柴胡药材、提取物及单味制剂的指纹图谱的建立方法技术

本发明专利技术涉及柴胡药材质量分析技术领域，尤其是涉及一种柴胡药材、提取物及单味制剂的指纹图谱的建立方法。柴胡药材、提取物及单味制剂的指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：采用HPLC

【技术实现步骤摘要】
柴胡药材、提取物及单味制剂的指纹图谱的建立方法


[0001]本专利技术涉及柴胡药材质量分析
，尤其是涉及一种柴胡药材、提取物及单味制剂的指纹图谱的建立方法。

技术介绍

[0002]柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium willd.的干燥根，春秋二季采挖，除去茎叶和泥沙，干燥。柴胡药材主产于山西、陕西、甘肃、河北等地，具有疏散退热，疏肝解郁，升举阳气等功效。
[0003]柴胡中主要含有皂苷、黄酮、挥发油、多糖等成分，目前多以柴胡皂苷来评价柴胡的质量，《中国药典》一部“柴胡”药材项下，以柴胡皂苷a和柴胡皂苷d作为含量控制指标，并没有指纹图谱方法。中药成分复杂，其临床药效的发挥是所含化学成分共同作用的结果，其所含化学成分直接影响其药材质量，而一两成分的含量测定很难真实反映中药质量，因此，需要建立指纹图谱方法对中药整体化学成分进行分析，科学、全面地评价药材质量，为其临床应用提供科学依据。
[0004]目前，文献资料中对柴胡药材指纹图谱的研究大多采用紫外(UV)或蒸发光散射(ELSD)检测器。UV检测器只能检测到有紫外吸收的成分，不含发色团的物质则没有响应不能被检测到；ELSD虽然是通用型检测器，但由于其检测灵敏度低，重复性差等不足，对于中药中一些含量低的成分很难达到良好的检测效果。因此，需要建立灵敏度高，重现性好通用型检测器的指纹图谱检测方法。
[0005]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供柴胡药材、提取物及单味制剂的指纹图谱的建立方法，以解决现有技术中存在的不能全面表征柴胡药材的质量的技术问题。
[0007]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0008]柴胡药材、提取物及单味制剂的指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：
[0009]采用HPLC
‑
CAD法对供试品溶液进行检测，得到含22个共有特征峰的指纹图谱；
[0010]所述HPLC
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CAD法的检测条件包括：
[0011]以甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱；所述梯度洗脱包括：0～20min，流动相A的体积分数由88％～92％变至68％～72％；20～35min，流动相A的体积分数由68％～72％变至63％～67％；35～60min，流动相A的体积分数由63％～67％变至58％～62％；60～65min，流动相A的体积分数由58％～62％变至53％～57％；65～70min，流动相A的体积分数为53％～57％；70～85min，流动相A的体积分数由53％～57％变至33％～37％；85～90min，流动相A的体积分数由33％～37％变至13％～17％；90～100min，流动相A的体积分数由13％～17％变至8％～12％；100～105min，流动相A的体积分数由8％～12％变至3％～7％。
[0012]在本专利技术的具体实施方式中，所述梯度洗脱包括：0～20min，流动相A的体积分数由90％变至70％；20～35min，流动相A的体积分数由70％变至65％；35～60min，流动相A的体积分数由65％变至60％；60～65min，流动相A的体积分数由60％变至55％；65～70min，流动相A的体积分数为55％；70～85min，流动相A的体积分数由55％变至35％；85～90min，流动相A的体积分数由35％变至15％；90～100min，流动相A的体积分数由15％变至10％；100～105min，流动相A的体积分数由10％变至5％。
[0013]本专利技术通过采用一定的检测方法、色谱条件等建立得到的柴胡药材的指纹图谱中，具有22个共有特征峰，共有特征峰中不仅含有具有紫外吸收的成分(如黄酮类等)，还包括弱紫外吸收的成分(如皂苷类等)以及部分无紫外吸收的成分，可通过多类成分全面表征和评价柴胡药材的质量，为柴胡的资源充分利用提供科学依据，解决了柴胡药材质量评价指标单一等问题。本专利技术的方法还具有灵敏度高、重现性好等优点。
[0014]在本专利技术的具体实施方式中，还包括：采用所述HPLC
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CAD法对对照品溶液进行检测；所述对照品包括柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d、柴胡皂苷e和柴胡皂苷f中的任一种或多种。优选的，所述对照品包括柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d、柴胡皂苷e和柴胡皂苷f。
[0015]在本专利技术的具体实施方式中，所述甲酸水溶液中，甲酸的体积分数为0.05％～0.15％。进一步的，所述流动相A为体积分数为0.1％的甲酸水溶液。
[0016]在本专利技术的具体实施方式中，检测流速为1.0～1.5mL/min，优选为1.4mL/min。
[0017]如在不同实施方式中，检测流速可以为1.0mL/min、1.1mL/min、1.2mL/min、1.3mL/min、1.4mL/min、1.5mL/min等等。
[0018]采用上述检测流速，能进一步兼顾提高色谱峰分离度以及检测效率。
[0019]在本专利技术的具体实施方式中，色谱柱的柱温为30～40℃，优选为40℃。
[0020]如在不同实施方式中，色谱柱的柱温可以为30℃、32℃、34℃、35℃、36℃、38℃、40℃等等。
[0021]在本专利技术的具体实施方式中，所述HPLC
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CAD法采用的色谱柱为C18色谱柱，优选为Agilent ZORBAX SB
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C18柱(150
×
4.6mm，3.5μm)。
[0022]在本专利技术的具体实施方式中，所述HPLC
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CAD法的检测条件包括：
[0023]所述流动相A为体积分数为0.1％的甲酸水溶液，所述流动相B为乙腈；
[0024]色谱柱为Agilent ZORBAX SB
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C18(150
×
4.6mm，3.5μm)；
[0025]柱温为40℃；
[0026]流速为1.4mL/min；
[0027]CAD漂移管温度为35℃或50℃，气体流速为2.2～2.6L/min。
[0028]如在不同实施方式中，CAD参数中，气体流速可以为2.2L/min、2.3L/min、2.4L/min、2.5L/min、2.6L/min等等，如2.4L/min。
[0029]在本专利技术的具体实施方式中，进样量为10～20μL，优选为20μL。
[0030]在本专利技术的具体实施方式中，所述供试品溶液的制备方法包括：
[0031]当待测物质为柴胡药材时，以甲醇水溶液作为提取溶剂对所述柴胡药材进行超声提取或回流提取后，以所述提取溶剂补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
[0032]对于固体剂型或半固体剂型的柴胡提取物、柴胡单味制剂，其指纹图谱的供试品
溶液的制备方法同柴胡药材。具体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.柴胡药材、提取物及单味制剂的指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：采用HPLC
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CAD法对供试品溶液进行检测，得到含22个共有特征峰的指纹图谱；所述HPLC
‑
CAD法的检测条件包括：以甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱；所述梯度洗脱包括：0～20min，流动相A的体积分数由88％～92％变至68％～72％；20～35min，流动相A的体积分数由68％～72％变至63％～67％；35～60min，流动相A的体积分数由63％～67％变至58％～62％；60～65min，流动相A的体积分数由58％～62％变至53％～57％；65～70min，流动相A的体积分数为53％～57％；70～85min，流动相A的体积分数由53％～57％变至33％～37％；85～90min，流动相A的体积分数由33％～37％变至13％～17％；90～100min，流动相A的体积分数由13％～17％变至8％～12％；100～105min，流动相A的体积分数由8％～12％变至3％～7％。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括：采用所述HPLC
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CAD法对对照品溶液进行检测；所述对照品包括柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d、柴胡皂苷e和柴胡皂苷f中的任一种或多种；优选的，所述对照品包括柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d、柴胡皂苷e和柴胡皂苷f。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱包括：0～20min，流动相A的体积分数由90％变至70％；20～35min，流动相A的体积分数由70％变至65％；35～60min，流动相A的体积分数由65％变至60％；60～65min，流动相A的体积分数由60％变至55％；65～70min，流动相A的体积分数为55％；70～85min，流动相A的体积分数由55％变至35％；85～90min，流动相A的体积分数由35％变至15％；90～100min，流动相A的体积分数由15％变至10％；100～105min，流动相A的体积分数由10％变至5％；优选的，所述甲酸水溶液中，甲酸的体积分数为0.05％～0.15％；优选的，所述流动相A为体积分数为0.1％的甲酸水溶液。4.根据权利要求1
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3任一项所述的方法，其特征在于，所述HPLC
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CAD法中，检测流速为1.0～1.5mL/min；和/或，采用的色谱柱为C18色谱柱；和/或，色谱柱的柱温为30～40℃。5.根据权利要求1
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3任一项所述的方法，其特征在于，所述HPLC
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CAD法的检测条件包括：所述流动相A为体积分数为0.1％的甲酸水溶液，所述流动相B为乙腈；色谱柱为Agilent ZORBAX SB
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C18，150
×
4.6mm，3.5μm；柱温为40℃；流速为1.4mL/min；CAD漂移管温度为35℃或50℃。6.根据权利要求1
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3任一项所述的方法，其特征在于，所述柴胡药材、固体或半固体剂型的柴胡提取物、固体或半固体剂型的柴胡单味制剂的供试品溶液的制备方法包括：以甲醇水溶液作为提取溶剂对所述柴胡药材、柴胡提取物或柴胡单味制剂进行超声提取或回流提取后，以所述提取溶剂补足减失的重量，滤过，取续...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙欣光，周丽娟，杨晓宁，朱平，游蓉丽，王红宇，王玉龙，
申请(专利权)人：山西振东道地药材开发有限公司，
类型：发明
国别省市：