分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白及其用途制造技术

本申请公开了一种分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其能够与抗原ITPRIPL1中如SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列结合。所述分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白包含氨基酸序列SEQ ID NO:5或14中任一项所示的VH中的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且其包含氨基酸序列SEQ ID NO:6或15中任一项所示的VL中的LCDR1、LCDR2和LCDR3。LCDR2和LCDR3。LCDR2和LCDR3。

【技术实现步骤摘要】
分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白及其用途


[0001]本申请涉及生物医药领域，尤其涉及一种分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白及其用途。

技术介绍

[0002]ITPRIPL1编码蛋白为肌醇1,4,5
‑
三磷酸受体相互作用蛋白样1(Inositol 1,4,5
‑
trisphosphate receptor
‑
interacting protein
‑
like 1)，目前未见到关于ITPRIPL1功能的报道。根据UniProtKB数据库的注释，人类的ITPRIPL1包括555个氨基酸，分为胞外区(1
‑
103氨基酸)、跨膜区(104
‑
124氨基酸)、胞内区(125
‑
555氨基酸)。
[0003]T细胞是适应性免疫反应的关键效应细胞，在消除病原体和自身免疫性疾病中具有许多重要作用。T细胞有几个亚群，每个亚群具有不同的功能。在T细胞表面上发现的TCR(T细胞受体)是由α和β多肽链组成的异二聚体(构成大约95％的TCR群体)，或者是γ和δ多肽链。每种多肽均包含恒定(C)和可变(V)区域。恒定区锚定在细胞膜中，而可变区在细胞外延伸并负责结合抗原。TCR的细胞质短尾缺乏转导信号的能力。细胞内信号传导由CD3蛋白复合物启动，该复合物包含细胞内免疫受体酪氨酸激活基序(ITAM)。
[0004]CD3(分化簇3)T细胞共受体是一种蛋白质复合物，由四个不同的链组成。在哺乳动物中，复合物包含一条CD3γ(γ)链，一条CD3δ(δ)链和两条CD3ε(ε)链。这些链与TCR和ζ链(zeta链)相关，在T淋巴细胞中产生激活信号。TCR，ζ链和CD3分子一起构成TCR复合物。CD3γ，CD3δ和CD3ε链是包含单个细胞外免疫球蛋白结构域的免疫球蛋白超家族的高度相关的细胞表面蛋白。TCR不能结合游离的表位/抗原，相反，TCR会结合酶切的与主要组织相容性复合物(MHC)相关的较大多肽的片段，这与人的人类白细胞抗原(HLA)系统同义。这种相互作用发生在被称为免疫突触的空间中。I类MHC分子在人体所有有核细胞上表达，并向细胞毒性T细胞呈递抗原，这些细胞毒性T细胞上的CD8稳定MHC/TCR相互作用。细胞毒性T细胞的活化随后导致靶细胞的破坏。在巨噬细胞，B细胞和树突状细胞上发现II类MHC。这些免疫细胞将抗原呈递给辅助性T细胞，并带有稳定MHC/TCR相互作用的CD4。MHC II类和TCR之间的相互作用最终导致抗体介导的免疫反应。其他共刺激分子，例如CD45，CD28和CD2有助于免疫突触中的T细胞活化并启动TCR信号体的形成，TCR信号体是负责细胞内信号传导的大分子蛋白质复合物。目前未见ITPRIPL1作为CD3ε配体的报道。
[0005]轴突导向因子semaphorin是一个至少包含20个成员的大家族,它的成员都是分泌型或与膜结合的蛋白。作为SEMA3亚群的一种蛋白，SEMA3G被报道结合NRP2、PlexinA4、PlexinD1，并可调节淋巴管的形成与向淋巴内皮细胞释放反向引导信号。根据Human Protein Atlas数据库的注解，SEMA3G主要表达于血管内皮细胞与调节性T细胞(Treg)上(Protein Sci.2018；27:233
‑
244)。
[0006]目前研究发现ITPRIPL1蛋白表达在肿瘤细胞，且可作为配体结合CD3E和SEMA3G，从而抑制T细胞对肿瘤细胞的杀伤。因此，本领域的技术人员致力于开发一种可以结合ITPRIPL1靶向性抗体用于肿瘤的免疫治疗。

技术实现思路

[0007]为实现上述目的，本申请提供了一种分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其能够与抗原ITPRIPL1中如SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列结合。
[0008]在某些实施方式中，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:5和14中任一项所示的重链可变区VH中的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且其包含氨基酸序列SEQ ID NO:6和15中任一项所示的轻链可变区VL中的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
[0009]在某些实施方式中，其中所述HCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述HCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示，且所述HCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示。
[0010]在某些实施方式中，其中所述LCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO:10或16中的任一项所示，所述LCDR2的氨基酸序列为KV，且所述LCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO:11或17中的任一项。
[0011]在某些实施方式中，其包括抗体重链恒定区，且所述抗体重链恒定区源自人IgG重链恒定区。
[0012]在某些实施方式中，其包括抗体轻链恒定区，且所述抗体轻链恒定区包括人Igκ恒定区。
[0013]在某些实施方式中，其包含抗体重链HC，且所述HC包含SEQ ID NO:3或12中任一项所示的氨基酸序列。
[0014]在某些实施方式中，其包含抗体轻链LC，且所述LC包含SEQ ID NO:4或13中任一项所示的氨基酸序列。
[0015]在某些实施方式中，其包括抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段包括Fab，Fab
’
，F(ab)2、Fv片段、F(ab
’
)2，scFv和/或di
‑
scFv。
[0016]在某些实施方式中，所述ITPRIPL1蛋白包含人ITPRIPL1蛋白。
[0017]在某些实施方式中，所述人ITPRIPL1蛋白包含如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。
[0018]另一方面，本申请还提供了嵌合抗原受体，其包含本申请中所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白。
[0019]另一方面，本申请还提供了免疫耦联物，其包含本申请中所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白。
[0020]另一方面，本申请还提供了分离的一种或多种核酸分子，其编码本申请中所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白或所述的嵌合抗原受体。
[0021]另一方面，本申请还提供了载体，其包含本申请中所述的核酸分子。
[0022]另一方面，本申请还提供了细胞，其包含本申请中所述的核酸分子或所述的载体。
[0023]另一方面，本申请还提供了药物组合物，其包含本申请中所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白、所述的嵌合抗原受体、所述的免疫耦联物，以及任选地药学上可接受的佐剂。
[0024]另一方面，本申请还提供了制备本申请中所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白的方法，所述方法包括在使得本申请中所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白表达的条件下，培养本申请所述的细胞。
[0025]另一方面，本申请还提供了本申请中所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白、所述的嵌合抗原受体、所述的免疫耦联本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其能够与抗原ITPRIPL1中如SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列结合。2.根据权利要求1所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:5和14中任一项所示的重链可变区VH中的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且其包含氨基酸序列SEQ ID NO:6和15中任一项所示的轻链可变区VL中的LCDR1、LCDR2和LCDR3。3.根据权利要求2所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其中所述HCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，所述HCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示，且所述HCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示。4.根据权利要求2所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其中所述LCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO:10或16中的任一项所示，所述LCDR2的氨基酸序列为KV，且所述LCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO:11或17中的任一项。5.根据权利要求1所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其包括抗体重链恒定区，且所述抗体重链恒定区源自人IgG重链恒定区。6.根据权利要求1所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其包括抗体轻链恒定区，且所述抗体轻链恒定区包括人Igκ恒定区。7.根据权利要求1所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其包含抗体重链HC，且所述HC包含SEQ ID NO:3或12中任一项所示的氨基酸序列。8.根据权利要求1所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其包含抗体轻链LC，且所述LC包含SEQ ID NO:4或13中任一项所示的氨基酸序列。9.根据权利要求1所述的分离的抗原ITPRIPL1结合蛋白，其包括抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段包括Fab，Fab
’
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【专利技术属性】
技术研发人员：许杰，邓守言，王运刚，王一婷，宋腾，贺芳，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：