本申请公开了一种可适用于整体控制青风藤药材、饮片、标准汤剂、提取液、配方颗粒及青风藤其他制剂质量的高效液相特征图谱检测方法。本发明专利技术采用高效液相色谱建立了青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的特征图谱，并确定了6个特征峰，其中2号峰为青藤碱峰。本发明专利技术所建立的HPLC特征图谱检测方法色谱条件梯度简单，峰形好，分离度好，专属性好，精密度高，稳定性、耐用性好，有利于评价青风藤制剂生产全过程相关工艺的科学性、合理性，可用于指导青风藤制剂生产过程工艺参数优化，指导生产制备过程投料、规范生产操作，更能整体控制青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其他青风藤制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保青风藤的临床用药的安全、有效、稳定。稳定。稳定。
【技术实现步骤摘要】
一种青风藤高效液相特征图谱方法的构建
[0001]本申请涉及一种青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒和其它青风藤制剂的特征图谱的HPLC检测方法，属于中药检测、鉴别领域。
技术介绍
[0002]中药特征图谱分析技术是在中药成分研究基础上建立起来的一种综合的、可量化的色谱鉴定手段，可用于整体表征中药的化学成分。它不但可用于整体全面的控制中药及其制剂的质量，而且还是生产标准化（GMP）的准绳，指导中药炮制、提取、制剂等生产过程。
[0003]青风藤为防己科植物青藤Sinomenium acutum（Thunb.）Rehd. et Wils.和毛青藤Sinomenium acutum（Thunb.）Rehd. et Wils.var.cinereum Rehd. et Wils.的干燥藤茎。秋末冬初采割，扎把或切长段，晒干。具有祛风湿，通经络，利小便的作用，用于风湿痹痛，关节肿胀，麻痹瘙痒。
[0004]青风藤的应用迄今为止已有一千多年的历史，特别是近年来，随着风湿、类风湿病发病率的不断上升，对青风藤的研究逐渐受到重视。综述文献表明，对青风藤的化学成分研究主要集中在青藤碱上。目前，《中国药典》2020年版一部项下收载了采用高效液相色谱法测定青藤碱的含量，尚未建立特征图谱检查方法及标准，无法较全面的评价青风藤的药材质量。鉴于中药特征图谱在中药质量评价方面的优势及对生产过程的指导作用，本研究拟建立统一的青风藤药材、饮片、标准汤剂、提取液、浓缩液、喷干粉、配方颗粒特征图谱测定方法，可用于指导青风藤制剂生产制备过程投料、规范生产操作，评价青风藤制剂生产全过程相关工艺的科学性、合理性，优化青风藤生产过程工艺参数，更能整体控制青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其他青风藤制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保青风藤的临床用药的安全、有效、稳定。
技术实现思路
[0005]本专利技术提供了一种适用于青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其他青风藤制剂的HPLC特征图谱检测方法，该方法仅仅使用2个色谱梯度，色谱峰峰形好，分离度好，专属性好，精密度高，稳定性、耐用性好，易于实验室间转移，可用于评价青风藤制剂生产全过程工艺的合理性，优化生产过程工艺参数，更能整体控制青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其他青风藤制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保青风藤的临床用药的安全、有效、稳定。
[0006]本专利技术的青风藤制剂全过程、整体的HPLC指纹图谱的检测方法，包括如下操作步骤：1）参照物溶液的制备：取对照品，溶解，即得对照品参照物溶液，取对照药材，提取，即得对照药材参照物溶液；2）供试品溶液的制备：取青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒，经提取，取续滤液，即得；
3）将青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒、参照物溶液采用高效液相色谱仪分析，得到青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC特征图谱。
[0007]其中步骤1）的参照物溶液包括对照药材参照物溶液和青藤碱对照品参照物溶液。
[0008]其中步骤2）所述提取溶剂是指甲醇、水、甲醇
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水溶液中任一一种，加入溶剂量为50
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100倍。
[0009]进一步的所述提取方法如下：取青风藤药材粉末适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇溶液25 ml，超声提取30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得青风藤药材供试品溶液。
[0010]取青风藤饮片粉末适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇溶液25 ml，超声提取30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得青风藤饮片供试品溶液。
[0011]取青风藤标准汤剂冻干粉样品适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25mL，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得青风藤标准汤剂冻干粉供试品溶液。
[0012]取青风藤水溶液提取液冻干粉样品适量，研细，取约0.3 g，置具塞锥形瓶中，加入50 %甲醇25 ml，超声处理30 min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得水溶液提取液冻干粉供试品溶液。
[0013]取青风藤配方颗粒样品适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25 ml，超声处理30 min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得青风藤配方颗粒供试品溶液。
[0014]其中，HPLC的色谱条件为：以30%四氢呋喃甲醇为流动相A，0.1%磷酸水为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.8~1.2ml/min，柱温为25~35℃，检测波长为312~332nm，进样量为3~12μl。
[0015]进一步地，所述流速为1.0ml/min，柱温为30℃，检测波长为320nm，梯度洗脱条件为：0~8min，流动相A的体积分数变化为5%~5%，流动相B的体积分数变化为95%~95%；8
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50min，流动相A的体积分数变化为5%~55%，流动相B的体积分数变化为95%~45%。
[0016]其中，所用色谱柱为Atlantis T3色谱柱（4.6mm
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250mm，5μm）；进一步地，青风藤药材、饮片、标准汤剂冻干粉、提取液冻干粉、配方颗粒的特征图谱的特征在于：1）供试品色谱中应呈现6个特征峰，并应与对照药材参照物色谱中的6个特征峰保留时间相对应，其中1个峰应与青藤碱对照品参照物峰的保留时间相对应。
[0017]2）与青藤碱参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、3、4、5、6与S峰的相对保留时间，依次应为：0.558，1.573，1.729，1.790，3.603，且其相对保留时间应在规定值的
±
10%范围之内。
[0018]本申请的有益效果包括但不限于：1．本申请首次建立了一种青风藤药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒的HPLC特征图谱，可同时对6种有效成分进行鉴别。
[0019]2．本专利技术构建的HPLC特征图谱充分反应样品的特征峰信息，且色谱条件梯度简单，色谱峰峰形好，分离度好、方法稳定、精密度高、专属性、重现性、耐用性好。
[0020]3．本专利技术为青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及青风藤其他制剂的质量控制提供一种快速、全面的检测手段。
[0021]4．本专利技术可用于评价青风藤制剂生产全过程相关工艺的科学性，优化生产工艺参数，指导生产过程，并可以实现青风藤制剂全过程质量控制。
附图说明
[0022]此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：图1为梯度洗脱条件；图2为表1青风藤配方颗粒特征图谱特征峰相对保留时间；图3为表2青风藤标准汤剂特征图谱特征峰相对保留时间；图4为表3 青风藤药材特征图谱特征峰相对保留时间；图5为表4 青风藤饮片特征图谱特征峰相对保留时间；图6为青风藤药材特征图谱，峰2：青藤碱；图7为青风藤饮片特征图谱，峰2：青藤碱；图8为青风藤标准本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种青风藤药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC的特征图谱检测方法，其特征在于：它包括以下步骤：1）参照物溶液的制备：取对照品，溶解，即得对照品参照物溶液，取对照药材，提取，即得对照药材参照物溶液；2）供试品溶液的制备：取青风藤药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒，经提取，取续滤液，即得；3）将青风藤药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒、参照物溶液采用高效液相色谱仪分析，得到青风藤药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒的HPLC特征图谱。2.根据权利要求1所述的参照物溶液，其特征在于参照物溶液包括对照药材参照物溶液和青藤碱对照品参照物溶液。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2）所述提取溶剂是指甲醇、水、甲醇
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水溶液中任一一种，加入溶剂量为50
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100倍。4.根据权利要求1、3所述的检测方法，其特征在于：步骤2）所述提取方法如下：取青风藤药材粉末适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇溶液25 ml，超声处理30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得青风藤药材供试品溶液；取青风藤饮片粉末适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇溶液25 ml，超声处理30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得青风藤饮片供试品溶液；取青风藤标准汤剂冻干粉样品适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25mL，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得青风藤标准汤剂供试品溶液；取青风藤水溶液提取液冻干粉样品适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25 ml，超声处理30 min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得水溶液提取液冻干粉供试品溶液；取青风藤配方颗粒样品适量，研细，取约0.3g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25...
【专利技术属性】
技术研发人员：曹桂云，耿绍轩，宁波，孟兆青，庄雪松，杨晓刚，张京华，李金鑫，王岱杰，李樱，王丽丽，
申请(专利权)人：山东宏济堂制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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