本实用新型专利技术公开了一种同步检测多种马铃薯病毒的试纸条,试纸条包括样品垫、金标垫、NC膜、检测线T1
【技术实现步骤摘要】
一种同步检测多种马铃薯病毒的试纸条
[0001]本技术涉及利用免疫层析技术检测植物病毒
,具体涉及一种同步检测多种马铃薯病毒的试纸条。
技术介绍
[0002]马铃薯病毒病是影响马铃薯生产的主要病害之一,分布于世界各马铃薯种植区,病毒病流行较广,危害性较大,严重影响马铃薯的产量和质量。马铃薯一旦被病毒侵染就终身带毒,由于缺乏防治马铃薯病毒病的有效药剂,再加上感染病毒的马铃薯,可以通过块茎无性繁殖不断积累病毒,并传递给后代,从而导致马铃薯种质退化,造成大量减产,严重时减产可达 80%以上。马铃薯病毒病可以破坏植株生理功能,造成代谢紊乱,活力下降。马铃薯易受一种或几种病毒的侵染。马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯A病毒(PVA)、马铃薯M病毒(PVM)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)是侵染马铃薯最常见的6种主要病毒,感染其中一种或多种病毒都会对农业生产造成巨大的损失,无论是在种苗的脱毒还是在马铃薯的生产过程中,都要进行马铃薯病毒检测鉴定,以了解病毒是否真正脱除掉,因此高效可靠的病毒检测手段是保证种薯质量的关键。
[0003]胶体金免疫层析技术(Gold Immuno
‑
chroma
‑
tography Assay, GICA)又称为IgG试纸法,是20世纪末建立起来的一种免疫学快速检测技术。其原理是以硝酸纤维素膜为固相载体,在毛细管作用下,待测样品中的抗原会沿着该膜慢慢向前移动,当移动到固定有抗体的区域时,抗原与抗体发生特异性结合,通过显示出的免疫金颜色,从而实现特异性的免疫检测。常规利用胶体金免疫层析技术检测马铃薯病毒时,一个试纸条仅能检测一种病毒,检测效率低,成本高,当马铃薯同时感染多种病毒时容易误判马铃薯感染病毒的种类,影响马铃薯病毒病综合防治工作的开展。目前的马铃薯病毒的检测试纸条都是一次性检测一种病毒,不能同时检测多种病毒,因为多种病毒同时检测时,经常发生不同的病毒粒体相互干扰,是目前无法克服的技术难题。
技术实现思路
[0004]本技术的目的在于克服现有技术的不足之处,提供一种可以同步检测6种马铃薯病毒的试纸条,大大缩短了检测时间,降低了检测成本,提高了检测的准确度和检测效率,可快速检测出马铃薯病毒病发生情况,为马铃薯种苗的脱毒和马铃薯的生产提供了高效可靠的病毒检测手段。
[0005]本技术是通过以下技术方案实现的:
[0006]一种同步检测多种马铃薯病毒的试纸条,包括样品垫1、金标垫2、NC膜3、检测线T1线5、检测线T2线6、检测线T3线7、检测线T4线8、检测线T5线9、检测线T6线10、质控线C线11、吸水垫4和PVC底板12,所述PVC底板12的上部贴合有NC膜3,所述NC膜3上部两端分别搭接有金标垫2和吸水垫4;
[0007]所述金标垫2上部搭接有样品垫1,所述检测线T1线5、检测线T2线6、检测线T3线7、
检测线T4线8、检测线T5线9、检测线T6线10依次设置在靠近样品垫1的NC膜3表面上,且检测线T1线5距离样品垫1最近,检测线T6线10距离样品垫1最远,所述质控线C线11设置在靠近吸水垫4的NC膜3上;
[0008]所述检测线T1线5包被有PLRV兔多克隆抗体;
[0009]所述检测线T2线6包被有PVA兔多克隆抗体;
[0010]所述检测线T3线7包被有PVM羊多克隆抗体;
[0011]所述检测线T4线8包被有PVS羊多克隆抗体;
[0012]所述检测线T5线9包被有PVY兔多克隆抗体;
[0013]所述检测线T6线10包被有PVX兔多克隆抗体;
[0014]所述质控线C线11上包被有马铃薯病毒羊抗兔抗体。
[0015]而且,所述PLRV兔多克隆抗体包被浓度为0.9
‑
2.75
µ
g/cm;
[0016]所述PVA兔多克隆抗体包被浓度为0.75
‑
2.2
µ
g/cm;
[0017]所述PVM羊多克隆抗体包被浓度为0.25
‑
1.65
µ
g/cm;
[0018]所述PVS羊多克隆抗体包被浓度为0.25
‑
1.65
µ
g/cm;
[0019]所述PVY兔多克隆抗体包被浓度为0.3
‑
1.5
µ
g/cm;
[0020]所述PVX兔多克隆抗体包被浓度为0.6
‑
1.0
µ
g/cm;
[0021]所述马铃薯病毒羊抗兔抗体包被浓度为0.4
‑
1.8
µ
g/cm。
[0022]而且,所述金标垫2上结合有马铃薯病毒胶体金标记物混合物;所述马铃薯病毒胶体金标记物混合物为PVA胶体金标记物、PVM胶体金标记物、PVS胶体金标记物、PVX胶体金标记物、PVY胶体金标记物和PLRV胶体金标记物的混合物。
[0023]而且,试纸条外部还设有卡壳13,所述卡壳13上部表面与样品垫1对应的位置上设有加样孔14,所述卡壳13上部表面与所述NC膜3对应的位置上设有观察槽15。
[0024]而且,所述纸条长度为56
‑
73mm,所述样品垫1的长度为16mm
‑
18mm,所述金标垫2的长度为8mm
‑
12mm,所述NC膜3的长度为24mm
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28mm,所述吸水垫4的长度为16mm
‑
20mm;所述NC膜3与金标垫2搭接的长度为1
‑
2mm,所述NC膜3与吸水垫4搭接的长度为2
‑
3mm,所述金标垫2与样品垫1搭接的长度为2
‑
3mm,所述质控线C线11与吸水垫4的距离为2
‑
3.5mm,所述检测线T1线5、检测线T2线6、检测线T3线7、检测线T4线8、检测线T5线9、检测线检测线T6线10之间的距离为2.5
‑
3.5mm,所述检测线T1线与金标垫之间的距离为3
‑
4.5mm,检测线T6线和质控线C线距离为2
‑
4mm。
[0025]而且,所述马铃薯病毒羊抗兔抗体是PVA羊抗兔抗体、PVM羊抗兔抗体,PVS羊抗兔抗体,PVX羊抗兔抗体,PVY羊抗兔抗体和PLRV羊抗兔抗体中的任意一种。
[0026]本技术的优点和积极效果是:
[0027]1、本技术提供一种可同步检测6种马铃薯病毒的试纸条,大大缩短了检测时间,降低了检测成本,提高了检测的准确度,提高了检测效率,可快速检测出马铃薯病毒病发生情况,为马铃薯种苗的脱毒和马铃薯的生产提供了高效可靠的病毒检测手段。
[0028]2、本技术经研究确定了检测线T1线包被PLRV兔多克隆抗体、检测线T2线包被PVA兔多克隆抗体、检测线T3线本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种同步检测多种马铃薯病毒的试纸条,包括样品垫(1)、金标垫(2)、NC膜(3)、检测线T1线(5)、检测线T2线(6)、检测线T3线(7)、检测线T4线(8)、检测线T5线(9)、检测线T6 线(10)、质控线C线(11)、吸水垫(4)和PVC底板(12),所述PVC底板(12)的上部贴合有NC膜(3),所述NC膜(3)上部两端分别搭接有金标垫(2)和吸水垫(4),其特征在于:所述金标垫(2)上部搭接有样品垫(1),所述检测线T1线(5)、检测线T2线(6)、检测线T3线(7)、检测线T4线(8)、检测线T5线(9)、检测线T6线(10)依次设置在靠近样品垫(1)的NC膜(3)表面上,且检测线T1线(5)距离样品垫(1)最近,检测线T6线(10)距离样品垫(1)最远,所述质控线C线(11)设置在靠近吸水垫(4)的NC膜(3)上;所述检测线T1线(5)包被有PLRV兔多克隆抗体;所述检测线T2线(6)包被有PVA兔多克隆抗体;所述检测线T3线(7)包被有PVM羊多克隆抗体;所述检测线T4线(8)包被有PVS羊多克隆抗体;所述检测线T5线(9)包被有PVY兔多克隆抗体;所述检测线T6线(10)包被有PVX兔多克隆抗体;所述质控线C线(11)上包被有马铃薯病毒羊抗兔抗体。2.根据权利要求1所述的一种同步检测多种马铃薯病毒的试纸条,其特征在于:试纸条外部还设有卡壳(13),所述卡壳(13)上部表面与样品垫(1)对应的位置上设有加样孔(14),所述卡壳(13)上部表面与所述NC膜(3)对应的位置上设有观察槽(...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘卫平,李志新,张微,赵雪,张金鹏,付春江,张新宇,张莹莹,
申请(专利权)人:黑龙江省农业科学院克山分院,
类型:新型
国别省市:
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