一种用于诱导免疫的表位多肽与病毒载体组合制造技术

本发明专利技术公开了一种用于诱导免疫的表位多肽与病毒载体组合，属于生物技术领域；本发明专利技术提供了一种来源于多种肠道病毒的具有免疫保护生物学效应的表位多肽，将编码该表位多肽的基因负载于改造后的柯萨奇B3型病毒载体，经注射后可在细胞内成功表达外源蛋白；本发明专利技术将优选的表位多肽与病毒载体组合，相比单纯使用此重组表位多肽，可更加有效地诱导对多种病毒的免疫应答；表位多肽与病毒载体组合后，表位多肽编码的基因片段与病毒载体的相容性稳定，具备很好的遗传稳定性。备很好的遗传稳定性。备很好的遗传稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种用于诱导免疫的表位多肽与病毒载体组合


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种用于诱导免疫的表位多肽与病毒载体组合。

技术介绍

[0002]肠道病毒是一类属于小RNA病毒科肠道病毒属的病毒，可感染儿童和成人，尤其是对儿童的健康和公共卫生具有很大威胁。其中对儿童威胁较大的肠道病毒属的病毒主要包括新肠道病毒EV71型、柯萨奇病毒A16型、柯萨奇病毒A6型等，这类病毒感染儿童后，会引发手足口病、疱疹性咽峡炎等疾病，严重病毒感染可引起中枢神经系统并发症，包括脑炎、脑病等。
[0003]由于肠道病毒属主要的致病病毒种类很多，不同种类的肠道病毒之间免疫交叉反应和保护很弱，因此使用单一种类的疫苗很难对多种流行的肠道病毒起到免疫保护作用。

技术实现思路

[0004]为解决现有技术中的上述问题，本专利技术提供了一种用于诱导免疫的表位多肽与病毒载体组合，经有效的抗原表位进行筛选、优化和组合，并进行有效的免疫生物学分析和计算生物学验证得到一种来源于多种肠道病毒的具有免疫保护生物学效应的表位多肽。
[0005]通过以改造后的柯萨奇B3型病毒为载体，负载上述表位多肽，使所得重组柯萨奇B3型病毒针对新肠道病毒EV71型、柯萨奇病毒A16型及柯萨奇病毒B3型等多种病毒均能产生有效的免疫应答。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一种表位多肽，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0008]本专利技术还提供了一种表位多肽，包括SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或插入的氨基酸序列组成且具有相同功能的多肽。
[0009]本专利技术提供了编码如权利要求1所述的表位多肽的基因，其核酸序列如SEQ ID No.2所示。
[0010]本专利技术提供了一种重组柯萨奇B3型病毒，以改造后的柯萨奇B3型病毒为载体，负载上述表位多肽。
[0011]本专利技术提供了一种疫苗组合物，包括上述重组柯萨奇B3型病毒，以及药学上可接受的载体或佐剂。
[0012]本专利技术提供了上述重组柯萨奇B3型病毒在制备预防或治疗肠道疾病药物中的应用。
[0013]本专利技术还提供了一种药物组合物，包括上述重组柯萨奇B3型病毒，以及药学上可接受的载体或佐剂。
[0014]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0015]本专利技术提供了一种来源于新肠道病毒EV71型、柯萨奇病毒A16型及柯萨奇病毒A6
型多种肠道病毒的具有免疫保护生物学效应的表位多肽，该表位多肽中同时含有分子佐剂，不同于传统多病毒来源表位多肽，本专利技术中的表位多肽是经有效的抗原表位进行筛选、优化和组合，并进行有效的免疫生物学分析和计算生物学验证得到的，能够很好诱导针对常见肠道病毒，如新肠道病毒EV71型、柯萨奇病毒A16型、柯萨奇病毒A6型及柯萨奇病毒B3型等多种病毒的免疫保护应答，避免非免疫效应的表位引发的无效免疫，以及平衡细胞与体液免疫，将编码该表位多肽的基因负载于改造后的柯萨奇B3型病毒载体，经注射后可在细胞内成功表达外源蛋白。本专利技术基于免疫信息学对多种流行肠道病毒的优势保护性抗原表位筛选、鉴定及对接分析，计算机克隆及免疫模拟预测分析抗原表位，构建得到了可对多种肠道病毒进行免疫的多价表位疫苗。
[0016]本专利技术将优选的表位多肽与病毒载体组合，相比单纯使用此重组表位多肽，可更加有效地诱导对多种病毒的免疫应答；优选的表位多肽与病毒载体组合后，表位多肽编码的基因片段与病毒载体的相容性稳定，避免了柯萨奇病毒载体由于其自身的特性，导致的以其作为载体时存在负载外源基因片段小、遗传稳定性弱等缺点，具备很好的遗传稳定性。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1为实施例1重组表位多肽基因诱导表达产物和纯化后的重组表位多肽蛋白的电泳检测结果；
[0019]图2为ELISA检测重组表位多肽以及负载表位多肽的重组柯萨奇B3型病毒免疫小鼠后产生的新肠道病毒EV71型、柯萨奇病毒A16型、柯萨奇病毒A6型及柯萨奇病毒B3型病毒特异性抗体滴度检测结果。
具体实施方式
[0020]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0021]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。
[0022]另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0023]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0024]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本专利技术说明书和实施例仅是示例性的。
[0025]关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
[0026]实施例1
[0027](1)序列号为SEQ ID No.2的基因片段的获得：
[0028]由生物合成公司利用全基因合成或长引物拼接，获得编码SEQ ID No.1所示的表位多肽的基因片段SEQ ID No.2，该序列经密码子优化，其序列为：5
’
[0029]‑
ATGGCGAAACTGTCTACTGATGAACTGCTGGATGCATTCAAAGAGATGACCCTGCTGGAACTGTCCGATTTCGTTAAGAAATTCGAGGAAACCTTTGAAGTGACCGCAGCTGCGCCGGTTGCAGTTGCTGCTGCCGGCGCTGCGCCAGCGGGTGCAGCGGTTGAGGCAGCGGAAGAACAAAGCGAGTTCGACGTAATTCTGGAGGCAGCGGGCGACAAGAAAATTGGTGTAATCAAAGTAGTGCGTGAGATTGTGAGCGGTCTGGGCCTGAAAGAGGCGAAGGACCTGGTAGATGGTGCGC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表位多肽，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。2.一种表位多肽，其特征在于，包括SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或插入的氨基酸序列组成且具有相同功能的多肽。3.编码如权利要求1所述的表位多肽的基因，其特征在于，其核酸序列如SEQ ID No.2所示。4.一种重组柯萨奇B3型病毒，其特征在于，以改造...

【专利技术属性】
技术研发人员：王革非，邓辉雄，谷李铭，李雁嫘，宋鑫利，王婷婷，何绚婷，代剑平，李蕊，
申请(专利权)人：汕头大学医学院，
类型：发明
国别省市：