一种肺腺癌细胞系及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医学技术领域，具体公开了一种肺腺癌细胞系及其应用。该肺腺癌细胞系命名为人源肺癌细胞Lung(116)

【技术实现步骤摘要】
一种肺腺癌细胞系及其应用


[0001]本专利技术涉及生物医学
，具体涉及一种肺腺癌细胞系及其应用。

技术介绍

[0002]肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均居于首位，严重威胁着人类的健康，然而其发病机制仍然不够明确，迫切需要大量的临床前实验研究，备受研究人员的广泛关注。肺癌主要分为小细胞癌和非小细胞癌，非小细胞癌占肺癌的80
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85％，其中肺腺癌是非小细胞癌中最常见的病理类型。
[0003]肺癌PDX模型是将肺癌患者的肿瘤组织移植到免疫缺陷鼠上，构建异源移植性肿瘤模型。该模型能高度保留人源肿瘤微环境中的肿瘤细胞、浸润淋巴细胞、成纤维细胞、细胞外间质和微血管等，是目前模拟人体肿瘤微环境最理想的模型之一，是研究肿瘤发生与转移机制、筛选和评价抗肿瘤药物的最有力工具。根据移植部位的不同，可将肺癌PDX模型分为原位PDX模型和异位PDX模型，其中异位模型只要是将肿瘤细胞移植于小鼠的皮下。PDX模型获得的移植瘤具有与人原发肿瘤组织相同的组织学形态、起源、免疫组织化学及基因表型等特征，因此肺癌PDX模型是肿瘤治疗过程筛选新型药物的优势模型，为肺癌患者精准的个性化治疗提供了可能途径；同时，也是耐药基因筛选的有效平台，能有效指导临床前用药。然而，PDX模型的构建所需成本较高，同时该模型的建模时间较长，从接种、移植、传代到药效学评估，整个实验过程耗时在2
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16个月左右，不排除个别肿瘤成瘤率较低或无法成瘤的问题。以上问题限制了临床工作中肺癌 PDX模型的广泛应用。
>[0004]肺癌细胞系在肺癌致病、侵袭转移和耐药等分子机制、生物学特征研究以及新药开发方面，具有重要的理论探究与临床指导价值。利用PDX模型的肿瘤组织构建一种新的肺腺癌细胞系，可充分利用PDX模型资源，同时丰富了可用于肺癌研究的细胞系，在新药筛选上具有重要的应用价值。

技术实现思路

[0005]为了克服
技术介绍
中提到的至少一种技术缺陷，本专利技术首先提供了一种肺腺癌细胞系。
[0006]本专利技术所要解决的上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：
[0007]本专利技术的第一方面，提供一种肺腺癌细胞系，该肺腺癌细胞系命名为人源肺癌细胞Lung(116)
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clone 1；保藏编号为GDMCC No:61576。该肺腺癌细胞系已于2021年3月22日保藏在广东省微生物菌种保藏中心(保藏编号为GDMCCNo:61576)，保藏地址：中国广东。
[0008]本专利技术所述的肺腺癌细胞系是从腺癌PDX模型中构建得到。
[0009]本专利技术从腺癌PDX模型中构建肺腺癌细胞系的难点在于：并不是所有构建出来的肺腺癌细胞系都具有较高的成瘤率高；也并不是所有构建出来的肺腺癌细胞系成瘤后，其成瘤组织能保持与原始肺腺癌肿瘤和PDX模型肿瘤具有相同的病理特征。然而，构建出来的肺腺癌细胞系不能成瘤或成瘤率不高，并不产生肿瘤组织，是无法应用于后期的抗肺腺癌
药物评估以及致病机理方面的研究的；若成瘤后其成瘤组织不能保持与原始肺腺癌肿瘤或PDX模型肿瘤具有相同的病理特征，则无法精准的用于后期抗肺腺癌药物评估以及致病机理方面的研究。
[0010]本专利技术经过大量的实验研究，构建得到的人源肺癌细胞Lung(116)
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clone 1，其具有较高的成瘤率，其F25代细胞成瘤时间短，成瘤率可达100％；此外，本专利技术构建得到的人源肺癌细胞Lung(116)
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clone 1，还保持了与原始肺腺癌肿瘤以及PDX模型肿瘤具有相同的病理特征。
[0011]本专利技术的第二方面，提供上述肺腺癌细胞系在制备肺癌肿瘤动物模型中的应用。
[0012]本专利技术的第三方面，提供上述肺腺癌细胞系在筛选抗肺癌药物中的应用。
[0013]本专利技术的第四方面，提供上述肺腺癌细胞系在研究肺癌肿瘤细胞增殖机制中的应用。
[0014]本专利技术的第五方面，提供上述肺腺癌细胞系在研究肺癌肿瘤细胞耐药机理中的应用。
[0015]本专利技术的第六方面，提供上述肺腺癌细胞系在开发肺癌肿瘤药物靶点中的应用。
[0016]有益效果：本专利技术提供了一种全新的肺腺癌细胞系；研究表明，本专利技术所述的肺腺癌细胞系能够稳定传代、具有较高的成瘤率，其能保证在制备肺癌肿瘤动物模型时能够顺利成瘤，得到成瘤组织；且所述的肺腺癌细胞系成瘤后，其成瘤组织与原始肺腺癌肿瘤和PDX模型肿瘤具有相同的病理特征，较好地保有原始肺腺癌肿瘤以及PDX模型肿瘤的生物学特征；因此可以将其用于筛选抗肺癌药物，用于研究肺癌肿瘤细胞增殖机制、研究肺癌肿瘤细胞耐药机理，以及用于开发肺癌肿瘤药物靶点。由于所述的肺腺癌细胞系与PDX模型肿瘤具有相同的病理特征，因此，该肺腺癌细胞系在实际应用中可以替代PDX模型；克服了
技术介绍
中提到的PDX模型构建成本高、建模时间长以及无法大规模推广应用的问题。此外，本专利技术所述的肺腺癌细胞系能够表达EPCAM、NSE、CEA三种肺腺癌标志物；因此，本专利技术所述的肺腺癌细胞系可以用作以EPCAM、NSE、CEA 为靶标的肺癌靶向药物研究。
附图说明
[0017]图1为本专利技术肺腺癌细胞系在光学显微镜下的细胞形态图。
[0018]图2为本专利技术肺腺癌细胞系在NSG小鼠皮下成瘤及肿瘤组织解剖图。
[0019]图3为本专利技术肺腺癌细胞系在NSG小鼠皮下成瘤组织的生长曲线图。
[0020]图4为本专利技术肺腺癌细胞系上EPCAM,NSE,CEA三种标志物免疫荧光表达情况图。
[0021]图5为患者来源的肺腺癌组织、PDX模型成瘤组织和本专利技术肺腺癌细胞系成瘤组织的病理图。图中，Lung(116)F0表示患者来源的肺腺癌组织；Lung (116)F2表示PDX模型成瘤组织；Lung(116)clone 1表示本专利技术肺腺癌细胞系成瘤组织。
具体实施方式
[0022]以下结合具体实施例来进一步解释本专利技术，但实施例对本专利技术不做任何形式的限定。
[0023]实施例1本专利技术肺腺癌细胞系的构建
[0024]本实施例对一例肺腺癌PDX模型的成瘤组织(F2代)，进行消化、分选培养、单克隆
挑选、扩增传代，获得一株稳定传代的肺腺癌细胞系，命名为人源肺癌细胞Lung(116)
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clone 1。具体方法如下：
[0025](1)配置培养基：500ml DMEM/F12，1
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双抗，10％FBS，20ng/ml EGF， 10ng/ml bFGF，5ng/ml TGFB。
[0026](2)配置肿瘤组织消化液：使用MACS试剂盒(order NO.130
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095
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929)，过滤、避光。
[0027](3)取材、消化：将小鼠安乐死后，浸泡在75％酒精内，准备两副灭菌的镊子和剪刀，第一副用来将小鼠皮下肿瘤组织剪开，利用钝性分离皮肤和肿瘤组织。将离体的组织放入盛放1
×
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肺腺癌细胞系，其特征在于，该肺腺癌细胞系命名为人源肺癌细胞Lung(116)
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clone 1；保藏编号为GDMCC No:61576。2.权利要求1所述的肺腺癌细胞系在制备肺癌肿瘤动物模型中的应用。3.权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡金芳，陈思羽，蔡女略，蔡嘉怡，
申请(专利权)人：广东省实验动物监测所，
类型：发明
国别省市：