抗CD269抗体-药物缀合物（ADC）、抗CD269抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及抗CD269抗体

【技术实现步骤摘要】
抗CD269抗体
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药物缀合物(ADC)、抗CD269抗体及其用途
[0001]本申请是申请日为2015年4月30日，国际申请号为PCT/EP2015/059562，国家申请号为201580021693.5，专利技术名称为“抗CD269(BCMA)人源化抗体”的专利技术专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及结合CD269(BCMA)的人源化抗体或抗体片段，从而破坏CD269和其天然配体(BAFF和APRIL)之间的相互作用，以及它们在治疗浆细胞介导的疾病如多发性骨髓瘤和自身免疫疾病中的用途。

技术介绍

[0003]B细胞成熟抗原(BCMA)是肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRSF)的第17个成员。它的天然配体是涉及(通过与进一步的配体相互作用)调节体液免疫、B细胞发育和内稳态的不同方面的B细胞激活因子(BAFF；也称为BLyS或TALL
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1，TNFSF13B)以及增殖诱导配体。
[0004]BCMA在恶性浆细胞上高度表达，所述恶性浆细胞例如是骨髓B细胞非霍奇金淋巴瘤的多发性骨髓瘤(MM)，以及比MM更具侵略性并构成浆细胞紊乱的所有病例的约4％的浆细胞白血病(PCL)中的恶性浆细胞。除MM和PLC之外，还在患有霍奇金淋巴瘤的患者的霍奇金和里德
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斯特恩伯格细胞(Hodgkin and Reed
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Sternberg cells)上检测到BCMA(Chiu等人(2007)Blood109:729
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739)。类似于它在浆细胞上的功能，结合于BCMA的配体显示了调节表达BCMA的多发性骨髓瘤细胞的生长和存活(Novak等人(2004)Blood 103:689
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694)。BAFF和APRIL通过BCMA的信号传导被认为是恶性浆细胞的促存活因子；因此，BCMA阳性肿瘤细胞的清除和/或配体
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受体相互作用的破坏应改善多发性骨髓瘤和自身抗体依赖的自身免疫疾病的治疗结果。
[0005]目前存在多种可用于治疗多发性骨髓瘤的方法(Raab等人(2009)Lancet 374:324
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339)。化学疗法导致多数受试者仅能部分控制多发性骨髓瘤；仅极少数进行化学疗法导致完全消退。因此经常应用结合方法，通常涉及另外施以皮质类固醇，例如地塞米松或强的松。然而，皮质类固醇被副作用，例如减少骨密度所困扰。使用某人自己的干细胞(自体的)或使用来自近亲属或相配型的无血缘供体(异体的)的细胞，干细胞移植也被提出。在多发性骨髓瘤中，进行的多数移植是自体类型。虽然不是可治愈的，但是这样的移植在选择的患者中显示出延长生命(Suzuki(2013)Jpn J Clin Oncol 43:116
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124)。可供选择地，最近沙利度胺和其衍生物已被应用于治疗但也与次佳的成功率和高成本相关。最近蛋白酶抑制剂硼替佐米(PS
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341)被批准用于治疗复发性和难治性MM，并且被单独或与已确定的药物联合用于许多临床试验，导致令人鼓舞的临床结果(Richardson等人(2003)New Engl J Med 348:2609
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2617；Kapoor等人(2012)Semin Hematol 49:228
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242)。联合治疗的成本是相对高的，并且成功率仍具有显著的改进的余地。由于同时使用多种药物时副作用的积累，治疗选择的联合也不是理想的。用于治疗浆细胞疾病，具体是多发性骨髓瘤的新方法是需要的。
[0006]特异地靶向浆细胞的能力也对治疗自身免疫疾病具有巨大益处。通常首先使用非
类固醇抗炎药(NSAID)或疾病缓解性抗风湿药(DMARD)来治疗轻度形式的自身免疫疾病。通常使用类固醇与强免疫抑制剂如靶向周期中细胞的环磷酰胺(一种细胞毒性剂)治疗涉及由于活动性疾病导致的器官功能障碍的更严重形式的系统性红斑狼疮(SLE)。仅最近，在患有自身免疫疾病的患者的血清中高水平存在的靶向细胞因子BAFF的抗体贝利单抗被食品药品监督管理局(FDA)批准其用于SLE。然而，在人体内仅新形成的B细胞依赖于BAFF以存活，而记忆B细胞和浆细胞对选择性的BAFF抑制不太敏感(Jacobi等人(2010)Arthritis Rheum 62:201
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210)。对于类风湿性关节炎(RA)，TNF抑制剂是最先被许可的生物制剂，然后是阿巴西普、利妥昔单抗和托珠单抗以及其他：它们抑制涉及关节炎症和破坏的关键炎症路径，然而由于相对的免疫抑制，以提高感染风险作为代价(Chan等人(2010)Nat Rev Immunol 10:301
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316,Keyser(2011)Curr Rheumatol Rev 7:77
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87)。尽管批准了这些生物制剂，患SR和SLE的患者常常显示自身免疫标志物的持续性，其最可能与骨髓中存在寿命长的、固着的浆细胞相关，所述浆细胞耐受例如通过利妥昔单抗和高剂量糖皮质激素和环磷酰胺疗法的CD20介导的切除。
[0007]已经在本领域描述了结合CD269(BCMA)的抗体和其在治疗不同B细胞相关的医学紊乱中的用途。Ryan等人(Molecular Cancer Therapeutics,2007 6(11),3009)描述了通过使用BCMA蛋白的第5至54位氨基酸的肽免疫大鼠获得的抗BCMA抗体。WO 2012/163805描述了BCMA结合蛋白，如嵌合抗体和人源化抗体，它们用于阻碍BAFF和/或APRIL与BCMA相互作用的用途以及它们在治疗浆细胞恶性肿瘤例如多发性骨髓瘤的潜在用途。在其中公开的抗体通过使用BCMA蛋白的第4至53位氨基酸的重组肽免疫小鼠获得。WO 2010/104949也公开了优选结合BCMA的胞外域的不同抗体以及它们在治疗B细胞介导的医学病症和紊乱中的用途。WO 2002/066516和WO 2012/066058公开了结合BCMA和另外的靶标两者的二价抗体以及它们在治疗B细胞相关医学紊乱中的潜在用途。在两个公开中的任一个公开中均没有提供关于二价抗体的结合特性和特异性表位的细节。

技术实现思路

[0008]鉴于现有技术，作为本专利技术的基础的技术问题是提供适用于治疗与病原性浆细胞相关的人类疾病如多发性骨髓瘤和自身免疫疾病的制剂。该问题通过独立权利要求的特征解决。本专利技术的优选实施方式通过从属权利要求提供。
[0009]因此，本专利技术的目的是提供结合CD269(BCMA)，具体是结合CD269(BCMA)的胞外域的表位的人源化抗体或抗体片段。
[0010]本文公开的抗体包括人源化序列、特别是优选的VL和VH结合区的人源化序列，该人源化序列保持如关于嵌合抗体J22.9
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xi描述的适当的配体亲和性。
[0011]在本专利技术的不同实施方式中，用于获得所述人源化序列的氨基酸序列修饰可以在原始嵌合抗体J22.9
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xi的CDR区或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于将治疗剂递送至CD269表达细胞的抗CD269抗体
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药物缀合物(ADC)，包括抗体或抗体片段，其中，所述抗体或其抗体片段包括VH域和VL域，所述VH域包括：
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CDR1序列RYWIS(SEQ ID NO.18)或RYWFS(SEQ ID NO.19)；
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CDR2序列EINPNSSTINYAPSLKDK(SEQ ID No.20)或EINPSSSTINYAPSLKDK(SEQ ID No.21)；和
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CDR3序列SLYYDYGDAYDYW(SEQ ID NO.22)，所述VL域包括：
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CDR1序列KASQSVESNVA；
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CDR2序列SASLRFS(SEQ ID NO 24)；以及
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CDR3序列QQYNNYPLTFG(SEQ ID NO.25)，其中，所述抗体或其片段特异性结合CD269(BCMA)的胞外域的表位，并且其中，所述抗体
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药物缀合物与治疗剂缀合，由此所述ADC包含位于所述治疗剂与所述抗体或抗体片段之间的接头。2.根据权利要求1所述的ADC，其中，所述抗体或其抗体片段包括VH域和VL域，所述VH域包括以下序列：EVQLVESGGGLVQPGGS
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LRLSCAASGFTFSRYWX1SWVRQAPGKGLVWVGEINPX2X3STINYAPSLKDKFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCASLYX4DYGDAX5DYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO.4)，其中X1：I或F；X2X3：SS或NS；X4：Y；和X5：Y，所述VL域包括以下序列：EIVMTQSPATLSVSPGERATLS
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CKASQSVX1X2NVAWYQQKPGQAPRALIYSASLRFSGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYNNYPLTFGAGTKLELKR(SEQ ID NO.12)，其中X1X2：ES。3.根据权利要求1所述的ADC，其中，所述抗体或其抗体片段包括VH域，所述VH域包括根据SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.9的序列。4.根据权利要求1所述的ADC，其中，所述抗体或其抗体片段包括VL域，所述VL域包括根据SEQ ID NO.14的序列。5.根据权利要求1所述的ADC，其中，所述抗体或其抗体片段包括VH域和VL域，所述VH域包括根据SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.9的序列，所述VL域包括根据SEQ ID NO.14的序列。6.根据权利要求5所述的ADC，其中，所述VH域与根据SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.9的序列具有至少90％的序列同一性，所述VL域与根据SEQ ID NO.14的序列具有至少90％的序列同一性。7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗CD269 ADC，其中，所述接头是由胞内肽酶或蛋白酶切割的肽基接头。8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗CD269 ADC，其中，所述接头是pH敏感性可切割接头。9.根据权利要求1至7中任一项所述的抗CD269 ADC，其中，所述接头在还原条件下是可切割的。10.根据权利要求1至9中任一项所述的抗CD269 ADC，其中，所述治疗剂选自拓扑替康、吗啉代阿霉素、根霉素、氰基吗啉代阿霉素、多拉司他汀
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10、棘霉素、考布他汀、杯形生长抑
制素、美登素、DM
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1、DM
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4、纺锤菌素、奥瑞他汀、长春花生物碱、鬼臼毒素、紫杉烷、浆果赤霉素、二甲基缬氨酸
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缬氨酸
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多拉异亮氨酸
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多拉脯氨酸
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苯丙氨酸
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对
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亚苯基二胺(AFP)、MMAF、MMAE、长春新碱、长春花碱、长春地辛、长春瑞滨、喜树碱、紫杉醇、多西他赛、埃博霉素A、埃博霉素B、诺考达唑、秋水仙素、秋水酰胺、雌莫司汀、西马多丁、圆皮海绵内酯或五加苷素。11.根据权利要求1所述的抗CD269 ADC在制备用于治疗与病原性B细胞的存在相关的医学紊乱的药物中的用途。12.根据权利要求11所述的用途，其中，与病原性B细胞相关的医学紊乱是浆细胞和/或记忆B细胞的疾病。13.根据权利要求11所述的用途，其中，与病原性B细胞相关的医学紊乱是浆细胞的癌症；或B淋巴细胞的癌症。14.根据权利要求13所述的用途，其中，所述浆细胞的癌症为多发性骨髓瘤、浆细胞瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症或浆细胞白血病。15.根据权利要求13所述的用途，其中，所述B淋巴细胞的癌症为霍奇金病。16.根据权利要求11所述的用途，其中，与病原性B细胞相关的医学紊乱是与自身反应性浆细胞和/或自身反应性记忆B细胞相关的自身免疫疾病。17.根据权利要求16所述的用途，其中，所述与自身反应性浆细胞和/或自身反应性记忆B细胞相关的自身免疫疾病是系统性红斑狼疮(SLE)或风湿性关节炎。18.一种抗体或抗体片段，包括VH域和VL域，所述VH域包括：
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CDR1序列RYWX1S(SEQ ID NO.15)，其中X1为I、F、L、V、Y、C、G或A；
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CDR2序列EINPX2X3STINYAPSLKDK(SEQ ID No.16)，其中X2X3为TS；以及
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CDR3序列SLYYDYGDAYDYW(SEQ ID NO.22)，所述VL域包括：
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CDR1序列KASQSVESNVA；
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CDR2序列SASLRFS(SEQ ID NO 24)；以及
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CDR3序列sequence QQYNNYPLTFG(SEQ ID NO.25)，其中，所述抗体或其片段特异性结合CD269(BCMA)的胞外域的表位。19.根据权利要求18所述的抗体或抗体片段，包括VL域，所述VL域包括根据SEQ ID NO.14...

【专利技术属性】
技术研发人员：费利克斯，
申请(专利权)人：马克思德布鲁克分子医学中心亥姆霍兹联合会，
类型：发明
国别省市：