16，CD22，CD33，CD37，CD64，CD80，CD86，CD123，CD134，CD137和CD154。
[0027]优选地，所述信号转导结构域包含共刺激结构域和/或初级信号传导结构域。
[0028]优选地，所述共刺激结构域包括2B4、CD3ζ、OX40、CD2、CD27、CD28、CDS、ICAM
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1、LFA
‑
1(CD11a/CD18)、ICOS(CD278)和4
‑
1BB(CD137)的功能性信号传导结构域。
[0029]优选地，所述初级信号传导结构域包括CD3
‑
ζ、FcεRIγ、FcRγ、FcRβ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD5、CD22、CD79a、CD79b和CD66d的一种蛋白或多种蛋白的任意组合的信号传导区；
[0030]优选地，所述多肽复合物是肿瘤抗原结合肽。
[0031]优选地，所述肿瘤抗原结合肽的组成是WTN多肽区
‑
铰链区
‑
跨膜结构域
‑
共刺激结构域
‑
初级信号传导结构域或WTN多肽区
‑
铰链区
‑
跨膜结构域
‑
初级信号传导结构域。
[0032]优选地，所述WTN多肽区包括多个WTN多肽的重复和多个WTN多肽的重复之间的
linker。
[0033]优选地，所述多个可以是1个、2个、3个、4个、5个。
[0034]本专利技术第三方面提供了一种编码前述WTN多肽的DNA分子。
[0035]优选地，所述编码WTN多肽的DNA分子序列如SEQ ID NO:2所示。
[0036]本专利技术第四方面提供了一种编码前述多肽复合物的DNA分子。
[0037]本专利技术第五方面提供了一种载体，所述载体包含前述编码多肽的DNA分子和/或前述多肽复合物的DNA分子。
[0038]优选地，所述载体是表达载体。
[0039]优选地，所述表达载体中还包括可操作地连接的启动子和转录终止序列。
[0040]优选地，所述表达载体是质粒表达载体或病毒表达载体。
[0041]所述质粒表达载体包括但不限于pcDNA3.1+/
‑
，pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1，pTracer CMV2，pcDNA3.1(
‑
)/myc
‑
His A，pcDNA6
‑
Myc/His B，pCEP4，pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV
‑
myc，pCMV
‑
HA，pIRES
‑
puro3，pIRES
‑
neo3，pCAGGS，pSilencer1.0，pSilencer2.1
‑
U6 hygro，pSilencer3.1
‑
H1hygro，pSilencer3.1
‑
H1neo，pSilencer4.1
‑
CMV neo。
[0042]优选地，所述病毒表达载体包括慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒表达载体或其他类型病毒载体。
[0043]优选地，所述病毒表达载体包括但不限于pLKO.1，pLVX
‑
IRES
‑
ZsGreen1，pCDH
‑
EF1
‑
Luc2
‑
T2A
‑
tdTomato，pCDH
‑
MSCV
‑
MCS
‑
EF1
‑
Puro，pCDH
‑
MSCV
‑
MCS
‑
EF1
‑
copGFP，pLVX
‑
ZsGreen1
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C1，pAdEasy
‑
1，pShuttle
‑
CMV，pShuttle，pAdTrack，pAdTrack本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种与PSMA特异性结合的WTN多肽，其特征在于，所述WTN多肽是与SEQ ID NO:1所示的多肽有90％以上的同源性的多肽；优选地，所述WTN多肽在SEQ ID NO:1所示的多肽的第1位、第2位、第3位、第4位、第5位、第6位、第7位、第8位、第9位、第10位、第11位和第12位中的一个或多个位置发生取代、缺失或添加；优选地，所述WTN多肽是SEQ ID NO:1所示的多肽；优选地，所述WTN多肽还包括在SEQ ID NO:1所示的多肽主链或侧链末端的氨基、羧基、巯基、酚羟基、咪唑基、胍基、吲哚基、甲硫基中的一个或多个位点进行化学修饰后的产物。2.一种多肽复合物，其特征在于，所述多肽复合物是在权利要求1所述的WTN多肽的氨基端和/或羧基端以肽键连接结构域；优选地，所述结构域是由氨基酸组成的；优选地，所述结构域包括铰链区、跨膜结构域和/或信号转导结构域；优选地，所述信号转导结构域包含共刺激结构域和/或初级信号传导结构域；优选地，所述多肽复合物是肿瘤抗原结合肽；优选地，所述肿瘤抗原结合肽的组成是WTN多肽区
‑
铰链区
‑
跨膜结构域
‑
共刺激结构域
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初级信号传导结构域或WTN多肽区
‑
铰链区
‑
跨膜结构域
‑
初级信号传导结构域；优选地，所述WTN多肽区包括多个WTN多肽的重复和多个WTN多肽的重复之间的linker。3.编码权利要求1所述的WTN多肽或权利要求2所述的多肽复合物的DNA分子；优选地，所述编码WTN多肽的DNA分子序列如SEQ ID NO:2所示。4.包含权利要求3所述的DNA分子的载体；优选地，所述载体是表达载体；优选地，所述表达载体是质粒表达载体或病毒表达载体。5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求1所述的多肽、权利要求2所述的多肽复合物、权利要求3所述的DNA分子、权利要求4所述的载体中的一种或多种；优选的，所述宿主细胞包括原核细胞和真核细胞；优选的，所述原核细胞是细菌细胞；优选地，所述真核细胞是哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞、真菌细胞或藻类细胞；优选地，所述哺乳动物细胞包括人源细胞或非人源的细胞；优选地，所述人源细胞是免疫细胞；优选地，所述免疫细胞是NK细胞或T细胞。6.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1所述的多肽、权利要求2所述的多肽复合物、权利要求3所述的DNA分子、权利要求4所述的载体或权...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹乐，顾雨春，
申请(专利权)人：呈诺再生医学科技珠海横琴新区有限公司，
类型：发明
国别省市：