一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒，其包括浓度为1

【技术实现步骤摘要】
一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒。

技术介绍

[0002]铜是继铁离子和锌离子后在人体内含量第三丰富的过渡金属离子，普遍存在于自然界中，也是人体必需的微量元素，会对中枢神经系统、心血管系统和造血功能等产生重要影响，且在酶的生理活动中也是必不可少的微量元素。人体内如果缺乏铜元素会导致代谢紊乱，摄入过量的铜会产生毒害作用，进而危害人体健康甚至导致死亡，例如:铜离子的异常代谢和过度累积与阿尔茨海默症、帕金森病和肌萎缩性侧索硬化症都有密切关系。此外，随着社会的发展，铜矿被过量的开采和冶炼，导致水环境、土壤和大气受到铜污染，并通过生物链的富集对人体健康造成严重的危害,如在工业生产中，铜及其化合物被广泛应用，有毒有害的工业废水流入水体后，铜的富集会造成严重的水环境污染，危害人体健康。因实现对生命体和环境中的铜离子的快速检测显得尤为重要。
[0003]目前，传统的铁离子检测方法主要有原子吸收光谱法，离子色谱法，气相色谱
‑
质谱法(GC
‑
MS)和电感耦合等离子体质谱(ICP
‑
MS)等。但这些方法大都较为复杂，费时且分析成本较高。

技术实现思路

[0004]因此，基于以上背景，本专利技术提供一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒，操作方法简单，检测效率高。
[0005]本专利技术提供的技术方案为：
[0006]一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒，其包括浓度为1
‑
25mM、1,3
‑
二羟基萘溶液和浓度为1
‑
25mM多巴胺溶液；
[0007]所述1,3
‑
二羟基萘溶液由1,3
‑
二羟基萘溶解于无水乙醇中制备得到；
[0008]所述多巴胺溶液由盐酸多巴胺溶解于无水乙醇中得到。
[0009]进一步地，其还包括PBS缓冲溶液。
[0010]进一步地，所述PBS缓冲液的pH为7.4。
[0011]本专利技术还提供了一种检测铜离子浓度的方法，其检测步骤如下：
[0012]1)按照相同摩尔浓度与体积的比例，将1,3
‑
二羟基萘溶液和多巴胺溶液加入PBS缓冲溶液中并混合均匀；
[0013]2)然后将铜离子溶液或血清加入步骤1)的混合溶液中；
[0014]3)对步骤2)的混合溶液进行荧光光谱和紫外可见吸收光谱测试；
[0015]4)根据步骤3)检测的荧光强度利用标准曲线计算铜离子溶液或血清中的铜离子浓度。
[0016]进一步地，所述标准曲线的建立过程为：
[0017]1)按照上述的步骤1)的比例将1,3
‑
二羟基萘溶液和多巴胺溶液加入于相同pH值的PBS缓冲溶液并混合均匀；
[0018]2)配制铜离子溶液；
[0019]3)将步骤2)铜离子溶液慢慢滴入加入步骤1)中的混合液中；
[0020]4)将步骤3)中的混合溶液进行荧光光谱测试，根据铜离子溶液滴入过程中所检测的混合溶液的荧光强度与铜离子浓度，即可绘制标准曲线。
[0021]进一步地，步骤2)中所配制的铜离子的浓度在1
‑
10μM。
[0022]采取上述技术方案，具有的有益效果如下：
[0023]本专利技术的检测方法简单，易于操作，能够快速检测到待测溶液或血清中铜离子的浓度，对检测生命体内的铜离子的含量具有很大的实际意义，铜离子的最低检测限0.1μM，检测限较低，检测具有较高的灵敏度，能够满足较低的铜离子浓度下检测和定量的要求。
附图说明
[0024]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0025]图1为本专利技术实施例1的不同浓度铜离子的加入的混合液的荧光强度变化；
[0026]图2为本专利技术实施例1的混合液中荧光强度随着铜离子浓度变化的标准曲线；
[0027]图3为本专利技术实施例1的铜离子在5μM时的紫外可见吸收光谱图；
[0028]图4为本专利技术实施例1的加入不同铜离子浓度的混合溶液的荧光图片；
[0029]图5为本专利技术实施例2不同疾病患者的血清中铜离子的检测结果。
具体实施方式
[0030]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0031]在本专利技术的描述中，“第一特征”、“第二特征”可以包括一个或者更多个该特征。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。
[0032]下面结合附图对本专利技术做进一步说明。
[0033]实施例1：一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒，其包括浓度为25mM的1,3
‑
二羟基萘溶液和浓度为25mM的多巴胺溶液、pH为7.4的PBS缓冲溶液(其浓度为10mM)。
[0034]所述1,3
‑
二羟基萘溶液由1,3
‑
二羟基萘溶解于无水乙醇中后，经超声后完全溶解制备得到；
[0035]所述多巴胺溶液由盐酸多巴胺溶解于无水乙醇中后，经超声后完全溶解制备得
到。
[0036]采用本实施例的试剂盒检测铜离子浓度的具体操作步骤为：
[0037]1)按照相同摩尔浓度与体积的比例，将1,3
‑
二羟基萘溶液和多巴胺溶液加入1ml的PBS缓冲溶液中并混合均匀；
[0038]2)称取CuSO4
·
5H2O，溶于超纯水中，配制铜离子浓度在5μM的溶液；
[0039]3)对步骤2)的混合溶液进行荧光光谱和紫外可见吸收光谱测试(见图3)，并对加入不同铜离子浓度的混合溶液的荧光图片进行观察(见图4)，从图4可以明显看出，加入不同铜离子浓度，其荧光反应是变化的，因此可进一步的证明采用本专利技术的试剂盒对不同浓度的铜离子具有较高的灵敏度。
[0040]从图3的紫外可见吸收光谱图可以看出步骤3)中的混合溶液发生了反应，其紫外吸收光谱随着时间出现了变化(从图中可以看出，每条线间隔2min，共计40min)，因此可以合理推断，将1,3
‑
二羟基萘、多巴胺、铜离子混合后会发生反应，生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒，其特征在于，其包括浓度为1
‑
25mM的1,3
‑
二羟基萘溶液和浓度为1
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25mM的多巴胺溶液；所述1,3
‑
二羟基萘溶液由1,3
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二羟基萘溶解于无水乙醇中制备得到；所述多巴胺溶液由盐酸多巴胺溶解于无水乙醇中得到。2.根据权利要求1所述的一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒，其特征在于，其还包括PBS缓冲溶液。3.根据权利要求2所述的一种可快速检测人血清中铜离子浓度的荧光试剂盒，其特征在于，所述PBS缓冲液的pH为7.4。4.一种采取权利要求3所述试剂盒检测铜离子浓度的方法，其特征在于，其检测步骤如下：1)按照相同摩尔浓度与体积的比例，将1,3
‑
二羟基萘溶液和多巴胺溶液加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘剑波，刘海芳，郭建成，花琳琳，史健翔，邵润霞，简立国，汤文学，秦亚平，王天义，屈凌波，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：