结合TSLP的抗体及其用途制造技术

本公开涉及一种与人TSLP特异性结合的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分。本公开还提供了编码该抗体的核酸分子、表达载体、宿主细胞和表达该抗体的方法。本公开进一步提供了包含该抗体的双特异性分子、免疫缀合物、CAR

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合TSLP的抗体及其用途
相关申请及以引用方式并入
[0001]本申请要求2019年9月4日提交的美国临时申请No.62/895,984的优先权。
[0002]上述申请以及其引用或其审查程序中的所有文献(“申请引用的文献”)、本申请引用或参考的所有文献(包括但不限于本申请引用的所有文献、专利、已公开的专利申请)(“本申请引用的文献”)以及本申请引用的文献中引用或参考的所有文献，连同本申请或通过引用并入本申请的任何文献提及的任何产品的任何制造商的说明、描述、产品规格和产品页，均通过引用的方式并入，并可以用于本专利技术的实践。更具体地，本申请引用的所有参考文献都以相同程度通过引用的方式并入，就如同各文献被具体地和单独地指出通过引用的方式并入本申请一样。本公开提及的任何Genbank序列均通过引用Genbank序列的方式并入，以此引用日期作为本公开最早生效的申请日。


[0003]本公开涉及一种分离的单克隆抗体，特别涉及一种小鼠、嵌合或人源化单克隆抗体或其抗原结合部分，其以高亲和力和功能性特异性结合人TSLP。本公开还提供了编码本公开的抗体或其抗原结合部分的核酸分子，用于表达本公开的抗体或其抗原结合部分的表达载体、宿主细胞和方法。本公开进一步提供了包含本公开的抗体或抗原结合部分的免疫缀合物、双特异性分子、嵌合抗原受体、溶瘤病毒和药物组合物，以及使用本公开的抗TSLP抗体或其抗原结合部分进行诊断和治疗的方法。

技术介绍

[0004]胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是一种由上皮细胞产生的细胞因子。它与IL
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7密切相关，并与TSLPR(IL
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7受体α链和TSLP受体链的异二聚体)结合。TSLP mRNA主要由胸腺、肺、皮肤、肠道和扁桃体中的上皮细胞，以及基质细胞和肥大细胞表达，同时TSLPR mRNA还在多种免疫细胞(包括树突状细胞(DC)、T细胞、B细胞、肥大细胞、NK细胞和单核细胞)，以及心脏、骨骼肌、肾脏和肝脏等组织中被发现(Rui He et al.,(2010)Annals of the New Youk Academy of Sciences 1183:13
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24；Quentmeier Het al.,(2001)Leukemia 15(8):1286
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1292；Rimoldi M et al.,(2005)Nature immunology 6(5):507
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514)。
[0005]由TSLP触发的信号通路已被广泛研究。TSLP在免疫反应的诱导阶段诱导DC细胞极化，促使辅助性T细胞(Th)2的分化和Th2细胞因子的产生，此外TSLP还能直接促进T细胞扩增并提高Th2细胞因子的分泌。因此，TSLP被认为是Th2驱动的炎症的主要调节剂，且TSLP的上调与Th2型细胞相关疾病如特应性皮炎和哮喘的发病机理有关(Rui He et al.,(2010)同上；Ito T et al.,(2005)The Journal ofExperimental Medicine 202(9):1213
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1223；He R et al.,(2008)Proc Natl Acad Sci USA 105(33):11875
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11880)。另一方面，TSLP介导肠道和胸腺中的几种免疫稳态。例如，在细菌的刺激下，TSLP在肠道上皮细胞系中以应变依赖性方式上调，与转化生长因子β协同作用以促进Treg细胞分化。TSLP还可由人类原代肠上皮细胞产生，用于调节CD103
+
DC细胞成为致耐受性表型(Katerina Tsilingiri et al.,
(2017)Cellular andMolecular Gastroenterology and Hepatology 3(2):174
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182；Zeuthen LH et al.,(2008)Immunology 123:197
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208；Iliev ID et al.,(2009)Gut 58:1481
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1489)。
[0006]TSLP对免疫系统的双重作用导致其两个亚型的发现，即长型和短型，其中短型由长型TSLP末端63个氨基酸残基组成。这两种亚型由不同的启动子控制，并依赖于环境、组织和刺激而表达(HaradaM et al.,(2011)Amrican Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology 44:787
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793)。高免疫原性微生物菌株感染后，人肠上皮细胞中长型TSLP的表达上调，短型TSLP的表达下调；而共生性大肠杆菌感染后，则观察到相反的表达模式。此外，健康的屏障表面上仅表达短型TSLP，而长型TSLP的表达仅在烟草暴露后的口腔粘膜病变中上调(Katerina Tsilingiri et al.,(2017)同上)。在一些与TSLP相关的疾病中对TSLP亚型的表达模式也进行了研究。例如，在哮喘、溃疡性结肠炎、特应性皮炎和牛皮癣中观察到长型TSLP的过表达，而在麦胶性肠病中发现长型TSLP的表达降低。在克罗恩病、麦胶性肠病和特应性皮炎中短型TSLP的表达下调(Katerina Tsilingiri et al.,(2017)同上；Fornasa G et al.,(2015)J Allergy Clin Immunol 136:413
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422)。
[0007]TSLP由于其与上述疾病具有相关性而成为临床靶标。有人建议恢复短型TSLP的表达以治疗难治性麦胶性肠病(Biancheri P et al.,(2015)Gut 65:1670
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1680)。人单克隆抗体Tezepelumab被设计用于治疗哮喘和特应性皮炎，并已在II期临床试验中证明，其与安慰剂相比，可降低年哮喘急性发作率(JonathanCorren et al.,(2017)The New England Journal of Medicine 377(10):936
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946)。
[0008]人们越来越期望并追求更多具有更好药物特性的抗体，包括对长型TSLP具有特异性并与短型TSLP相互作用最小化的抗体，从而可能使临床结果得到改善。
[0009]在本申请中对任何文献的引用或标识，并非承认这样的文献可用作本公开的现有技术。专利技术概述
[0010]本公开提供了一种分离的单克隆抗体，例如小鼠、人、嵌合或人源化单克隆抗体或其抗原结合部分，其与TSLP(例如，人TSLP和猴TSLP)结合，并且与现有技术中的抗TSLP抗体例如Tezepelumab相比，具有相当的(如果不是更高的话)TSLP结合亲和力和对TSLP
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TSLPR/IL7R相互作用的阻断活性。
[0011]本公开的抗体或其抗原结合部分具有多种用途，包括检测TSLP蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分结合胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)，其包含：(i)重链可变区，其包含VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，其中，(1)VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3分别包含如SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列；(2)VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3分别包含如SEQ ID NOs：37、38和39所示的氨基酸序列；或(3)VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3分别包含如SEQ ID NOs：47、48和49所示的氨基酸序列；和/或(ii)轻链可变区，其包含VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3，其中，(1)VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3分别包含如SEQ ID NOs：4、5和6所示的氨基酸序列；(2)VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3分别包含如SEQ ID NOs：40、41和42所示的氨基酸序列；或(3)VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3分别包含如SEQ ID NOs：50、51和52所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区包含与SEQ ID NOs：7、8、9(X1＝R、X2＝V、X3＝R；X1＝R、X2＝V、X3＝V；X1＝R、X2＝A、X3＝R；X1＝K、X2＝A、X3＝R；X1＝K、X2＝A、X3＝V)、43或53所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述轻链可变区包含与SEQ ID NOs：10、11(X1＝S、X2＝V；X1＝A、X2＝I；X1＝S、X2＝I)、44或54所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。4.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区和所述轻链可变区包含：(1)分别与SEQ ID NOs：7和10所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(2)分别与SEQ ID NOs：8和11(X1＝S，X2＝V)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(3)分别与SEQ ID NOs：9(X1＝R，X2＝V，X3＝R)和11(X1＝S，X2＝V)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(4)分别与SEQ ID NOs：9(X1＝R，X2＝V，X3＝V)和11(X1＝S，X2＝V)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(5)分别与SEQ ID NOs：9(X1＝R，X2＝A，X3＝R)和11(X1＝S，X2＝V)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(6)分别与SEQ ID NOs：9(X1＝K，X2＝A，X3＝R)和11(X1＝S，X2＝V)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(7)分别与SEQ ID NOs：9(X1＝K，X2＝A，X3＝V)和11(X1＝S，X2＝V)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、
97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(8)分别与SEQ ID NOs：8和11(X1＝A，X2＝I)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(9)分别与SEQ ID NOs：9(X1＝R，X2＝V，X3＝R)和11(X1＝A，X2＝I)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(10)分别与SEQ ID NOs：9(X1＝R，X2＝V，X3＝V)和11(X1＝A，X2＝I)所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(11)分别与SEQ ID NOs：9(X1＝R，X2＝A，X3＝R)和11(X1＝A...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈明久，谭巍，仲晓燕，张正平，邹筱芳，宋伟，徐宏江，
申请(专利权)人：正大天晴药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：